白血病中的细胞化学和流式细胞术
细胞化学和流式细胞术是实验室技术,它们将白血病诊断从形态学印象转变为明确的谱系和免疫表型。细胞化学染色揭示白血病细胞的酶学和代谢特性,而多参数流式细胞术同时测量多种表面和细胞内标志物,共同确定细胞谱系并检测可测量残留病灶。
Definition
细胞化学和流式细胞术是表征白血病细胞的实验室方法:细胞化学使用染色剂揭示酶学或生化特征(例如髓过氧化物酶活性),而多参数流式细胞术测量每个细胞的多个表面和细胞内抗原,以确定谱系、定义免疫表型并量化残留病灶。
Scope
本主题涵盖了超越形态学特征白血病细胞的方法:经典的细胞化学染色,如髓过氧化物酶染色,以及现代多参数流式细胞免疫分型,包括标准化抗体组和可测量(微小)残留病灶的检测。它是关于实验室方法学的参考资料,而非临床方案。
Key concepts
- 髓过氧化物酶和其他细胞化学染色
- 通过免疫表型确定谱系
- 多参数(多色)流式细胞术
- 标准化抗体组
- 异常抗原表达
- 设门和细胞群分析
- 可测量(微小)残留病灶检测
Mechanisms
细胞化学染色利用细胞特异性酶和成分:例如,髓过氧化物酶活性标志着髓系谱系,有助于在染色涂片上区分急性髓系白血病和急性淋巴细胞白血病。流式细胞术将细胞悬浮在流体中,使其通过激光,并记录来自抗体结合标志物的光散射和荧光,从而可以在每个细胞上测量许多抗原;特征性和异常的抗原组合定义了谱系并识别了白血病细胞群。以高灵敏度应用相同的方法,并使用标准化抗体组,可以在治疗后检测到小的残留白血病细胞群,即为可测量残留病灶(van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018)。
Clinical relevance
这些技术是现代白血病分类所依赖的谱系确定和免疫分型的基础,流式细胞术可测量残留病灶评估已成为文献中重要的反应标志物。本条目在参考层面描述了这些方法,并非用于解释个体患者结果的指南。
Evidence & guidelines
EuroFlow抗体组等标准化工作定义了可重复的流式细胞免疫分型,欧洲白血病网络MRD工作组为急性髓系白血病的可测量残留病灶评估提供了共识标准;谱系标准也已纳入WHO分类(van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018; Arber et al., 2016)。
History
细胞化学染色是最初用于细化急性白血病形态学诊断和确定谱系的方法。随后,流式细胞免疫分型通过测量每个细胞的多个抗原,在很大程度上取代了细胞化学在谱系确定中的作用,标准化倡议和可测量残留病灶共识文件随后将其作用扩展到可重复、高灵敏度的评估中(van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018)。
Related topics
Seminal works
- van-dongen-2012
- schuurhuis-2018
Frequently asked questions
- 为什么髓过氧化物酶染色在急性白血病中很有用?
- 髓过氧化物酶是髓系谱系的标志物,因此其在细胞化学染色中的存在支持急性髓系白血病的诊断,并有助于将其与急性淋巴细胞白血病区分开来。
- 流式细胞术检测可测量残留病灶是什么?
- 它是指使用高灵敏度多参数流式细胞术检测治疗后残留的少量白血病细胞群,这些细胞群低于常规形态学可见的水平,作为反应的标志物。