เซลล์เคมีและโฟลว์ไซโตเมทรีในโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว

เซลล์เคมีและโฟลว์ไซโตเมทรีเป็นเทคนิคทางห้องปฏิบัติการที่เปลี่ยนการวินิจฉัยโรคมะเร็งเม็ดเลือดขาวจากการสังเกตทางสัณฐานวิทยาไปสู่การระบุสายเซลล์และอิมมูโนฟีโนไทป์ที่ชัดเจน การย้อมสีทางเซลล์เคมีเผยให้เห็นคุณสมบัติของเอนไซม์และการเผาผลาญของเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาว ในขณะที่โฟลว์ไซโตเมทรีแบบหลายพารามิเตอร์จะวัดเครื่องหมายบนพื้นผิวและภายในเซลล์หลายชนิดพร้อมกัน ซึ่งช่วยในการกำหนดสายเซลล์และตรวจจับโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้

Definition

เซลล์เคมีและโฟลว์ไซโตเมทรีเป็นวิธีการทางห้องปฏิบัติการสำหรับการจำแนกลักษณะของเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาว: เซลล์เคมีใช้การย้อมสีที่เผยให้เห็นคุณสมบัติของเอนไซม์หรือชีวเคมี (เช่น กิจกรรมของไมอีโลเปอร์ออกซิเดส) และโฟลว์ไซโตเมทรีแบบหลายพารามิเตอร์จะวัดแอนติเจนบนพื้นผิวและภายในเซลล์หลายชนิดต่อเซลล์ เพื่อกำหนดสายเซลล์ ระบุอิมมูโนฟีโนไทป์ และหาปริมาณโรคที่เหลืออยู่

Scope

หัวข้อนี้ครอบคลุมวิธีการที่ใช้ในการจำแนกลักษณะของเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวนอกเหนือจากสัณฐานวิทยา ได้แก่ การย้อมสีทางเซลล์เคมีแบบดั้งเดิม เช่น ไมอีโลเปอร์ออกซิเดส และการทำอิมมูโนฟีโนไทป์ด้วยโฟลว์ไซโตเมทรีแบบหลายพารามิเตอร์ที่ทันสมัย รวมถึงแผงแอนติบอดีมาตรฐานและการตรวจจับโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้ (น้อยที่สุด) เนื้อหานี้เป็นข้อมูลอ้างอิงเกี่ยวกับระเบียบวิธีทางห้องปฏิบัติการ ไม่ใช่ระเบียบวิธีทางคลินิก

Key concepts

• ไมอีโลเปอร์ออกซิเดสและการย้อมสีทางเซลล์เคมีอื่นๆ
• การกำหนดสายเซลล์ด้วยอิมมูโนฟีโนไทป์
• โฟลว์ไซโตเมทรีแบบหลายพารามิเตอร์ (หลายสี)
• แผงแอนติบอดีมาตรฐาน
• การแสดงออกของแอนติเจนที่ผิดปกติ
• การเกตและการวิเคราะห์ประชากร
• การตรวจจับโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้ (น้อยที่สุด)

Mechanisms

การย้อมสีทางเซลล์เคมีใช้ประโยชน์จากเอนไซม์และส่วนประกอบเฉพาะของเซลล์: ตัวอย่างเช่น กิจกรรมของไมอีโลเปอร์ออกซิเดสเป็นเครื่องหมายของสายเซลล์ไมอีลอยด์และช่วยแยกมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเฉียบพลันไมอีลอยด์ออกจากมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเฉียบพลันลิมโฟบลาสติกบนสเมียร์ที่ย้อมสี โฟลว์ไซโตเมทรีจะแขวนเซลล์ในกระแสที่ไหลผ่านเลเซอร์และบันทึกการกระเจิงของแสงและการเรืองแสงจากเครื่องหมายที่จับกับแอนติบอดี ทำให้สามารถวัดแอนติเจนหลายชนิดในแต่ละเซลล์ได้; การรวมกันของแอนติเจนที่มีลักษณะเฉพาะและผิดปกติจะกำหนดสายเซลล์และระบุประชากรเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาว วิธีการเดียวกันนี้ เมื่อนำมาใช้ด้วยความไวสูงกับแผงมาตรฐาน จะตรวจจับประชากรเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวที่เหลืออยู่จำนวนน้อยหลังการรักษาว่าเป็นโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้ (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018)

