細胞診検体における分子検査とHPV検出

細胞診検体に対する分子検査は、剥離または吸引によって得られた細胞に核酸ベースのアッセイを適用し、感染、変異、またはその他の臨床的に関連する変化を示すDNAまたはRNAターゲットを検出するものです。子宮頸部細胞診検体における高リスク型ヒトパピローマウイルス（HPV）の検出が最も広く普及している例であり、一方、穿刺吸引検体のシーケンシングは、固形腫瘍への分子診断を拡大しています。

Definition

細胞診検体における分子検査とは、剥離細胞診または吸引細胞診によって得られた細胞、あるいはその液状化残余材料に対して、ウイルス核酸検出や腫瘍変異プロファイリングを含む核酸ベースのアッセイを適用することです。

Scope

本項目では、核酸源としての細胞診および液状化残余材料の使用、子宮頸部スクリーニングにおけるHPV検出、ならびに吸引検体に対する次世代シーケンシングなどのより広範な分子アッセイについて扱います。これは方法論的および参照的な概観であり、スクリーニングプロトコルや治療ガイダンスを提供するものではありません。

Core questions

• 細胞診材料が検査に十分な核酸を産生するかどうかを決定する前分析的要因は何ですか？
• 高リスク型HPV検出は、スクリーニングにおける形態学的子宮頸部細胞診をどのように補完しますか？
• 穿刺吸引検体および残余細胞診材料に対してどのような分子アッセイが実施できますか？

Key concepts

• 細胞診材料からの核酸抽出
• 高リスク型HPV検出
• 分子基質としての液状化細胞診
• リフレックス検査および共検査戦略
• 吸引検体に対する次世代シーケンシング
• 分子アッセイのための検体適格性

Mechanisms

細胞診検体、特に液状化検体は、DNAおよびRNAを抽出できる細胞と残余液を保持しています。これらの核酸は、増幅、ハイブリダイゼーション、またはシーケンシングアッセイによって解析されます。子宮頸部への応用では、持続感染が子宮頸部発がんの根底にある高リスク型HPVのDNAまたはRNAをアッセイが検出し、このような検査は形態学的細胞診と組み合わせるか、あるいはそれに代わるものとして利用できます。固形腫瘍の細胞診では、穿刺吸引検体材料から、診断上または治療上関連する変化を特定するための標的シーケンシングまたは次世代シーケンシングに十分な核酸を供給できます。

Clinical relevance

分子検査は、細胞診検体を分類、リスク層別化、およびバイオマーカー報告に用いられるゲノム情報およびウイルス情報の源に変えます。特にHPV検出は、子宮頸部スクリーニングのパラダイムを再構築しました。本項目では、このような検査がどのように実施されるかを記述しており、特定のスクリーニングアルゴリズムやバイオマーカーに基づく決定は臨床上の問題であり、ここでは個別のアドバイスを提供するものではありません。

Epidemiology

高リスク型HPVの持続感染は、ほぼ全ての子宮頸がんの必須原因であり、このため子宮頸部細胞診検体におけるウイルス核酸の検出は、生物学的に根拠のあるスクリーニングターゲットとなります（Schiffman et al., 2007）。

Evidence & guidelines

ATHENA研究の最終結果を含む無作為化スクリーニングエビデンスは、細胞診ベースのアプローチと比較して、一次HPV検査を第一選択の子宮頸部スクリーニング戦略として評価しています（Wright et al., 2015）。固形腫瘍については、次世代シーケンシングが穿刺吸引細胞診検体に対して実施され、分子診断が得られることが研究によって示されています（Qiu et al., 2015）。

History

高リスク型HPVが子宮頸がんの必須原因であるという発見は、子宮頸部細胞診を純粋な形態学的スクリーニングから、分子共検査、そして後には一次HPVスクリーニングの場へと変革させました。これと並行して、標的がん治療の進展は、穿刺吸引によって得られる少量の検体に対して分子アッセイおよびシーケンシングアッセイを適用する動きを加速させました。

Debates

一次HPV検査は細胞診ベースの子宮頸部スクリーニングに取って代わるべきか？

ATHENAのような試験は、一次HPV検査を第一選択のスクリーニングとして支持していますが、HPV検査、細胞診、およびトリアージの最適な組み合わせについては議論が続いており、スクリーニングプログラムによって異なります。

Seminal works

• schiffman-2007
• wright-2015

Frequently asked questions

細胞診に使用したのと同じ検体で分子検査を行うことはできますか？

多くの場合、可能です。液状化細胞診検体は、核酸を抽出できる残余細胞と液を保持しているため、同じ検体でHPV検出やその他の分子アッセイを行うことができます。

なぜHPV検査は子宮頸がんスクリーニングに用いられるのですか？

高リスク型HPVの持続感染は、ほぼ全ての子宮頸がんの必須原因であるため、ウイルス核酸を検出することでリスクのある集団を特定し、形態学的細胞診を補完するか、一部のプログラムではそれに先行して用いられます。