ตัวแปรช่วงก่อนการวิเคราะห์และหลังการวิเคราะห์

ตัวแปรช่วงก่อนการวิเคราะห์และหลังการวิเคราะห์คือปัจจัยภายนอกขั้นตอนการวัดผลที่กำหนดว่าผลลัพธ์ระดับโมเลกุลนั้นถูกต้องและมีประโยชน์หรือไม่ ระยะก่อนการวิเคราะห์ครอบคลุมทุกอย่างก่อนการวิเคราะห์ ตั้งแต่การสั่งการทดสอบและการเตรียมผู้ป่วย ไปจนถึงการเก็บตัวอย่าง การจัดการ การขนส่ง และการสกัดกรดนิวคลีอิก ส่วนระยะหลังการวิเคราะห์ครอบคลุมการคำนวณผล การรายงาน การส่งต่อ และการติดตามผล ข้อผิดพลาดจำนวนมากในกระบวนการทดสอบทั้งหมดมักเกิดขึ้นในระยะเหล่านี้มากกว่าในขั้นตอนการทดสอบจริง

Definition

ตัวแปรช่วงก่อนการวิเคราะห์คือขั้นตอนและเงื่อนไขที่ส่งผลต่อตัวอย่างก่อนการวัดผล (การสั่ง การเก็บ การจัดการ การขนส่ง การจัดเก็บ และการสกัด) ส่วนตัวแปรช่วงหลังการวิเคราะห์คือขั้นตอนหลังการวัดผล (การคำนวณผล การตีความ การรายงาน การส่งต่อ และการติดตามผล) ซึ่งมีอิทธิพลต่อว่าผลลัพธ์นั้นถูกต้องและถูกนำไปใช้อย่างถูกต้องหรือไม่

Scope

บทความนี้ครอบคลุมองค์ประกอบของระยะก่อนการวิเคราะห์และหลังการวิเคราะห์ และเหตุใดจึงมีความสำคัญต่อการทดสอบระดับโมเลกุล ซึ่งคุณภาพของตัวอย่างและความสมบูรณ์ของกรดนิวคลีอิกมีความสำคัญเป็นพิเศษ เป็นหัวข้อทางระเบียบวิธีวิจัยและไม่ได้ให้คำแนะนำเฉพาะเจาะจงเกี่ยวกับการเก็บ การประมวลผล หรือคำแนะนำทางคลินิก บทความเสริมเรื่องตัวแปรช่วงก่อนการวิเคราะห์จะกล่าวถึงการจัดการตัวอย่างภายในคุณภาพของห้องปฏิบัติการในวงกว้างขึ้น

Core questions

• ขั้นตอนใดบ้างที่ประกอบเป็นระยะก่อนการวิเคราะห์และหลังการวิเคราะห์?
• เหตุใดคุณภาพของตัวอย่างและความสมบูรณ์ของกรดนิวคลีอิกจึงมีความสำคัญอย่างยิ่งต่อการทดสอบระดับโมเลกุล?
• ขั้นตอนหลังการวิเคราะห์ส่งผลต่อการนำผลลัพธ์ที่ถูกต้องไปใช้อย่างถูกต้องได้อย่างไร?
• ข้อผิดพลาดมักเกิดขึ้นที่ใดในกระบวนการทดสอบทั้งหมด?

Key concepts

• กระบวนการทดสอบทั้งหมด (วงจรจากสมองสู่สมอง)
• ระยะก่อนการวิเคราะห์
• ระยะหลังการวิเคราะห์
• ความสมบูรณ์และการยอมรับของตัวอย่าง
• คุณภาพและการเสื่อมสภาพของกรดนิวคลีอิก
• ผลกระทบของประเภทตัวอย่างและการตรึง (เช่น FFPE)
• การถอดความและการส่งต่อผลลัพธ์
• การสื่อสารและการติดตามผลลัพธ์วิกฤต

