Doğrudan ve Dolaylı Antiglobulin (Coombs) Testleri
Antiglobulin testi, yaygın olarak Coombs testi olarak adlandırılmakta olup, eritrositlere (kırmızı kan hücreleri) bağlı immünoglobulini veya komplemanı saptamak için antihuman globulin reaktifi kullanmaktadır. Testin doğrudan formu, bir hastanın eritrositlerini in vivo olarak zaten kaplamış olan antikoru ortaya koyarken, dolaylı formu ise in vitro olarak reaktif hücrelere bağlanan plazmadaki antikoru saptamaktadır; bu iki test birlikte immünohematolojinin merkezi araçları arasında yer almaktadır.
Tanım
Antiglobulin (Coombs) testi, kaplanmış hücreleri görünür aglütinatlar halinde çapraz bağlayan antihuman globulin reaktifi kullanarak eritrositler üzerindeki insan immünoglobulini veya kompleman bileşenlerini saptamaktadır; doğrudan test hastanın kendi eritrositlerini incelerken, dolaylı test ise hastanın plazmasıyla inkübasyondan sonra reaktif eritrositleri incelemektedir.
Kapsam
Bu konu, antiglobulin reaksiyonunun prensibini, doğrudan antiglobulin testi (DAT) ile dolaylı antiglobulin testi (IAT) arasındaki ayrımı ve her birinin serolojik incelemedeki yerini açıklamaktadır. Test yöntemini ve yorumunu kavramsal olarak tanımlamakta olup, belirli hastaların tanısı veya yönetimi için bir protokol niteliği taşımamaktadır.
Temel sorular
- Antihuman globulin reaktifi, antikorla kaplı hücrelerin nasıl aglütine olmasını sağlamaktadır?
- Doğrudan antiglobulin testini dolaylı olandan ayıran nedir?
- Pozitif bir doğrudan antiglobulin testi neyi göstermektedir?
- Dolaylı antiglobulin testi, antikor saptama ve çapraz karşılaştırmada nasıl kullanılmaktadır?
Anahtar kavramlar
- Antihuman globulin (AHG) reaktifi
- İnkomplet (IgG) antikorlar
- Doğrudan antiglobulin testi (DAT)
- Dolaylı antiglobulin testi (IAT)
- İn vivo ve in vitro duyarlılaşma
- Polispesifik ve monospesifik reaktifler (IgG, C3)
- Okuma olarak aglütinasyon
Mekanizmalar
Klinik olarak önemli birçok eritrosit antikoru IgG sınıfından olup, yüzey yükleri tarafından itilen hücreler arasında köprü kuramayacak kadar küçük moleküller oldukları için antijen-pozitif hücreleri salinde doğrudan aglütine etmemektedir. İnsan IgG'sine ve komplemanına karşı geliştirilen antihuman globulin reaktifi, bu kaplayıcı moleküllere bağlanmakta ve bitişik duyarlılaşmış hücreler arasında köprü kurarak görünür aglütinasyon üretmektedir. Doğrudan testte, hastadan alınan yıkanmış eritrositler, hemolitik transfüzyon reaksiyonları, yenidoğanın hemolitik hastalığı ve otoimmün hemolitik anemi gibi durumlarda in vivo olarak zaten bağlanmış olan antikoru veya komplemanı saptamak amacıyla reaktif ile karıştırılmaktadır. Dolaylı testte ise, herhangi bir antikorun in vitro olarak bağlanması için plazma önce reaktif eritrositlerle inkübe edilmekte, ardından antiglobulin reaktifi eklenmektedir; bu yöntem antikor taraması, tanımlanması ve antiglobulin çapraz karşılaştırmasının temelini oluşturmaktadır.
Klinik önem
Antiglobulin testi, hemolizin laboratuvar incelemesini ve kan bileşenlerinin güvenli seçimini desteklemektedir. Bu madde, testin nasıl çalıştığını ve pozitif ile negatif sonuçların prensipte ne anlama geldiğini açıklamaktadır; herhangi bir bireysel sonucun yorumu klinik ve laboratuvar bağlamına ait olup, burada bir rehberlik olarak ele alınmamaktadır.
Kanıt ve kılavuzlar
Antiglobulin tekniği ve varyantları, AABB Teknik Kılavuzu ve Mollison's Blood Transfusion in Clinical Medicine gibi standart immünohematoloji referanslarında açıklanmakta olup, bu kaynaklar yöntem ve yorumu konsensüsle belirlemektedir.
Tarihçe
Coombs, Mourant ve Race, 1945 yılında sıradan salin aglütinasyonunun gözden kaçırdığı zayıf ve inkomplet Rh antikorlarını saptamak amacıyla antiglobulin testini tanıtmışlardır. Bu teknik, IgG duyarlılaşmasını görünür hale getirerek immünohematolojiyi dönüştürmüş ve antikor taraması, tanımlanması, çapraz karşılaştırma ve immün hemoliz araştırmalarının temelini oluşturmaya devam etmektedir.
Öne çıkan isimler
- Robert Coombs
- Arthur Mourant
- Robert Race
İlgili konular
Temel eserler
- coombs-1945
- mollison-2014
- daniels-2013
Sıkça sorulan sorular
- Doğrudan ve dolaylı Coombs testi arasındaki fark nedir?
- Doğrudan test, vücutta bir hastanın eritrositlerine zaten bağlı olan antikoru veya komplemanı saptamaktadır; dolaylı test ise plazmadaki antikoru, antiglobulin reaktifi eklenmeden önce test tüpündeki reaktif eritrositlere bağlayarak saptamaktadır.
- Pozitif bir doğrudan antiglobulin testine ne sebep olabilir?
- Pozitif bir doğrudan antiglobulin testi, eritrositlerin immünoglobulin veya kompleman ile kaplı olduğunu göstermektedir; bu durum otoimmün hemolitik anemi, yenidoğanın hemolitik hastalığı ve hemolitik transfüzyon reaksiyonları gibi çeşitli durumlarda ortaya çıkabilmektedir.