การเตรียมสเมียร์แบบดั้งเดิม

การเตรียมสเมียร์แบบดั้งเดิมเป็นวิธีการคลาสสิกในการทำสไลด์เซลล์วิทยา: วัสดุเซลล์ที่เก็บรวบรวมจะถูกป้ายลงบนสไลด์แก้วโดยตรงด้วยมือ จากนั้นจึงนำไปตรึงหรือผึ่งลมให้แห้งเพื่อย้อมสี เป็นเทคนิคที่ใช้ในการพัฒนาเซลล์วิทยาจากการหลุดลอกและการดูด และยังคงมีการใช้อย่างแพร่หลาย โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการเจาะดูดด้วยเข็มละเอียดและการประเมินผล ณ จุดปฏิบัติงานอย่างรวดเร็ว

Definition

การเตรียมสเมียร์แบบดั้งเดิมคือการป้ายตัวอย่างเซลล์วิทยาลงบนสไลด์แก้วโดยตรงด้วยมือ — โดยการป้าย การดึง หรือการบด — ตามด้วยการตรึงแบบเปียกทันทีหรือการผึ่งลมให้แห้งเพื่อเตรียมการย้อมสี

Scope

เนื้อหานี้ครอบคลุมถึงวิธีการทำสเมียร์โดยตรง ขั้นตอนการตรึงทันทีและการผึ่งลมให้แห้งที่ตามมา รวมถึงจุดแข็งและข้อจำกัดเฉพาะของสเมียร์เมื่อเทียบกับการประมวลผลแบบอาศัยของเหลว เป็นคำอธิบายของวิธีการทางห้องปฏิบัติการ ไม่ใช่คู่มือขั้นตอนหรือแนวทางการรักษาทางคลินิก

Key concepts

• การป้ายโดยตรง (ด้วยมือ) ลงบนสไลด์
• เทคนิคการทำสเมียร์: แบบดึงแยก, แบบบด, แบบดัน
• การตรึงแบบเปียกทันทีเทียบกับการผึ่งลมให้แห้ง
• การวางตัวอย่างทั้งหมด (ไม่ปั่นแยก)
• เลือด เมือก และเซลล์ที่ทับซ้อนกันซึ่งบดบัง
• การประเมินสิ่งดูดอย่างรวดเร็ว ณ จุดปฏิบัติงาน

Mechanisms

หยดหรือรอยขูดของวัสดุเซลล์จะถูกวางลงบนสไลด์และป้ายให้เป็นฟิล์มบางๆ โดยทั่วไปจะทำโดยการลากสไลด์ที่สองข้ามไป (แบบดึงแยก) หรือโดยการกดเบาๆ (การเตรียมแบบบด) ฟิล์มต้องบางพอที่เซลล์จะเรียงตัวเกือบเป็นชั้นเดียว แต่ยังคงรักษากลุ่มเซลล์ที่ใช้ในการวินิจฉัยไว้ได้ จากนั้นสเมียร์จะถูกตรึงทันทีในขณะที่ยังชื้นอยู่ — สำหรับการย้อมสี Papanicolaou ซึ่งต้องการการตรึงแบบเปียกเพื่อรักษารายละเอียดของนิวเคลียส — หรือจงใจผึ่งลมให้แห้งสำหรับการย้อมสี Romanowsky เนื่องจากตัวอย่างทั้งหมดถูกวางลงโดยไม่มีการประมวลผล สเมียร์แบบดั้งเดิมจึงยังคงรักษาสารที่เก็บรวบรวมไว้ทั้งหมด แต่ก็รวมถึงเลือด เมือก และเศษซากการอักเสบด้วย และการป้ายที่ไม่สม่ำเสมอหรือการตรึงที่ล่าช้าอาจทำให้เกิดบริเวณที่หนาและสิ่งแปลกปลอมจากการแห้ง (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006)

Clinical relevance

สเมียร์แบบดั้งเดิมเป็นพื้นฐานของเซลล์วิทยาทั้งในอดีตและปัจจุบัน โดยเฉพาะอย่างยิ่งการเจาะดูดด้วยเข็มละเอียด ซึ่งสเมียร์สามารถย้อมและอ่านได้ภายในไม่กี่นาทีเพื่อประเมินความเพียงพอ ณ จุดปฏิบัติงาน เนื้อหานี้อธิบายว่าวิธีการนี้ส่งผลต่อคุณภาพของตัวอย่างอย่างไร และมีวัตถุประสงค์เพื่อเป็นข้อมูลพื้นฐาน ไม่ได้มุ่งหมายเพื่อชี้นำการดูแลผู้ป่วยแต่ละราย

Evidence & guidelines

ในการคัดกรองมะเร็งปากมดลูก การทบทวนอย่างเป็นระบบพบว่าเซลล์วิทยาแบบดั้งเดิมและแบบอาศัยของเหลวมีความแม่นยำในการวินิจฉัยที่คล้ายคลึงกันโดยรวม โดยสเมียร์แบบดั้งเดิมแสดงอัตราตัวอย่างที่ไม่น่าพอใจสูงกว่า ซึ่งส่วนใหญ่เกิดจากวัสดุที่บดบังและสิ่งแปลกปลอมจากการผึ่งลมให้แห้งหรือการตรึง (Arbyn 2008; Siebers 2012) การเปรียบเทียบเหล่านี้แสดงให้เห็นว่าสเมียร์แบบดั้งเดิมเป็นวิธีการที่แข็งแกร่ง ใช้อุปกรณ์น้อย ซึ่งมีข้อจำกัดหลักคือความแปรปรวนของคุณภาพการเตรียม

History

สเมียร์โดยตรงเป็นการเตรียมเซลล์วิทยาแบบดั้งเดิม ซึ่ง George Papanicolaou ใช้ในการพัฒนาเซลล์วิทยาปากมดลูก และโดยนักเซลล์พยาธิวิทยารุ่นต่อรุ่นสำหรับตัวอย่างจากการหลุดลอกและการดูด วิธีการนี้เป็นที่นิยมใช้จนกระทั่งมีการนำวิธีการแบบอาศัยของเหลวมาใช้ในทศวรรษ 1990 และยังคงมีอยู่ทุกที่ที่ต้องการการเตรียมที่รวดเร็วและใช้อุปกรณ์น้อย โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการเจาะดูดด้วยเข็มละเอียด (Koss & Melamed 2006)

Key figures

• George Papanicolaou

Seminal works

• papanicolaou-1942
• koss-melamed-2006

Frequently asked questions

สเมียร์แบบดั้งเดิมในเซลล์วิทยาคืออะไร?

คือสไลด์ที่ทำโดยการป้ายเซลล์ที่เก็บรวบรวมลงบนแก้วโดยตรงด้วยมือ จากนั้นจึงนำไปตรึงหรือผึ่งลมให้แห้งเพื่อย้อมสี ซึ่งแตกต่างจากการแขวนลอยเซลล์ในของเหลวและวางเซลล์เป็นชั้นเดียวที่ทำด้วยเครื่องจักร

เหตุใดจึงยังคงใช้สเมียร์แบบดั้งเดิมแม้จะมีเซลล์วิทยาแบบอาศัยของเหลว?

เนื่องจากต้องการอุปกรณ์น้อยและสามารถเตรียมและย้อมสีได้ทันที ซึ่งทำให้เหมาะสำหรับการเจาะดูดด้วยเข็มละเอียดและการประเมินผล ณ จุดปฏิบัติงานอย่างรวดเร็ว ซึ่งความเร็วและตัวเลือกการย้อมสี Romanowsky แบบผึ่งลมให้แห้งมีคุณค่า