Biópsia Líquida e Biomarcadores Circulantes

A biópsia líquida analisa biomarcadores liberados no sangue e outros fluidos corporais — principalmente DNA livre de células e DNA tumoral circulante — para obter informações moleculares sem amostrar o tecido diretamente. Ela aplica as ferramentas de amplificação, sequenciamento e quantificação da patologia molecular a quantidades mínimas de ácido nucleico circulando no plasma.

Definition

Biópsia líquida é a análise de material molecular derivado de tumor ou doença, especialmente ácidos nucleicos livres de células circulantes, amostrados do sangue ou outros fluidos corporais, em vez de uma amostra de tecido sólido.

Scope

O tópico abrange a análise de DNA livre de células circulante e DNA tumoral circulante, juntamente com biomarcadores circulantes relacionados, e o desafio analítico de detectar moléculas-alvo raras em um grande contexto normal. É apresentado como material de referência metodológica, e não como orientação para testes clínicos ou tratamento.

Key concepts

• DNA livre de células (cfDNA)
• DNA tumoral circulante (ctDNA)
• Amostragem de plasma e manuseio pré-analítico
• Detecção de alelos raros em relação ao fundo
• Fração tumoral e dinâmica ao longo do tempo
• Perfil molecular minimamente invasivo

Mechanisms

Células moribundas liberam pequenos fragmentos de DNA na corrente sanguínea, e uma fração desse DNA livre de células em pacientes com câncer se origina de células tumorais e carrega mutações específicas do tumor (DNA tumoral circulante). A biópsia líquida isola esse material do plasma e usa métodos de amplificação e sequenciamento altamente sensíveis para detectar fragmentos mutantes raros em um grande contexto de DNA normal, e para rastrear sua abundância ao longo do tempo como uma medida da dinâmica da doença (Diehl et al., 2008; Heitzer et al., 2015). Como o sinal é frequentemente uma pequena fração do DNA livre de células total, o manuseio cuidadoso da amostra e as estratégias de supressão de erros são centrais para uma detecção confiável (Wan et al., 2017).

Clinical relevance

A biópsia líquida oferece uma maneira minimamente invasiva de obter informações moleculares e monitorar mudanças ao longo do tempo. Esta entrada descreve os princípios analíticos como referência; ela não fornece orientação sobre quando usar esses testes ou como agir com base em seus resultados no cuidado individual do paciente.

Evidence & guidelines

O campo é apoiado por estudos primários que demonstram que o DNA mutante circulante reflete a dinâmica tumoral (Diehl et al., 2008) e por revisões que examinam a metodologia e as aplicações do DNA tumoral circulante (Heitzer et al., 2015; Wan et al., 2017; Corcoran & Chabner, 2018). Recomendações detalhadas de validação analítica e relatórios são abordadas em documentos de consenso profissional referenciados por essas revisões.

History

O DNA livre de células no sangue foi descrito pela primeira vez em meados do século XX, mas seu potencial diagnóstico tornou-se prático apenas quando surgiram métodos de amplificação e sequenciamento suficientemente sensíveis. Demonstrações de que o DNA mutante circulante rastreia a carga tumoral (Diehl et al., 2008) catalisaram o campo moderno, e revisões subsequentes mapearam sua maturação em direção a uma aplicação mais ampla (Heitzer et al., 2015; Wan et al., 2017; Corcoran & Chabner, 2018).

Key figures

• Frank Diehl
• Nitzan Rosenfeld
• Ellen Heitzer

Seminal works

• diehl-2008
• heitzer-2015
• wan-2017

Frequently asked questions

O que é DNA tumoral circulante?

É a porção do DNA livre de células no sangue que se origina de células tumorais e carrega alterações genéticas específicas do tumor, permitindo que as características moleculares do tumor sejam examinadas a partir de uma amostra de sangue.

Por que a detecção de DNA tumoral circulante é tecnicamente exigente?

Os fragmentos derivados do tumor são frequentemente uma fração muito pequena do DNA livre de células total, portanto, métodos de amplificação e sequenciamento altamente sensíveis, manuseio cuidadoso da amostra e supressão de erros são necessários para detectar as moléculas mutantes raras de forma confiável.