रोगाणुरोधी संवेदनशीलता परीक्षण के तरीके

रोगाणुरोधी संवेदनशीलता परीक्षण (AST) मानकीकृत प्रयोगशाला विधियों का एक समूह है जिसका उपयोग यह निर्धारित करने के लिए किया जाता है कि एक सूक्ष्मजीव रोगाणुरोधी एजेंट द्वारा बाधित या मारा जाता है या नहीं और किस सांद्रता पर। इसके आउटपुट, आमतौर पर न्यूनतम निरोधात्मक सांद्रता (MIC) या एक निरोधात्मक क्षेत्र व्यास, को प्रकाशित ब्रेकपॉइंट के विरुद्ध व्याख्या किया जाता है ताकि जीव को संवेदनशील, मध्यवर्ती या प्रतिरोधी के रूप में वर्गीकृत किया जा सके।

Definition

रोगाणुरोधी संवेदनशीलता परीक्षण रोगाणुरोधी एजेंटों के प्रति सूक्ष्मजीव की इन विट्रो प्रतिक्रिया का मानकीकृत माप है, जिसे MIC या ज़ोन व्यास के रूप में व्यक्त किया जाता है और एक संवेदनशील, मध्यवर्ती या प्रतिरोधी श्रेणी निर्दिष्ट करने के लिए ब्रेकपॉइंट के विरुद्ध व्याख्या की जाती है।

Scope

यह प्रविष्टि प्रमुख AST विधियों, उनके द्वारा मापी जाने वाली मात्राओं और परिणामों की व्याख्या कैसे की जाती है, को शामिल करती है। यह तनुकरण विधियों (ब्रोथ माइक्रोडीलुशन, अगर तनुकरण), प्रसार विधियों (डिस्क प्रसार, ग्रेडिएंट स्ट्रिप), और स्वचालित प्रणालियों, साथ ही CLSI और EUCAST की ब्रेकपॉइंट प्रणालियों को संबोधित करती है। यह पद्धतिगत है और खुराक या उपचार संबंधी सिफारिशें प्रदान नहीं करती है।

Core questions

• एक रोगाणुरोधी की कितनी सांद्रता इस जीव के विकास को रोकती है?
• तनुकरण और प्रसार विधियाँ जो वे मापते हैं और उन्हें कैसे पढ़ा जाता है, उसमें कैसे भिन्न होती हैं?
• मापा गया MIC या ज़ोन व्यास को नैदानिक श्रेणी में कैसे अनुवादित किया जाता है?

Key concepts

• न्यूनतम निरोधात्मक सांद्रता (MIC)
• ब्रोथ माइक्रोडीलुशन (संदर्भ विधि)
• अगर तनुकरण
• डिस्क प्रसार (किर्बी-बाउर)
• ग्रेडिएंट प्रसार (MIC ग्रेडिएंट स्ट्रिप)
• अवरोध क्षेत्र व्यास
• नैदानिक ब्रेकपॉइंट (CLSI, EUCAST)
• संवेदनशील-मध्यवर्ती-प्रतिरोधी श्रेणियाँ
• गुणवत्ता नियंत्रण स्ट्रेन और मानकीकृत इनोकुलम

Mechanisms

AST विधियों में एक सामान्य तर्क होता है: जीव के एक मानकीकृत इनोकुलम को नियंत्रित परिस्थितियों में एक रोगाणुरोधी की परिभाषित सांद्रता के संपर्क में लाया जाता है, और विकास अवरोध को पढ़ा जाता है। तनुकरण विधियाँ (ब्रोथ माइक्रोडीलुशन, जिसे एक संदर्भ विधि माना जाता है, और अगर तनुकरण) सबसे कम सांद्रता निर्धारित करती हैं जो दृश्यमान विकास को रोकती है, MIC। प्रसार विधियाँ दवा को अगर में रखती हैं ताकि यह एक सांद्रता ढाल बनाने के लिए फैल जाए: डिस्क प्रसार अवरोध क्षेत्र के व्यास को पढ़ता है, जबकि ग्रेडिएंट स्ट्रिप्स MIC को पढ़ती हैं जहाँ अवरोध दीर्घवृत्त एक कैलिब्रेटेड पैमाने को काटता है। स्वचालित वाणिज्यिक प्रणालियाँ लघु ब्रोथ तनुकरण और ऑप्टिकल या टर्बिडीमेट्रिक विकास का पता लगाने से MIC उत्पन्न करती हैं। परिणामों की व्याख्या CLSI या EUCAST के ब्रेकपॉइंट के विरुद्ध की जाती है, और विशेषज्ञ नियम ज्ञात प्रतिरोध फेनोटाइप के साथ संगति के लिए परिणामों की क्रॉस-चेक करते हैं (jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints)।

