样本采集与制备
样本采集与制备是细胞病理学分析前的基础:通过一系列技术从身体获取细胞材料,并将其制备到载玻片上,以便在显微镜下检查单个细胞。由于细胞学诊断依赖于细胞和小细胞群的形态而非完整的组织结构,因此样本的采集、转移、固定和染色方式在很大程度上决定了是否能做出可靠的诊断。
Definition
样本采集与制备包括细胞制备步骤——取样、转移到载玻片或固定介质、固定和染色——将临床细胞学样本转化为适合形态学判读的显微镜载玻片。
Scope
本领域旨在向读者介绍细胞学中使用的主要制备途径:直接常规涂片、液基处理、固定策略以及两种主要的染色传统(酒精固定的巴氏染色和风干的瑞氏染色)。它将这些方法视为影响样本充分性和可解释性的实验室方法;它不是程序手册,不提供针对患者的具体说明。
Sub-topics
Key concepts
- 细胞学分析前阶段
- 样本充分性和细胞量
- 常规涂片与液基处理
- 湿固定与风干
- 巴氏染色和瑞氏染色
- 固定、透明度和核细节
- 干燥伪影
Mechanisms
细胞学样本最初是悬浮在液体中的细胞或刮取到器械上的细胞。在常规制备中,材料直接涂抹在载玻片上,然后立即固定(湿固定)用于巴氏染色,或允许风干用于瑞氏染色。在液基细胞学中,样本被冲洗到保存液中,然后仪器将一层薄而均匀的细胞单层沉积到载玻片上,从而减少血液、黏液和重叠的遮蔽(Arbyn 2008)。固定可稳定细胞蛋白并保留核染色质细节;染色步骤随后赋予颜色和对比度,从而可以判读细胞核、细胞质和背景。制备和染色的选择与诊断问题相匹配——巴氏染色有利于上皮细胞的核和染色质细节,而风干的瑞氏染色则强调在抽吸细胞学中有用的细胞质和基质特征(Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006)。
Clinical relevance
细胞学样本的充分性和质量为诊断准确性设定了上限,这就是为什么样本制备对于细胞学在筛查和诊断中的作用至关重要。本领域描述了如何生产可靠的细胞学材料,旨在作为理解实验室实践的背景;它不是个体临床决策的基础。
Evidence & guidelines
制备方法的比较证据在宫颈筛查中最为成熟,系统评价发现液基细胞学和常规细胞学具有大致相似的准确性,而液基处理可减少不满意样本(Arbyn 2008; Siebers 2012,引用于液基细胞学条目)。报告框架,如Bethesda系统,包含了明确的样本充分性标准,这些标准直接取决于制备质量(Solomon 2002,引用于相关主题条目)。
History
现代细胞制备起源于乔治·帕帕尼科拉乌(George Papanicolaou)在20世纪早期开发的一种用于固定涂片的多色染色方法,这使得大规模宫颈筛查成为可能。直接涂片和酒精固定主导了实践数十年;从1990年代开始,液基方法引入了标准化的单层制备,该领域继续将分子和辅助检测整合到残留样本材料上(Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014)。
Key figures
- George Papanicolaou
- Leopold Koss
Related topics
Seminal works
- papanicolaou-1942
- arbyn-2008
- koss-melamed-2006
Frequently asked questions
- 细胞学中样本采集和样本制备有什么区别?
- 采集是从患者身上获取细胞样本;制备是实验室处理——转移到载玻片或液体中、固定和染色——将该样本转化为可判读的显微镜载玻片。两者都是决定样本质量的分析前阶段的一部分。
- 为什么细胞学样本在染色前需要固定或风干?
- 固定或受控风干可保留细胞结构,并使细胞以可重复的方式吸收染料。湿固定支持巴氏染色等核细节染色,而刻意风干是瑞氏染色的制备步骤。