Clinical relevance

เทคนิคเหล่านี้เป็นพื้นฐานของการกำหนดสายเซลล์และการทำอิมมูโนฟีโนไทป์ที่การจำแนกประเภทของมะเร็งเม็ดเลือดขาวสมัยใหม่ต้องพึ่งพา และการประเมินโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้ด้วยโฟลว์ไซโตเมทรีได้กลายเป็นเครื่องหมายการตอบสนองที่สำคัญในวรรณกรรม บทความนี้อธิบายวิธีการในระดับอ้างอิงและไม่ใช่แนวทางสำหรับการตีความผลลัพธ์ของผู้ป่วยแต่ละราย

Evidence & guidelines

ความพยายามในการสร้างมาตรฐาน เช่น แผงแอนติบอดี EuroFlow กำหนดการทำอิมมูโนฟีโนไทป์ด้วยโฟลว์ไซโตเมทรีที่ทำซ้ำได้ และคณะทำงาน European LeukemiaNet MRD ให้เกณฑ์ที่เป็นเอกฉันท์สำหรับการประเมินโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้ในมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเฉียบพลันไมอีลอยด์; เกณฑ์สายเซลล์ยังถูกรวมอยู่ในระบบการจำแนกประเภทขององค์การอนามัยโลก (WHO) (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018; Arber et al., 2016)

History

การย้อมสีทางเซลล์เคมีเป็นวิธีการดั้งเดิมในการปรับปรุงการวินิจฉัยทางสัณฐานวิทยาของมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเฉียบพลันและการกำหนดสายเซลล์ การทำอิมมูโนฟีโนไทป์ด้วยโฟลว์ไซโตเมทรีได้เข้ามาแทนที่เซลล์เคมีส่วนใหญ่สำหรับการกำหนดสายเซลล์โดยการวัดแอนติเจนหลายชนิดต่อเซลล์ และความคิดริเริ่มในการสร้างมาตรฐานและเอกสารที่เป็นเอกฉันท์เกี่ยวกับโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้ในภายหลังได้ขยายบทบาทของมันไปสู่การประเมินที่ทำซ้ำได้และมีความไวสูง (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018)

Seminal works

• van-dongen-2012
• schuurhuis-2018

Frequently asked questions

เหตุใดการย้อมสีไมอีโลเปอร์ออกซิเดสจึงมีประโยชน์ในมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเฉียบพลัน?

ไมอีโลเปอร์ออกซิเดสเป็นเครื่องหมายของสายเซลล์ไมอีลอยด์ ดังนั้นการมีอยู่ของมันในการย้อมสีทางเซลล์เคมีจึงสนับสนุนการวินิจฉัยมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเฉียบพลันไมอีลอยด์และช่วยแยกความแตกต่างจากมะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดเฉียบพลันลิมโฟบลาสติก

การตรวจจับโรคที่เหลืออยู่ซึ่งสามารถวัดได้ด้วยโฟลว์ไซโตเมทรีคืออะไร?

เป็นการใช้โฟลว์ไซโตเมทรีแบบหลายพารามิเตอร์ที่มีความไวสูงเพื่อตรวจจับประชากรเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวจำนวนน้อยที่ยังคงอยู่หลังการรักษา ซึ่งต่ำกว่าระดับที่มองเห็นได้ด้วยสัณฐานวิทยาตามปกติ เพื่อเป็นเครื่องหมายของการตอบสนอง