Clinical relevance

संवेदनशीलता परिणाम संक्रामक-रोग प्रबंधन, रोगाणुरोधी प्रबंधन और निगरानी को सूचित करते हैं, और वे प्रयोगशालाओं द्वारा रिपोर्ट किए गए संचयी एंटीबायोग्राम को भरते हैं। यह प्रविष्टि बताती है कि उन परिणामों को संदर्भ सामग्री के रूप में कैसे उत्पादित और व्याख्या किया जाता है; यह व्यक्तिगत नैदानिक या नुस्खे संबंधी निर्णयों का स्रोत नहीं है।

Epidemiology

चूंकि AST मानकीकृत है, परिणाम प्रयोगशालाओं और समय के साथ तुलनीय होते हैं, जिससे स्थानीय एंटीबायोग्राम और राष्ट्रीय और अंतर्राष्ट्रीय प्रतिरोध निगरानी में एकत्रीकरण सक्षम होता है। विधि का चुनाव, ब्रेकपॉइंट संस्करण और गुणवत्ता नियंत्रण सभी इन डेटा की तुलनीयता को प्रभावित करते हैं (clsi-m100; eucast-breakpoints)।

History

एंटीबायोटिक दवाओं की शुरुआत के दशकों बाद संवेदनशीलता परीक्षण विकसित हुआ। डिस्क प्रसार विधि को 1960 के दशक में मानकीकृत किया गया था और इसकी सादगी के लिए व्यापक रूप से उपयोग किया जाने लगा, जबकि ब्रोथ और अगर तनुकरण ने मात्रात्मक MIC प्रदान किए। समय के साथ, मानक निकायों, विशेष रूप से संयुक्त राज्य अमेरिका में CLSI और यूरोप में EUCAST ने विधियों, ब्रेकपॉइंट और गुणवत्ता नियंत्रण को औपचारिक रूप दिया, और स्वचालित प्रणालियों और ग्रेडिएंट स्ट्रिप्स ने नियमित अभ्यास को व्यापक बनाया (jorgensen-2009)।

Debates

CLSI और EUCAST ब्रेकपॉइंट के बीच अंतर

CLSI और EUCAST संबंधित लेकिन विशिष्ट प्रक्रियाओं का उपयोग करके ब्रेकपॉइंट निर्धारित करते हैं, और उनके वर्गीकरण और मध्यवर्ती श्रेणी की परिभाषा भिन्न हो सकती है; सामंजस्य और विसंगतिपूर्ण परिणामों की व्याख्या चल रहे पद्धतिगत मुद्दे हैं।

ब्रेकपॉइंट के पास पुनरुत्पादन क्षमता

मापा गया MIC में अंतर्निहित परिवर्तनशीलता होती है, इसलिए ब्रेकपॉइंट के करीब के परिणामों को प्रतिकृतियों या विधियों में अलग-अलग वर्गीकृत किया जा सकता है, जो सीमावर्ती जीवों की व्याख्या को जटिल बनाता है।

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

न्यूनतम निरोधात्मक सांद्रता (MIC) क्या है?

MIC एक रोगाणुरोधी की सबसे कम सांद्रता है जो मानकीकृत परिस्थितियों में एक जीव के दृश्यमान विकास को रोकती है; यह मात्रात्मक परिणाम है जिसे तनुकरण विधियों का उद्देश्य निर्धारित करना है।

विभिन्न AST विधियाँ क्यों हैं?

तनुकरण विधियाँ एक संख्यात्मक MIC देती हैं, डिस्क प्रसार जैसी प्रसार विधियाँ सरल और सस्ती होती हैं, और स्वचालित प्रणालियाँ गति और थ्रूपुट प्रदान करती हैं; प्रयोगशालाएँ जीव, परीक्षण की गई दवाओं और उपलब्ध संसाधनों के आधार पर उनमें से चुनती हैं।

संवेदनशील, मध्यवर्ती और प्रतिरोधी का क्या अर्थ है?

वे मानक निकायों द्वारा निर्धारित ब्रेकपॉइंट के साथ मापा गया MIC या ज़ोन व्यास की तुलना करके निर्दिष्ट व्याख्यात्मक श्रेणियां हैं; वे इस संभावना को सारांशित करते हैं कि एक जीव सामान्य परिस्थितियों में एक एजेंट का जवाब देगा और उपचार सलाह के बजाय पद्धतिगत रूप से परिभाषित किया जाता है।