Mechanisms

ในระยะก่อนการวิเคราะห์ การเลือกประเภทตัวอย่าง สารกันเลือดแข็ง การตรึง เวลาในการประมวลผล และการจัดเก็บ จะกำหนดปริมาณและคุณภาพของกรดนิวคลีอิกที่มีอยู่ และเงื่อนไขเหล่านี้จะได้รับการพิจารณาเมื่อมีการตรวจสอบความถูกต้องของการทดสอบระดับโมเลกุลสำหรับตัวอย่างที่ตั้งใจไว้ (Jennings et al., 2009) ผลลัพธ์ระดับโมเลกุลเชิงปริมาณอาจมีความไวต่อการจัดการดังกล่าว ดังนั้นการตรวจสอบความถูกต้องจึงประเมินตัวแปรที่เกี่ยวข้องกับตัวอย่างควบคู่ไปกับประสิทธิภาพการวิเคราะห์ (Milosevic et al., 2018) ในระยะหลังการวิเคราะห์ การคำนวณ การตีความ การจัดรูปแบบรายงาน การส่งต่อ และการติดตามผล แต่ละอย่างอาจทำให้เกิดข้อผิดพลาดหรือความล่าช้าได้ แม้ว่าการวัดผลจะถูกต้องก็ตาม การกำหนดค่าอ้างอิงและการรายงานที่โปร่งใสเป็นกรอบในการแสดงและสื่อสารผลลัพธ์ (CLSI EP28; Bossuyt et al., 2015)

Clinical relevance

เนื่องจากข้อผิดพลาดในห้องปฏิบัติการส่วนใหญ่เกิดขึ้นก่อนและหลังขั้นตอนการวัดผล การให้ความสำคัญกับระยะเหล่านี้จึงช่วยปกป้องความถูกต้องและประโยชน์ของผลลัพธ์ระดับโมเลกุลในการดูแลรักษา บทความนี้อธิบายปัจจัยกระบวนการที่เกี่ยวข้องและไม่ใช่แนวทางในการจัดการตัวอย่างเฉพาะเจาะจงหรือการดำเนินการทางคลินิก

Evidence & guidelines

แนวปฏิบัติช่วงก่อนการวิเคราะห์และหลังการวิเคราะห์ถูกกำหนดโดยมาตรฐานห้องปฏิบัติการและข้อกำหนดการรับรอง แนวทางการตรวจสอบความถูกต้องระดับโมเลกุลกล่าวถึงตัวแปรที่เกี่ยวข้องกับตัวอย่าง (Jennings et al., 2009) แนวทาง CLSI ครอบคลุมวิธีการแสดงผลลัพธ์ (CLSI EP28) และ STARD กล่าวถึงการรายงานหลักฐานที่ได้มาอย่างโปร่งใส (Bossuyt et al., 2015)

History

เวชศาสตร์ห้องปฏิบัติการตระหนักมากขึ้นว่าข้อผิดพลาดมักจะรวมตัวกันอยู่นอกขั้นตอนการวิเคราะห์ โดยมองว่าการทดสอบเป็นกระบวนการทั้งหมดหรือวงจรจากสมองสู่สมอง (brain-to-brain loop) ตั้งแต่การสั่งการไปจนถึงการดำเนินการ การทดสอบระดับโมเลกุลทำให้ความสนใจในระยะก่อนการวิเคราะห์เพิ่มขึ้น เนื่องจากผลผลิตและความสมบูรณ์ของกรดนิวคลีอิกขึ้นอยู่กับการจัดการตัวอย่างอย่างมาก (Jennings et al., 2009)

Seminal works

• jennings-2009

Frequently asked questions

เหตุใดระยะก่อนการวิเคราะห์จึงมีความสำคัญเป็นพิเศษสำหรับการทดสอบระดับโมเลกุล?

การทดสอบระดับโมเลกุลขึ้นอยู่กับปริมาณและความสมบูรณ์ของกรดนิวคลีอิกในตัวอย่าง ซึ่งอาจเสื่อมสภาพได้จากการเก็บที่ไม่ดี การประมวลผลที่ล่าช้า หรือการตรึงที่ไม่เหมาะสม ดังนั้นการจัดการจึงส่งผลโดยตรงต่อความเป็นไปได้ที่จะได้ผลลัพธ์ที่ถูกต้อง

อะไรที่อาจผิดพลาดได้ในระยะหลังการวิเคราะห์?

แม้แต่การวัดผลที่ถูกต้องก็อาจถูกรายงานผิดพลาด ถูกถอดความผิดพลาด ล่าช้า หรือไม่ได้รับการดำเนินการ ขั้นตอนหลังการวิเคราะห์ครอบคลุมการคำนวณ การตีความ การรายงาน การส่งต่อ และการติดตามผลลัพธ์