آزمایش حساسیت ضدمیکروبی

آزمایش حساسیت ضدمیکروبی (AST) اندازه‌گیری آزمایشگاهی این است که آیا رشد یک میکروارگانیسم توسط یک عامل ضدمیکروبی مهار می‌شود و در چه غلظتی. با قرار دادن یک جدایه در معرض غلظت‌های مشخص دارو و خواندن نتیجه در برابر نقاط برش تعیین‌شده، آزمایشگاه ارگانیسم را به عنوان حساس، متوسط (یا حساس وابسته به دوز)، یا مقاوم طبقه‌بندی می‌کند.

Definition

آزمایش حساسیت ضدمیکروبی تعیین آزمایشگاهی (in vitro) فعالیت عوامل ضدمیکروبی علیه یک میکروارگانیسم است که معمولاً به صورت حداقل غلظت بازدارنده بیان می‌شود و در برابر نقاط برش استاندارد شده به عنوان حساس، متوسط یا مقاوم تفسیر می‌شود.

Scope

این مدخل اصول روش‌های رقت و انتشار، حداقل غلظت بازدارنده، نقاط برش تفسیری و دسته‌بندی‌های آن‌ها، شناسایی مکانیسم‌های مقاومت مهم بالینی، و نقش داده‌های حساسیت در نظارت بر مقاومت را پوشش می‌دهد. این مطلب به عنوان روش‌شناسی آزمایشگاهی ارائه شده است؛ انتخاب دارو یا دوز برای هیچ بیماری را ارائه نمی‌دهد.

Core questions

• آیا رشد این ارگانیسم توسط یک عامل ضدمیکروبی خاص مهار می‌شود و در چه غلظتی؟
• حداقل غلظت بازدارنده چگونه اندازه‌گیری و در برابر نقاط برش تفسیر می‌شود؟
• کدام روش‌ها – رقت در محیط مایع یا آگار، انتشار دیسک، نوارهای گرادیان، سیستم‌های خودکار – استفاده می‌شوند و مزایا و معایب آن‌ها چیست؟
• مکانیسم‌های مقاومت خاص چگونه شناسایی و گزارش می‌شوند و داده‌های حساسیت چگونه به نظارت کمک می‌کنند؟

Key concepts

• حداقل غلظت بازدارنده (MIC)
• نقاط برش تفسیری
• دسته‌های حساس / متوسط / مقاوم
• روش‌های رقت در محیط مایع و آگار
• انتشار دیسک و انتشار گرادیان
• سیستم‌های خودکار حساسیت
• مکانیسم‌های مقاومت و شناسایی آن‌ها
• نظارت بر مقاومت ضدمیکروبی

Mechanisms

آزمایش حساسیت، تلقیح استاندارد شده‌ای از ارگانیسم را در معرض طیفی از غلظت‌های ضدمیکروبی قرار می‌دهد و مهار رشد را می‌خواند. روش‌های رقت، حداقل غلظت بازدارنده (MIC) را تعیین می‌کنند که پایین‌ترین غلظتی است که از رشد قابل مشاهده جلوگیری می‌کند؛ روش‌های انتشار، یک منطقه مهار رشد را در اطراف یک دیسک حاوی دارو یا نوار گرادیان می‌خوانند و اندازه آن را به حساسیت مرتبط می‌کنند. نتایج در برابر نقاط برش – آستانه‌های غلظتی که توسط نهادهای استاندارد تعیین شده‌اند – تفسیر می‌شوند تا دسته‌های حساس، متوسط یا مقاوم اختصاص داده شوند (Jorgensen & Ferraro, 2009). برخی از جریان‌های کاری، عوامل تعیین‌کننده مقاومت خاص را نیز شناسایی می‌کنند، زیرا مقاومت می‌تواند از طریق مکانیسم‌هایی مانند تغییر آنزیمی دارو، تغییر هدف، خروج فعال (efflux) یا ژن‌های پلاسمیدی قابل انتقال (Strahilevitz et al., 2009) ایجاد شود، و ویژگی‌های مقاومت به روش‌های پیچیده‌ای با حدت و سازگاری باکتریایی تعامل دارند (Beceiro et al., 2013). آزمایش حساسیت سریع‌تر و آموزنده‌تر بخشی از برنامه گسترده‌تر برای تشخیص بهبود یافته بیماری‌های عفونی است (Caliendo et al., 2013).

Clinical relevance

نتایج حساسیت یک ورودی کلیدی برای استدلال بالینی در مورد درمان عفونت و مدیریت ضدمیکروبی است، اما تفسیر آن‌ها به محل عفونت، عامل بیماری‌زا و عوامل بیمار بستگی دارد. این مدخل نحوه اندازه‌گیری و طبقه‌بندی حساسیت را توضیح می‌دهد؛ این یک ماده مرجع است و منبعی برای انتخاب دارو یا توصیه‌های دوز برای هیچ فردی نیست.

Epidemiology

نتایج تجمیع‌شده حساسیت، منبع اصلی داده‌ها برای نظارت بر مقاومت ضدمیکروبی است که نحوه ظهور و گسترش مقاومت در جمعیت‌ها و محیط‌های مراقبت بهداشتی را ردیابی می‌کند. این شناخت که مقاومت می‌تواند بر روی عناصر ژنتیکی متحرک (Strahilevitz et al., 2009) حمل شود و می‌تواند با حدت همبستگی داشته باشد (Beceiro et al., 2013)، زیربنای توجه بهداشت عمومی به داده‌های مقاومت آزمایشگاهی است.

History

آزمایش استاندارد شده حساسیت در طول قرن بیستم از مشاهدات موردی مهار رشد به روش‌های رقت و انتشار تعریف شده با استانداردهای مرجع و نقاط برش تفسیری توسعه یافت، که بعدها با سیستم‌های خودکار و تشخیص مولکولی ژن‌های مقاومت تکمیل شد. بررسی اصول کلی و رویه‌های معاصر توضیح می‌دهد که چگونه این روش‌ها و چارچوب‌های تفسیری آن‌ها استاندارد شدند (Jorgensen & Ferraro, 2009).

Seminal works

• jorgensen-2009
• strahilevitz-2009
• beceiro-2013

Frequently asked questions

حداقل غلظت بازدارنده (MIC) چه اطلاعاتی به شما می‌دهد؟

MIC پایین‌ترین غلظت یک ضدمیکروب است که از رشد قابل مشاهده ارگانیسم در آزمایشگاه (in vitro) جلوگیری می‌کند. با مقایسه با نقاط برش استاندارد شده، برای طبقه‌بندی ارگانیسم به عنوان حساس، متوسط یا مقاوم استفاده می‌شود (Jorgensen & Ferraro, 2009).

چرا روش‌های مختلفی برای آزمایش حساسیت وجود دارد؟

روش‌های رقت یک MIC عددی می‌دهند، در حالی که روش‌های انتشار (دیسک یا گرادیان) حساسیت را از یک منطقه مهار استنباط می‌کنند؛ سیستم‌های خودکار سرعت کار را افزایش می‌دهند. آزمایشگاه‌ها بر اساس ارگانیسم، داروها و نیاز به یک نتیجه عددی در مقابل سرعت، بین آن‌ها انتخاب می‌کنند.