Métodos de Teste de Suscetibilidade Antimicrobiana

O teste de suscetibilidade antimicrobiana (TSA) é o conjunto de métodos laboratoriais padronizados utilizados para determinar se um microrganismo é inibido ou morto por um agente antimicrobiano e em que concentração. Seus resultados, tipicamente uma concentração inibitória mínima (CIM) ou um diâmetro de zona de inibição, são interpretados em relação a pontos de corte publicados para classificar o organismo como suscetível, intermediário ou resistente.

Definition

O teste de suscetibilidade antimicrobiana é a medição padronizada da resposta in vitro de um microrganismo a agentes antimicrobianos, expressa como uma CIM ou diâmetro de zona e interpretada em relação a pontos de corte para atribuir uma categoria de suscetível, intermediário ou resistente.

Scope

Esta entrada abrange os principais métodos de TSA, as quantidades que medem e como os resultados são interpretados. Aborda métodos de diluição (microdiluição em caldo, diluição em ágar), métodos de difusão (difusão em disco, fita gradiente) e sistemas automatizados, juntamente com os sistemas de pontos de corte do CLSI e EUCAST. É metodológica e não fornece recomendações de dosagem ou tratamento.

Core questions

• Que concentração de um antimicrobiano inibe o crescimento deste organismo?
• Como os métodos de diluição e difusão diferem no que medem e como são lidos?
• Como uma CIM ou diâmetro de zona medido é traduzido em uma categoria clínica?

Key concepts

• Concentração inibitória mínima (CIM)
• Microdiluição em caldo (método de referência)
• Diluição em ágar
• Difusão em disco (Kirby-Bauer)
• Difusão em gradiente (fita gradiente de CIM)
• Diâmetro da zona de inibição
• Pontos de corte clínicos (CLSI, EUCAST)
• Categorias suscetível-intermediário-resistente
• Cepas de controle de qualidade e inóculo padronizado

Mechanisms

Os métodos de TSA compartilham uma lógica comum: um inóculo padronizado do organismo é exposto a concentrações definidas de um antimicrobiano sob condições controladas, e a inibição do crescimento é lida. Os métodos de diluição (microdiluição em caldo, considerado um método de referência, e diluição em ágar) determinam a menor concentração que inibe o crescimento visível, a CIM. Os métodos de difusão colocam a droga no ágar de modo que ela se difunda para formar um gradiente de concentração: a difusão em disco lê o diâmetro da zona de inibição, enquanto as fitas gradientes leem a CIM onde a elipse de inibição intercepta uma escala calibrada. Sistemas comerciais automatizados geram CIMs a partir de microdiluição em caldo miniaturizada e detecção óptica ou turbidimétrica do crescimento. Os resultados são interpretados em relação a pontos de corte do CLSI ou EUCAST, e regras de especialistas verificam a consistência dos resultados com fenótipos de resistência conhecidos (jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints).

Clinical relevance

Os resultados de suscetibilidade informam o manejo de doenças infecciosas, a gestão de antimicrobianos e a vigilância, e preenchem os antibiogramas cumulativos que os laboratórios relatam. Esta entrada explica como esses resultados são produzidos e interpretados como material de referência; não é uma fonte de decisões diagnósticas ou prescritivas individuais.

Epidemiology

Como o TSA é padronizado, os resultados são comparáveis entre laboratórios e ao longo do tempo, permitindo a agregação em antibiogramas locais e em vigilância de resistência nacional e internacional. A escolha do método, a versão do ponto de corte e o controle de qualidade influenciam a comparabilidade desses dados (clsi-m100; eucast-breakpoints).

History

O teste de suscetibilidade desenvolveu-se nas décadas após a introdução dos antibióticos. O método de difusão em disco foi padronizado na década de 1960 e tornou-se amplamente utilizado por sua simplicidade, enquanto a diluição em caldo e ágar fornecia CIMs quantitativas. Com o tempo, órgãos de padronização, notadamente o CLSI nos Estados Unidos e o EUCAST na Europa, formalizaram métodos, pontos de corte e controle de qualidade, e sistemas automatizados e fitas gradientes ampliaram a prática rotineira (jorgensen-2009).

Debates

Diferenças entre os pontos de corte CLSI e EUCAST

CLSI e EUCAST estabelecem pontos de corte usando processos relacionados, mas distintos, e suas categorizações e a definição da categoria intermediária podem diferir; a harmonização e a interpretação de resultados discrepantes são questões metodológicas contínuas.

Reprodutibilidade próxima aos pontos de corte

As CIMs medidas carregam variabilidade inerente, de modo que os resultados próximos a um ponto de corte podem ser categorizados de forma diferente entre replicatas ou métodos, o que complica a interpretação de organismos limítrofes.

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

O que é uma concentração inibitória mínima (CIM)?

A CIM é a menor concentração de um antimicrobiano que impede o crescimento visível de um organismo sob condições padronizadas; é o resultado quantitativo que os métodos de diluição visam determinar.

Por que existem diferentes métodos de TSA?

Os métodos de diluição fornecem uma CIM numérica, os métodos de difusão, como a difusão em disco, são simples e baratos, e os sistemas automatizados oferecem velocidade e rendimento; os laboratórios escolhem entre eles com base no organismo, nas drogas testadas e nos recursos disponíveis.

O que significam suscetível, intermediário e resistente?

São categorias interpretativas atribuídas comparando uma CIM ou diâmetro de zona medido com pontos de corte estabelecidos por órgãos de padronização; elas resumem a probabilidade de um organismo responder a um agente em condições usuais e são definidas metodologicamente, e não como um conselho de tratamento.