Antibiyotik Duyarlılık Testi
Antibiyotik duyarlılık testi, bir bakteriyel izolatın belirli bir antibakteriyel ilaç tarafından inhibe edilip edilmediğini ve hangi konsantrasyonda inhibe edildiğini ölçen laboratuvar yöntemleri bütünüdür. Bu testin temel çıktısı, minimum inhibitör konsantrasyon (MİK) veya eşdeğer bir zon ölçümüdür; bu ölçüm, izolatı duyarlı, orta düzeyde duyarlı (veya doza bağımlı duyarlı) veya dirençli olarak sınıflandırmak için standartlaştırılmış kırılma noktaları (breakpoint) ile karşılaştırılmaktadır.
Tanım
Antibiyotik duyarlılık testi, bir bakteriyel izolatın antibakteriyel ajanlara yanıtının in vitro belirlenmesidir; bu yanıt, minimum inhibitör konsantrasyon veya inhibisyon zonu çapı olarak nicelleştirilmekte ve bir duyarlılık kategorisi atamak için tanımlanmış kırılma noktalarına göre yorumlanmaktadır.
Kapsam
Bu madde, başlıca test yöntemlerini (buyyon ve agar dilüsyonu, disk difüzyonu, gradyan şeritleri ve otomatik sistemler), minimum inhibitör konsantrasyon kavramını ve standart kuruluşlardan gelen yorumlayıcı kırılma noktalarının bir ölçümü bir kategoriye nasıl dönüştürdüğünü kapsamaktadır. Bu, metodoloji üzerine bir referans ve eğitim konusudur ve tedavi seçimi veya dozaj rehberliği sağlamamaktadır.
Temel sorular
- Minimum inhibitör konsantrasyon (MİK) nedir ve nasıl ölçülmektedir?
- Dilüsyon, disk difüzyonu, gradyan ve otomatik yöntemler nasıl farklılık göstermektedir?
- Kırılma noktaları bir ölçümü duyarlı, orta düzeyde duyarlı veya dirençli kategorilerine nasıl dönüştürmektedir?
- CLSI ve EUCAST gibi standart kuruluşları hangi rolleri üstlenmektedir?
Anahtar kavramlar
- Minimum inhibitör konsantrasyon (MİK)
- Buyyon ve agar dilüsyonu
- Disk difüzyonu (Kirby-Bauer)
- Gradyan difüzyonu (MİK test şeritleri)
- Otomatik duyarlılık sistemleri
- Yorumlayıcı kırılma noktaları
- Duyarlı / orta düzeyde duyarlı / dirençli kategorileri
- CLSI ve EUCAST standartları ve uzman kuralları
Mekanizmalar
Duyarlılık testi, izolatın standartlaştırılmış bir inokülümünü tanımlanmış antibiyotik konsantrasyonlarına maruz bırakmaktadır. Referans dilüsyon yöntemleri (buyyon mikrodilüsyonu, agar dilüsyonu), minimum inhibitör konsantrasyonu doğrudan, görünür büyümeyi engelleyen en düşük konsantrasyon olarak belirlemektedir. Disk difüzyonu, antibiyotik emdirilmiş diskleri inoküle edilmiş agara yerleştirmekte ve MİK ile korele olan büyüme inhibisyon zonunu ölçmektedir; gradyan şeritleri, inhibisyon elipsinin kalibre edilmiş bir ölçeği kestiği yerde bir MİK okumaktadır; ve otomatik cihazlar, zaman içinde büyüme tespitinden sonuçlar elde etmektedir (Jorgensen & Ferraro, 2009). Ham ölçüm daha sonra, CLSI ve EUCAST gibi standart kuruluşlar tarafından belirlenen – duyarlı olanı dirençliden ayıran konsantrasyonlar olan – kırılma noktalarına göre yorumlanmaktadır; bu kuruluşların uzman kuralları aynı zamanda bilinen direnç mekanizmalarıyla tutarsız olan sonuçları da işaretlemektedir (Leclercq ve ark., 2013; Blair ve ark., 2015).
Klinik önem
Duyarlılık testi, bir izolat için hangi ajanların aktif olma olasılığının yüksek olduğunu raporlayarak mikrobiyoloji laboratuvarını klinik karar alma süreçlerine bağlamaktadır. Burada açıklanan kategori atamaları ve kırılma noktaları, bu raporlamanın temelini oluşturmakta ve antimikrobiyal yönetim ile sürveyansı bilgilendirmektedir. Bu madde, yöntemleri oryantasyon ve çalışma amacıyla açıklamaktadır; tedavi seçimi veya dozajı için bir temel değildir.
Epidemiyoloji
Toplu duyarlılık sonuçları antibiyogramları oluşturmakta ve direnç sürveyans sistemlerini beslemektedir; CLSI ve EUCAST tarafından kırılma noktalarının ve uzman kurallarının uyumlaştırılması, sonuçları laboratuvarlar arasında ve zaman içinde karşılaştırılabilir kılmaktadır (Jorgensen & Ferraro, 2009; Leclercq ve ark., 2013).
Tarihçe
Standartlaştırılmış duyarlılık testi 1960'larda sağlamlaştırılmıştır; bu dönemde Kirby-Bauer disk difüzyon yöntemi tekrarlanabilir prosedürler ve yorumlayıcı kriterler oluşturmuştur. Sonraki onyıllar ticari dilüsyon panellerini, gradyan şerit yöntemlerini ve otomatik cihazları beraberinde getirmiş, CLSI ve EUCAST tarafından kırılma noktalarının ve uzman kurallarının resmileştirilmesiyle birlikte gelişmiştir (Jorgensen & Ferraro, 2009; Leclercq ve ark., 2013).
Tartışmalar
- Kırılma noktaları nasıl belirlenmeli ve uyumlaştırılmalıdır?
- Kırılma noktaları, duyarlı-dirençli sınırını tanımlamakta ve CLSI ile EUCAST gibi standart sistemler arasında yer yer farklılık göstermektedir; bunların farmakokinetik-farmakodinamik verilerden, MİK dağılımlarından ve direnç mekanizmalarından türetilmesi, metodolojik iyileştirmenin devam eden bir alanını oluşturmaktadır.
Öne çıkan isimler
- James H. Jorgensen
- Mary Jane Ferraro
- Roland Leclercq
İlgili konular
Temel eserler
- jorgensen-ferraro-2009
- leclercq-2013
Sıkça sorulan sorular
- Minimum inhibitör konsantrasyon (MİK) ne anlama gelmektedir?
- MİK, in vitro koşullarda görünür bakteriyel büyümeyi engelleyen bir antibiyotiğin en düşük konsantrasyonudur; duyarlılık testinin temel nicel sonucudur ve kırılma noktalarına göre yorumlanmaktadır.
- Bir raporda 'duyarlı', 'orta düzeyde duyarlı' ve 'dirençli' ne anlama gelmektedir?
- Bunlar, ölçülen MİK veya inhibisyon zonunun standartlaştırılmış kırılma noktalarıyla karşılaştırılmasıyla atanan yorumlayıcı kategorilerdir ve izolatın standart koşullar altında ilaç tarafından inhibe edilme olasılığının yüksek olup olmadığını, yanıtının belirsiz olup olmadığını veya ilaç tarafından inhibe edilmediğini belirtmektedir.