Caco-2 Hücre Geçirgenlik Deneyi
Caco-2 Cell Permeability Assay · Ayrıca şöyle bilinir: Caco-2 assay, intestinal permeability, ADME screening
Caco-2 deneyi, ilaçların bağırsak geçirgenliğini taramak için insan kolon karsinomu hücre monokatmanlarını kullanan bir in vitro model sistemidir. Hidalgo ve arkadaşları tarafından 1989'da geliştirilen Caco-2 hücreleri, bağırsak mukozasına benzeyen epitelyal bir bariyer oluşturacak şekilde farklılaşır ve ilaç emilim potansiyelinin hızlı bir şekilde değerlendirilmesini ve taşıyıcı aracılı taşınımın tanımlanmasını sağlar.
Tam yöntemi oku
Bu bölümü okumak için ücretsiz hesapla giriş yapın.
Yöntem haritası
İlişkili yöntemlerin komşuluğu — keşfetmek için bir düğüm seçin.
Ne zaman kullanılır
İlaç keşfinin erken aşamalarında bileşiklerin bağırsak geçirgenliğine göre sıralanması ve ağız yoluyla biyoyararlanımın tahmin edilmesi için Caco-2'yi kullanın. Birlikte uygulanan ilaçları etkileyebilecek taşıyıcı etkileşimlerinin belirlenmesi için kullanışlıdır.
Güçlü yönler & sınırlılıklar
- İnsan ağız yoluyla biyoyararlanımı ile mükemmel korelasyon, özellikle pasif ilaçlar için
- Bağırsak emilimini etkileyen taşıyıcı aracılı taşınımı (P-gp dışa akışı, OATP alımı) belirler
- Hayvan modellerine kıyasla nispeten hızlı ve uygun maliyetli; sonuçlar haftalar içinde elde edilebilir
- Yerleşik kabul kriterlerine sahip standartlaştırılmış deney; laboratuvarlar arasında tekrarlanabilir
- Monokatman taşınımı, in vivo bağırsak ortamını (pH, gıda etkileri, mukus tabakası) tam olarak yakalayamayabilir
- Sıkı monokatman, paracellular taşınımı kullanan bileşikler için geçirgenliği aşırı tahmin edebilir
- Caco-2'deki taşıma mekanizması, GI traktının diğer bölgelerinden (duodenum vs. kolon) farklı olabilir
- Bağırsak metabolizmasını (örneğin, ilk geçiş CYP3A metabolizması) hesaba katmaz; Papp sistemik biyoyararlanımına eşit değildir
SSS
TEER nedir ve neden önemlidir?
TEER (transepitelyal elektriksel direnç), monokatman bütünlüğünü ölçer. Yüksek TEER, sıkı bağlantıların kapalı olduğunu ve ilaç taşınımının öncelikle transelüler (hücreler aracılığıyla) olduğunu gösterir. Düşük TEER, paracellular sızıntıyı düşündürür; sonuçlar güvenilmezdir. Tipik kabul kriteri TEER > 200 ohm·cm'dir.
Papp ve biyoyararlanım arasındaki fark nedir?
Papp, Caco-2'deki taşıma hızıdır; bağırsak geçirgenliği ile ilişkilidir ancak ağız yoluyla biyoyararlanımına eşit değildir. Biyoyararlanım ayrıca emilim hızına, ilk geçiş metabolizmasına ve ilaç çözünürlüğüne de bağlıdır. Yüksek Papp'lı bir ilaç, yoğun metabolizmaya uğrarsa hala zayıf biyoyararlanım gösterebilir.
A→B ve B→A akış oranını nasıl yorumlarım?
Eğer A→B akışı >> B→A akışı ise, ilaç muhtemelen pasif olarak geçer. Eğer B→A >> A→B ise, aktif bir dışa akış taşıyıcısı (örneğin, P-gp) mevcuttur. 1'e yakın oran aktif taşınımın olmadığını düşündürür. Mekanizmayı doğrulamak için taşıyıcı inhibitörleri ile test yapın.
Çözünürlüğü düşük ilaçlar için Caco-2 kullanabilir miyim?
Evet, ancak monokatman toksisitesinden kaçınmak için düşük konsantrasyonlarda çözücü araçlar (DMSO, etanol) kullanın. Alternatif olarak, bağırsak sıvısını taklit eden çözünme ortamları kullanın. Araçların geçirgenlik üzerindeki etkilerini belgeleyin; bazı araçlar sıkı bağlantıları açarak görünür Papp'ı artırır.
Kaynaklar
- Hidalgo, I. J., Raub, T. J., & Borchardt, R. T. (1989). Characterization of the human colon carcinoma cell line (Caco-2) as a model system for intestinal epithelial permeability. Gastroenterology, 96(3), 736-749. DOI: 10.1016/S0016-5085(89)80072-1 ↗
- Artursson, P. (1990). Epithelial transport of drugs in cell culture. I: A model for studying the passive diffusion of drugs over intestinal absorptive (Caco-2) cells. Journal of Pharmaceutical Sciences, 79(6), 476-482. DOI: 10.1002/jps.2600790604 ↗
Bu sayfayı kaynak gösterin
ScholarGate. (2026, June 3). Caco-2 Cell Permeability Assay. ScholarGate. https://scholargate.app/tr/pharmacology/caco-2-permeability
Hangi yöntem?
Bu yöntemi en yakın akrabalarının yanına koyup yan yana okuyun — kütüphane kitapları masaya serer; seçim sizindir.
- Çözünme f1/f2 Benzerlik FaktörüFarmakoloji↔ karşılaştır
- İn Vitro-İn Vivo KorelasyonuFarmakoloji↔ karşılaştır
- Fizyolojik Temelli FarmakokinetikFarmakoloji↔ karşılaştır