细胞学中的荧光原位杂交（FISH）

荧光原位杂交（FISH）利用荧光标记的DNA探针与细胞核中互补序列结合，使特定的染色体区域或基因在荧光显微镜下可见。应用于细胞学样本时，它可以在完整的细胞中直接检测非整倍体、基因扩增、缺失和重排，为形态学评估增加了细胞遗传学维度。

Definition

FISH是一种辅助性细胞遗传学技术，其中荧光标记的核酸探针与细胞学制剂上细胞内的特定DNA靶点杂交，从而实现染色体拷贝数变化和结构重排的可视化。

Scope

本条目涵盖了细胞学制剂上探针杂交的原理、FISH能够解析的基因组异常类型，以及其已建立的细胞学应用，例如尿液和支气管样本中的多靶点检测。它是一个方法学参考，不提供检测或解释方案。

Core questions

• 在给定的细胞学样本中，FISH可以解析哪些染色体或基因水平的异常？
• 探针设计和信号计数标准如何决定阳性结果？
• FISH如何在可疑或非典型样本中补充细胞学形态学？

Key concepts

• 序列特异性探针杂交
• 着丝粒、位点特异性和断裂分离探针
• 非整倍体和拷贝数检测
• 多靶点探针组（例如UroVysion）
• 信号计数和评分阈值
• 应用于载玻片上的完整细胞

Mechanisms

变性的单链探针DNA（由荧光团携带）与固定在载玻片上的细胞中变性的核DNA内的互补靶序列退火；洗去未结合的探针后，在荧光显微镜下计数结合的信号。着丝粒探针报告染色体拷贝数，位点特异性探针检测区域的扩增或缺失，双色断裂分离探针通过配对信号的分离揭示重排。多靶点探针组结合了多个探针，以便在形态学上模糊的细胞中识别恶性肿瘤特有的非整倍体模式。

Clinical relevance

FISH为细胞学增加了客观的细胞遗传学信息，例如有助于评估非典型尿路上皮样本或评估肺部细胞学，它作为形态学审查的辅助而非替代。本条目描述了该方法如何生成信息；具体的检测选择和解释是实验室和临床决策，并非个性化建议。

Evidence & guidelines

针对排泄尿液中多靶点UroVysion检测的配对样本研究，已将其性能与常规细胞学检测尿路上皮癌的性能进行了比较，报告了互补的优势和局限性（Lavery et al., 2017; Dimashkieh et al., 2013）。多靶点FISH也已在支气管细胞学样本中评估用于检测肺癌（Zhai et al., 2015）。

History

原位杂交最初是为组织和染色体制剂开发的；用荧光标记取代放射性标记使得多色、多探针检测变得实用，并允许该技术直接应用于细胞学载玻片。多靶点尿液检测组成为研究最广泛的细胞学应用之一。

Debates

在非典型尿液样本中，FISH和常规细胞学应如何结合使用？

研究表明，FISH和细胞学具有互补的敏感性和特异性，这引发了FISH是最好用作反射性检测、形态学辅助工具还是分流工具的问题，目前尚未普遍采用单一方法。

Seminal works

• dimashkieh-2013
• lavery-2017

Frequently asked questions

FISH在细胞学样本中可以检测哪些类型的异常？

FISH可以通过计数载玻片上单个细胞核中的荧光探针信号来揭示染色体非整倍体、基因扩增和缺失以及结构重排。

FISH是否取代了常规细胞学？

不；它作为辅助手段使用。FISH和形态学细胞学具有互补的优势，FISH增加了细胞遗传学信息，而不是替代对细胞的视觉评估。