Thẩm định và Đánh giá Hiệu suất Xét nghiệm

Thẩm định và đánh giá hiệu suất xét nghiệm là tổng thể các công việc nhằm chứng minh rằng một xét nghiệm phân tử đo lường đúng những gì nó tuyên bố, có thể tái lập, và hỗ trợ cho mục đích sử dụng lâm sàng dự kiến. Nó phân biệt giữa thẩm định phân tích (liệu xét nghiệm có đo lường đúng chất phân tích không?) với thẩm định lâm sàng (liệu kết quả có phản ánh đúng tình trạng lâm sàng không?), và định lượng hiệu suất bằng các chỉ số như độ chính xác, độ đúng, độ nhạy, độ đặc hiệu và giới hạn phát hiện.

Definition

Thẩm định xét nghiệm là quá trình được ghi lại nhằm chứng minh, thông qua các thí nghiệm có hệ thống, rằng một xét nghiệm trong phòng thí nghiệm hoạt động chính xác và có thể tái lập, đồng thời phù hợp với mục đích lâm sàng dự kiến; đánh giá hiệu suất là việc đo lường và xác minh liên tục các đặc tính đó.

Scope

Mục này bao gồm các khái niệm và chỉ số được sử dụng để thiết lập và ghi lại hiệu suất xét nghiệm phân tử trước khi sử dụng lâm sàng và để xác minh sau đó: tính hợp lệ phân tích so với lâm sàng, các đặc tính hiệu suất tiêu chuẩn, và những cân nhắc đặc biệt đối với các xét nghiệm có độ phức tạp cao và các quy trình tin sinh học của chúng. Đây là một chủ đề về phương pháp luận và không đưa ra hướng dẫn chẩn đoán hoặc điều trị bệnh nhân.

Core questions

• Sự khác biệt giữa tính hợp lệ phân tích và tính hợp lệ lâm sàng là gì?
• Những đặc tính hiệu suất nào phải được thiết lập cho một xét nghiệm phân tử?
• Giới hạn phát hiện và định lượng được xác định như thế nào?
• Giải trình tự và quy trình tin sinh học được thẩm định như thế nào, không chỉ là xét nghiệm thực nghiệm?

Key concepts

• Tính hợp lệ phân tích
• Tính hợp lệ lâm sàng
• Độ chính xác và độ đúng
• Độ đúng (khả năng lặp lại và khả năng tái lập)
• Độ nhạy phân tích và giới hạn phát hiện
• Độ đặc hiệu phân tích
• Phạm vi có thể báo cáo và có thể đo lường
• Thẩm định quy trình tin sinh học
• Phù hợp với mục đích sử dụng dự kiến

Mechanisms

Quá trình thẩm định được thực hiện bằng các thí nghiệm được thiết kế sử dụng các mẫu đã được đặc trưng. Độ chính xác được đánh giá bằng cách so sánh với một phương pháp tham chiếu hoặc các mẫu đã biết; độ đúng bằng cách đo lặp lại trong điều kiện lặp lại và tái lập; độ nhạy phân tích bằng cách xác định giới hạn phát hiện; và độ đặc hiệu phân tích bằng cách kiểm tra các yếu tố gây nhiễu và phản ứng chéo (Jennings et al., 2009). Các xét nghiệm phân tử định lượng có thể được thẩm định bằng cùng một khuôn khổ hóa học lâm sàng được sử dụng cho các chất đo khác, như đã được chứng minh đối với các xét nghiệm sinh thiết lỏng PCR kỹ thuật số giọt (Milosevic et al., 2018). Đối với giải trình tự thế hệ mới, quy trình tính toán gọi và lọc các biến thể phải được thẩm định cùng với các bước trong phòng thí nghiệm (Roy et al., 2018). Tính hợp lệ lâm sàng, khác với những điều này, đặt câu hỏi về mức độ kết quả phân loại tình trạng lâm sàng.

Clinical relevance

Việc một kết quả phân tử có thể được tin cậy trong chăm sóc bệnh nhân hay không phụ thuộc vào công việc thẩm định và hiệu suất đằng sau nó; các đặc tính hiệu suất không được ghi lại hoặc yếu kém làm suy yếu việc giải thích. Mục này giải thích cách các phòng thí nghiệm thiết lập sự tin cậy đó và không phải là hướng dẫn để yêu cầu hoặc hành động dựa trên các xét nghiệm cụ thể.

Evidence & guidelines

Thực hành thẩm định được hệ thống hóa trong các hướng dẫn chuyên môn, bao gồm các nguyên tắc AMP/CAP để thẩm định các xét nghiệm bệnh học phân tử và quy trình giải trình tự (Jennings et al., 2009; Roy et al., 2018) và các tài liệu đồng thuận của CLSI (CLSI EP28). Những tài liệu này cung cấp các thiết kế thí nghiệm và tiêu chí chấp nhận mà các phòng thí nghiệm tuân thủ theo quy định công nhận.

History

Khi xét nghiệm phân tử lâm sàng mở rộng, các tổ chức chuyên nghiệp đã điều chỉnh các nguyên tắc thẩm định hóa học lâm sàng và y học phòng thí nghiệm đã được thiết lập cho các xét nghiệm phân tử, sau đó mở rộng chúng sang giải trình tự song song lớn và tin sinh học của nó, tạo ra các tiêu chuẩn thẩm định phân lớp được sử dụng ngày nay (Jennings et al., 2009; Roy et al., 2018).

Debates

Việc thẩm định nên mở rộng như thế nào đối với các xét nghiệm đa mục tiêu, độ phức tạp cao?

Việc thiết lập hiệu suất cho mọi biến thể có thể phát hiện được bằng các bảng giải trình tự rộng là không thực tế, vì vậy các hướng dẫn dựa vào thẩm định đại diện và thẩm định quy trình; mức độ đủ là bao nhiêu vẫn là một cuộc thảo luận tích cực.

Seminal works

• jennings-2009
• roy-2018

Frequently asked questions

Sự khác biệt giữa tính hợp lệ phân tích và tính hợp lệ lâm sàng là gì?

Tính hợp lệ phân tích là liệu xét nghiệm có đo lường chất phân tích một cách chính xác và có thể tái lập hay không; tính hợp lệ lâm sàng là liệu kết quả có thực sự tương ứng với tình trạng lâm sàng mà xét nghiệm nhằm mục đích phát hiện hay không.

Tại sao giải trình tự thế hệ mới cần thẩm định quy trình?

Bởi vì các biến thể được báo cáo phụ thuộc vào phần mềm căn chỉnh các đoạn đọc và gọi các biến thể, quy trình tin sinh học có thể gây ra lỗi và phải được thẩm định cùng với quy trình trong phòng thí nghiệm.