روش‌های آزمایش حساسیت ضدمیکروبی

آزمایش حساسیت ضدمیکروبی (AST) مجموعه‌ای از روش‌های آزمایشگاهی استاندارد شده است که برای تعیین اینکه آیا یک میکروارگانیسم توسط یک عامل ضدمیکروبی مهار یا کشته می‌شود و در چه غلظتی، استفاده می‌شود. نتایج آن، که معمولاً حداقل غلظت بازدارنده (MIC) یا قطر منطقه مهار است، در برابر نقاط برش منتشر شده تفسیر می‌شوند تا ارگانیسم را به عنوان حساس، متوسط یا مقاوم طبقه‌بندی کنند.

Definition

آزمایش حساسیت ضدمیکروبی اندازه‌گیری استاندارد شده پاسخ درون‌کشتگاهی یک میکروارگانیسم به عوامل ضدمیکروبی است که به صورت MIC یا قطر منطقه بیان می‌شود و در برابر نقاط برش تفسیر می‌شود تا یک دسته حساس، متوسط یا مقاوم را اختصاص دهد.

Scope

این مدخل روش‌های اصلی AST، مقادیری که اندازه‌گیری می‌کنند و نحوه تفسیر نتایج را پوشش می‌دهد. این شامل روش‌های رقت (میکرودایلوشن براث، رقت آگار)، روش‌های انتشار (انتشار دیسک، نوار گرادیان) و سیستم‌های خودکار، همراه با سیستم‌های نقطه برش CLSI و EUCAST است. این یک رویکرد روش‌شناختی است و توصیه‌های دوز یا درمان را ارائه نمی‌دهد.

Core questions

• چه غلظتی از یک ضدمیکروب رشد این ارگانیسم را مهار می‌کند؟
• روش‌های رقت و انتشار در آنچه اندازه‌گیری می‌کنند و نحوه خواندن آنها چه تفاوتی دارند؟
• چگونه یک MIC اندازه‌گیری شده یا قطر منطقه به یک دسته بالینی تبدیل می‌شود؟

Key concepts

• حداقل غلظت بازدارنده (MIC)
• میکرودایلوشن براث (روش مرجع)
• رقت آگار
• انتشار دیسک (Kirby-Bauer)
• انتشار گرادیان (نوار گرادیان MIC)
• قطر منطقه مهار
• نقاط برش بالینی (CLSI, EUCAST)
• دسته‌های حساس-متوسط-مقاوم
• سویه‌های کنترل کیفیت و تلقیح استاندارد شده

Mechanisms

روش‌های AST منطق مشترکی دارند: تلقیح استاندارد شده‌ای از ارگانیسم در معرض غلظت‌های تعریف شده‌ای از یک ضدمیکروب تحت شرایط کنترل شده قرار می‌گیرد و مهار رشد خوانده می‌شود. روش‌های رقت (میکرودایلوشن براث، که به عنوان یک روش مرجع در نظر گرفته می‌شود، و رقت آگار) کمترین غلظتی را که رشد قابل مشاهده را مهار می‌کند، یعنی MIC، تعیین می‌کنند. روش‌های انتشار دارو را در آگار قرار می‌دهند تا با انتشار آن یک گرادیان غلظت ایجاد شود: انتشار دیسک قطر منطقه مهار را می‌خواند، در حالی که نوارهای گرادیان MIC را در جایی که بیضی مهار یک مقیاس کالیبره شده را قطع می‌کند، می‌خوانند. سیستم‌های تجاری خودکار MICها را از رقت براث مینیاتوری شده و تشخیص رشد نوری یا کدورت‌سنجی تولید می‌کنند. نتایج در برابر نقاط برش CLSI یا EUCAST تفسیر می‌شوند و قوانین تخصصی نتایج را برای سازگاری با فنوتیپ‌های مقاومت شناخته شده بررسی می‌کنند (jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints).

Clinical relevance

نتایج حساسیت به مدیریت بیماری‌های عفونی، مدیریت ضدمیکروبی و نظارت کمک می‌کنند و آنتی‌بیوگرام‌های تجمعی را که آزمایشگاه‌ها گزارش می‌دهند، پر می‌کنند. این مدخل توضیح می‌دهد که چگونه این نتایج به عنوان مواد مرجع تولید و تفسیر می‌شوند؛ این منبعی برای تصمیمات تشخیصی یا تجویزی فردی نیست.

Epidemiology

از آنجا که AST استاندارد شده است، نتایج در آزمایشگاه‌ها و در طول زمان قابل مقایسه هستند و امکان تجمیع در آنتی‌بیوگرام‌های محلی و در نظارت ملی و بین‌المللی بر مقاومت را فراهم می‌کنند. انتخاب روش، نسخه نقطه برش و کنترل کیفیت همگی بر قابلیت مقایسه این داده‌ها تأثیر می‌گذارند (clsi-m100; eucast-breakpoints).

History

آزمایش حساسیت در دهه‌های پس از معرفی آنتی‌بیوتیک‌ها توسعه یافت. روش انتشار دیسک در دهه 1960 استاندارد شد و به دلیل سادگی آن به طور گسترده مورد استفاده قرار گرفت، در حالی که رقت براث و آگار MICهای کمی را ارائه می‌دادند. با گذشت زمان، نهادهای استاندارد، به ویژه CLSI در ایالات متحده و EUCAST در اروپا، روش‌ها، نقاط برش و کنترل کیفیت را رسمی کردند و سیستم‌های خودکار و نوارهای گرادیان عمل معمول را گسترش دادند (jorgensen-2009).

Debates

تفاوت بین نقاط برش CLSI و EUCAST

CLSI و EUCAST نقاط برش را با استفاده از فرآیندهای مرتبط اما متمایز تعیین می‌کنند و طبقه‌بندی‌های آنها و تعریف دسته متوسط می‌تواند متفاوت باشد؛ هماهنگ‌سازی و تفسیر نتایج متناقض مسائل روش‌شناختی جاری هستند.

قابلیت تکرارپذیری نزدیک نقاط برش

MICهای اندازه‌گیری شده دارای تغییرپذیری ذاتی هستند، بنابراین نتایج نزدیک به یک نقطه برش ممکن است در تکرارها یا روش‌ها به طور متفاوتی طبقه‌بندی شوند، که تفسیر ارگانیسم‌های مرزی را پیچیده می‌کند.

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

حداقل غلظت بازدارنده (MIC) چیست؟

MIC کمترین غلظت یک ضدمیکروب است که از رشد قابل مشاهده یک ارگانیسم تحت شرایط استاندارد جلوگیری می‌کند؛ این نتیجه کمی است که روش‌های رقت قصد تعیین آن را دارند.

چرا روش‌های AST مختلفی وجود دارد؟

روش‌های رقت یک MIC عددی می‌دهند، روش‌های انتشار مانند انتشار دیسک ساده و ارزان هستند، و سیستم‌های خودکار سرعت و توان عملیاتی را ارائه می‌دهند؛ آزمایشگاه‌ها بر اساس ارگانیسم، داروهای آزمایش شده و منابع موجود بین آنها انتخاب می‌کنند.

حساس، متوسط و مقاوم به چه معناست؟

آنها دسته‌های تفسیری هستند که با مقایسه یک MIC اندازه‌گیری شده یا قطر منطقه با نقاط برش تعیین شده توسط نهادهای استاندارد اختصاص داده می‌شوند؛ آنها احتمال پاسخ یک ارگانیسم به یک عامل را در شرایط معمول خلاصه می‌کنند و به جای توصیه درمانی، به صورت روش‌شناختی تعریف می‌شوند.