Antimikrobiyal Duyarlılık Testi
Antimikrobiyal duyarlılık testi (ADT), bir mikroorganizmanın büyümesinin antimikrobiyal bir ajan tarafından inhibe edilip edilmediğini ve hangi konsantrasyonda inhibe edildiğini laboratuvar ortamında ölçme işlemidir. Laboratuvar, bir izolatı tanımlanmış ilaç konsantrasyonlarına maruz bırakarak ve sonucu belirlenmiş kırılma noktalarına (breakpoint) göre değerlendirerek organizmayı duyarlı, orta düzeyde duyarlı (veya doza bağımlı duyarlı) veya dirençli olarak sınıflandırmaktadır.
Tanım
Antimikrobiyal duyarlılık testi, antimikrobiyal ajanların bir mikroorganizmaya karşı aktivitesinin in vitro olarak belirlenmesidir; bu aktivite genellikle minimum inhibitör konsantrasyon (MİK) olarak ifade edilmekte ve standartlaştırılmış kırılma noktalarına (breakpoint) göre duyarlı, orta düzeyde duyarlı veya dirençli olarak yorumlanmaktadır.
Kapsam
Bu madde, dilüsyon ve difüzyon yöntemlerinin prensiplerini, minimum inhibitör konsantrasyonu (MİK), yorumlayıcı kırılma noktalarını (breakpoint) ve kategorilerini, klinik açıdan önemli direnç mekanizmalarının tespitini ve duyarlılık verilerinin direnç sürveyansındaki rolünü kapsamaktadır. Bir laboratuvar metodolojisi olarak sunulmakta olup, herhangi bir hasta için ilaç seçimi veya dozaj önerileri içermemektedir.
Temel sorular
- Bu organizmanın büyümesi belirli bir antimikrobiyal ajan tarafından inhibe edilmekte midir ve hangi konsantrasyonda?
- Minimum inhibitör konsantrasyon (MİK) nasıl ölçülmekte ve kırılma noktalarına (breakpoint) göre nasıl yorumlanmaktadır?
- Hangi yöntemler (buyyon veya agar dilüsyonu, disk difüzyonu, gradyan şeritleri, otomatik sistemler) kullanılmaktadır ve bunların avantajları/dezavantajları nelerdir?
- Spesifik direnç mekanizmaları nasıl tespit edilmekte ve raporlanmakta, duyarlılık verileri sürveyansı nasıl beslemektedir?
Anahtar kavramlar
- Minimum inhibitör konsantrasyon (MİK)
- Yorumlayıcı kırılma noktaları (breakpoint)
- Duyarlı / orta düzeyde duyarlı / dirençli kategorileri
- Buyyon ve agar dilüsyon yöntemleri
- Disk difüzyonu ve gradyan difüzyonu
- Otomatik duyarlılık sistemleri
- Direnç mekanizmaları ve tespiti
- Antimikrobiyal direnç sürveyansı
Mekanizmalar
Duyarlılık testi, organizmanın standartlaştırılmış bir inokülümünü çeşitli antimikrobiyal konsantrasyonlara maruz bırakmakta ve büyüme inhibisyonunu değerlendirmektedir. Dilüsyon yöntemleri, görünür büyümeyi engelleyen en düşük konsantrasyon olan minimum inhibitör konsantrasyonu (MİK) belirlemektedir; difüzyon yöntemleri ise ilaç içeren bir disk veya gradyan şeridi etrafındaki büyüme inhibisyon bölgesini okumakta ve boyutunu duyarlılıkla ilişkilendirmektedir. Sonuçlar, standart kuruluşlar tarafından belirlenen konsantrasyon eşikleri olan kırılma noktalarına (breakpoint) göre yorumlanarak duyarlı, orta düzeyde duyarlı veya dirençli kategorileri atanmaktadır (Jorgensen & Ferraro, 2009). Bazı iş akışları ayrıca spesifik direnç belirleyicilerini de tespit etmektedir, çünkü direnç, enzimatik ilaç modifikasyonu, hedef değişikliği, eflüks veya transfer edilebilir plazmid kaynaklı genler gibi mekanizmalar aracılığıyla ortaya çıkabilmektedir (Strahilevitz et al., 2009) ve direnç özellikleri, bakteriyel virülans ve uygunluk (fitness) ile karmaşık şekillerde etkileşime girmektedir (Beceiro et al., 2013). Daha hızlı ve daha bilgilendirici duyarlılık testi, enfeksiyon hastalıkları tanılarının iyileştirilmesi için daha geniş bir gündemin parçasıdır (Caliendo et al., 2013).
Klinik önem
Duyarlılık sonuçları, bir enfeksiyonun tedavisinde klinik akıl yürütme ve antimikrobiyal yönetimi (stewardship) için önemli bir girdi sağlamaktadır; ancak yorumları enfeksiyonun yeri, ajan ve hasta faktörlerine bağlıdır. Bu madde, duyarlılığın nasıl ölçüldüğünü ve kategorize edildiğini açıklamaktadır; bir referans materyalidir ve herhangi bir birey için ilaç seçimi veya dozaj önerileri kaynağı değildir.
Epidemiyoloji
Toplu duyarlılık sonuçları, antimikrobiyal direnç sürveyansı için birincil veri kaynağıdır ve direncin popülasyonlarda ve sağlık hizmeti ortamlarında nasıl ortaya çıktığını ve yayıldığını izlemektedir. Direncin mobil genetik elementler üzerinde taşınabileceği (Strahilevitz et al., 2009) ve virülans ile birlikte değişebileceği (Beceiro et al., 2013) anlayışı, halk sağlığı otoritelerinin laboratuvar direnç verilerine gösterdiği ilginin temelini oluşturmaktadır.
Tarihçe
Standartlaştırılmış duyarlılık testi, yirminci yüzyıl boyunca ad hoc büyüme-inhibisyon gözlemlerinden, referans standartları ve yorumlayıcı kırılma noktaları (breakpoint) içeren tanımlanmış dilüsyon ve difüzyon yöntemlerine dönüşmüştür; daha sonra otomatik sistemler ve direnç genlerinin moleküler tespiti ile desteklenmiştir. Genel prensipler ve güncel uygulamalara ilişkin derlemeler, bu yöntemlerin ve yorumlayıcı çerçevelerinin nasıl standartlaştırıldığını açıklamaktadır (Jorgensen & Ferraro, 2009).
İlgili konular
Temel eserler
- jorgensen-2009
- strahilevitz-2009
- beceiro-2013
Sıkça sorulan sorular
- Minimum inhibitör konsantrasyon (MİK) neyi ifade etmektedir?
- MİK, bir antimikrobiyalin, organizmanın in vitro görünür büyümesini engelleyen en düşük konsantrasyonudur. Standartlaştırılmış kırılma noktaları (breakpoint) ile karşılaştırılarak, organizmayı duyarlı, orta düzeyde duyarlı veya dirençli olarak kategorize etmek için kullanılmaktadır (Jorgensen & Ferraro, 2009).
- Neden farklı duyarlılık testi yöntemleri bulunmaktadır?
- Dilüsyon yöntemleri sayısal bir MİK değeri vermektedir; difüzyon yöntemleri (disk veya gradyan) ise bir inhibisyon bölgesinden duyarlılığı çıkarmaktadır; otomatik sistemler ise işlem hızını artırmaktadır. Laboratuvarlar, organizmaya, ilaçlara ve sayısal bir sonuç ihtiyacına karşılık hıza göre bunlar arasından seçim yapmaktadır.