细胞病理学中的辅助技术和分子方法
辅助技术是在常规巴氏染色和瑞氏染色涂片检查后应用于细胞学材料的实验室方法，旨在完善形态学印象、对肿瘤进行分类或检测临床上可操作的改变。它们将细胞学的范围扩展到单纯的形态学之外，使得细针穿刺、渗出液和脱落细胞制剂等小样本能够提供免疫表型、细胞遗传学和分子信息。
Definition
细胞病理学中的辅助技术是对细胞学制剂或残留细胞材料进行的辅助实验室研究，以补充形态学诊断，包括免疫表型、细胞遗传学、分子和计算方法。
Scope
本领域旨在向读者介绍细胞学标本中使用的主要辅助方法：用于蛋白质标记物的免疫细胞化学、用于染色体和基因水平变化的荧光原位杂交、用于免疫分型细胞悬液的流式细胞术、细胞学材料上的分子和人乳头瘤病毒检测，以及带有自动化图像分析的数字病理学。这是一个结构性概述；每种技术都将在其各自的主题节点中详细介绍。
Sub-topics
Core questions
- 对于特定的细胞学标本和诊断问题，哪种辅助方法是合适的？
- 标本制备和固定如何影响免疫细胞化学、FISH和分子结果的有效性？
- 如何对有限的细胞学材料进行分流，以同时保留形态学和辅助研究？
Key concepts
- 标本充足性和分流
- 细胞蜡块制备
- 免疫表型分析
- 验证和分析前因素
- 反射性检测和辅助检测
- 节省样本的工作流程
Mechanisms
细胞学样本可以作为直接涂片、液基制剂、细胞离心涂片或细胞蜡块进行处理；所选择的制备方法决定了哪些辅助方法是可行的。免疫细胞化学使用标记抗体定位蛋白质抗原，荧光原位杂交使用荧光探针可视化特定DNA序列，流式细胞术测量悬浮细胞上的抗原表达，分子检测则提取和分析核酸。由于细胞学材料通常稀缺，一个反复出现的主题是对样本进行分流，以便形态学和一项或多项辅助研究都能进行。
Clinical relevance
辅助技术拓宽了细胞学样本能够回答的问题，支持肿瘤分类、谱系判定以及生物标志物的检测，这些信息与形态学报告一起呈现。作为参考材料，本领域描述了这些信息是如何产生的；具体的检测选择和解释是临床实验室的决策，此处不提供个性化建议。
Evidence & guidelines
专业机构已经发布了与这些方法相关的验证和报告框架，包括美国病理学家学会关于验证全玻片成像用于诊断用途的指南（Pantanowitz et al., 2013）。特定方法的证据，例如直接在细针穿刺材料上进行的下一代测序（Qiu et al., 2015），在相应的主题节点中进行了总结。
History
细胞病理学最初是一门纯粹基于巴氏染色的形态学学科。在随后的几十年里，免疫细胞化学、原位杂交和流式细胞术，以及最近基于核酸的分子检测和数字图像分析，都从组织病理学和实验室医学中借鉴并应用于细胞学中更小、制备方式不同的样本。
Related topics
Seminal works
- fetsch-abati-2001
- pantanowitz-2013
Frequently asked questions
- 为什么辅助技术在细胞病理学中尤为重要？
- 细胞学样本通常很小且缺乏组织结构，因此增加免疫表型或分子信息的辅助方法通常能够提供仅凭形态学无法实现的明确分类。
- 什么是细胞蜡块？它对辅助检测为何重要？
- 细胞蜡块是由残留细胞学材料制成的石蜡包埋制剂；它提供适用于免疫细胞化学、原位杂交和分子提取的切片，使其成为细胞学标本辅助研究的关键促成因素。