Các biến số tiền phân tích và hậu phân tích

Các biến số tiền phân tích và hậu phân tích là những yếu tố bên ngoài bước đo lường quyết định liệu một kết quả phân tử có hợp lệ và hữu ích hay không. Giai đoạn tiền phân tích bao gồm mọi thứ trước khi phân tích, từ việc đặt xét nghiệm và chuẩn bị bệnh nhân đến thu thập mẫu vật, xử lý, vận chuyển và chiết xuất axit nucleic; giai đoạn hậu phân tích bao gồm tính toán kết quả, báo cáo, truyền tải và theo dõi. Nhiều lỗi trong toàn bộ quy trình xét nghiệm phát sinh ở các giai đoạn này hơn là trong xét nghiệm.

Definition

Các biến số tiền phân tích là các bước và điều kiện ảnh hưởng đến mẫu vật trước khi đo lường (đặt hàng, thu thập, xử lý, vận chuyển, lưu trữ và chiết xuất); các biến số hậu phân tích là các bước sau khi đo lường (tính toán kết quả, diễn giải, báo cáo, truyền tải và theo dõi) ảnh hưởng đến việc kết quả có đúng và được sử dụng đúng cách hay không.

Scope

Mục này bao gồm các thành phần của giai đoạn tiền phân tích và hậu phân tích và lý do tại sao chúng quan trọng đối với các xét nghiệm phân tử, nơi chất lượng mẫu vật và tính toàn vẹn của axit nucleic đặc biệt quan trọng. Đây là một chủ đề về phương pháp luận và không đưa ra hướng dẫn cụ thể về việc thu thập, xử lý hoặc hướng dẫn lâm sàng. Một mục bổ sung, các biến số tiền phân tích, đề cập đến việc xử lý mẫu vật trong phạm vi chất lượng phòng thí nghiệm rộng hơn.

Core questions

• Những bước nào tạo nên các giai đoạn tiền phân tích và hậu phân tích?
• Tại sao chất lượng mẫu vật và tính toàn vẹn của axit nucleic lại quan trọng đối với các xét nghiệm phân tử?
• Các bước hậu phân tích ảnh hưởng như thế nào đến việc một kết quả đúng được sử dụng đúng cách?
• Lỗi thường xảy ra ở đâu trong toàn bộ quy trình xét nghiệm?

Key concepts

• Quy trình xét nghiệm tổng thể (vòng lặp từ não đến não)
• Giai đoạn tiền phân tích
• Giai đoạn hậu phân tích
• Tính toàn vẹn và khả năng chấp nhận của mẫu vật
• Chất lượng và sự thoái hóa của axit nucleic
• Ảnh hưởng của loại mẫu và cố định (ví dụ: FFPE)
• Sao chép và truyền tải kết quả
• Truyền thông và theo dõi kết quả quan trọng

Mechanisms

Trong giai đoạn tiền phân tích, việc lựa chọn loại mẫu vật, chất chống đông, cố định, thời gian xử lý và lưu trữ quyết định số lượng và chất lượng axit nucleic có sẵn, và các điều kiện này được giải quyết khi một xét nghiệm phân tử được xác nhận cho các mẫu vật dự định của nó (Jennings et al., 2009). Các kết quả phân tử định lượng có thể nhạy cảm với việc xử lý như vậy, vì vậy việc xác nhận đánh giá các biến số liên quan đến mẫu vật cùng với hiệu suất phân tích (Milosevic et al., 2018). Trong giai đoạn hậu phân tích, việc tính toán, diễn giải, định dạng báo cáo, truyền tải và theo dõi đều có thể gây ra lỗi hoặc chậm trễ ngay cả khi phép đo là chính xác; định nghĩa giá trị tham chiếu và báo cáo minh bạch định hình cách kết quả được thể hiện và truyền đạt (CLSI EP28; Bossuyt et al., 2015).

Clinical relevance

Vì một phần đáng kể các lỗi phòng thí nghiệm phát sinh trước và sau bước đo lường, việc chú ý đến các giai đoạn này bảo vệ tính hợp lệ và hữu ích của các kết quả phân tử trong chăm sóc. Mục này giải thích các yếu tố quy trình liên quan và không phải là hướng dẫn về việc xử lý mẫu vật cụ thể hoặc hành động lâm sàng.

Evidence & guidelines

Thực hành tiền phân tích và hậu phân tích được định hình bởi các tiêu chuẩn phòng thí nghiệm và yêu cầu công nhận; các hướng dẫn xác nhận phân tử đề cập đến các biến số liên quan đến mẫu vật (Jennings et al., 2009), hướng dẫn CLSI bao gồm cách kết quả được thể hiện (CLSI EP28), và STARD đề cập đến việc báo cáo minh bạch các bằng chứng thu được (Bossuyt et al., 2015).

History

Y học phòng thí nghiệm ngày càng nhận ra rằng các lỗi thường tập trung bên ngoài bước phân tích, coi xét nghiệm là một quy trình tổng thể hoặc vòng lặp từ não đến não từ việc đặt hàng đến hành động. Xét nghiệm phân tử đã tăng cường sự chú ý đến giai đoạn tiền phân tích vì năng suất và tính toàn vẹn của axit nucleic phụ thuộc nhiều vào việc xử lý mẫu vật (Jennings et al., 2009).

Seminal works

• jennings-2009

Frequently asked questions

Tại sao giai đoạn tiền phân tích đặc biệt quan trọng đối với các xét nghiệm phân tử?

Các xét nghiệm phân tử phụ thuộc vào số lượng và tính toàn vẹn của axit nucleic trong mẫu vật, có thể bị thoái hóa do thu thập kém, xử lý chậm trễ hoặc cố định không phù hợp, do đó việc xử lý trực tiếp ảnh hưởng đến việc liệu một kết quả hợp lệ có thể đạt được hay không.

Điều gì có thể sai trong giai đoạn hậu phân tích?

Ngay cả một phép đo chính xác cũng có thể bị báo cáo sai, sao chép sai, chậm trễ hoặc không được thực hiện; các bước hậu phân tích bao gồm tính toán, diễn giải, báo cáo, truyền tải và theo dõi kết quả.