Окрашивание по Папаниколау

Окрашивание по Папаниколау — это стандартный полихромный метод окрашивания в цитопатологии, разработанный Джорджем Папаниколау для влажно-фиксированных клеточных мазков. Он сочетает ядерный краситель с несколькими цитоплазматическими контрастирующими красителями для получения прозрачных, многоцветных клеток, в которых четко видны как ядерный хроматин, так и степень зрелости цитоплазмы. Его способность четко выявлять детали ядра сделала его основой цервикального скрининга и эксфолиативной цитологии в целом.

Definition

Окрашивание по Папаниколау — это мультихромное цитологическое окрашивание, применяемое к фиксированным в спирте (влажно-фиксированным) препаратам, использующее ядерный краситель гематоксилин вместе с оранжевыми и полихромными цитоплазматическими контрастирующими красителями для получения прозрачных клеток с детализированным ядерным хроматином.

Scope

Статья охватывает состав и обоснование окрашивания по Папаниколау, необходимую для него влажную фиксацию, клеточные особенности, которые оно выявляет, и его место в цитологических отчетах. Это справочник по методам, который не содержит диагностических или лечебных инструкций.

Key concepts

• Требование влажной (спиртовой) фиксации
• Ядерное окрашивание гематоксилином
• Цитоплазматические контрастирующие красители OG-6 и EA
• Прозрачность цитоплазмы и возможность чтения перекрывающихся клеток
• Отображение созревания плоскоклеточного эпителия
• Детализация ядерного хроматина для оценки злокачественности

Mechanisms

Краситель наносится на мазок, который был зафиксирован во влажном состоянии, что сохраняет текстуру хроматина. Гематоксилин, основной ядерный краситель, связывается с кислым хроматином, окрашивая ядра в сине-пурпурный цвет с мелкими внутренними деталями. Затем цитоплазма контрастируется в два этапа: оранжевый краситель (оранжевый G) окрашивает ороговевшую плоскоклеточную цитоплазму, а полихромная смесь эозина и азура окрашивает другую цитоплазму в градуированные зеленые, синие и розовые оттенки. Поскольку красители используются в концентрациях, которые сохраняют цитоплазму полупрозрачной, перекрывающиеся клетки и клеточные группы все еще могут быть прочитаны — это существенное свойство для толстых мазков. Градиенты цвета также демонстрируют созревание плоскоклеточного эпителия, помогая отличить поверхностные клетки от промежуточных и парабазальных (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).

Clinical relevance

Окрашивание по Папаниколау является основой цервикального цитологического скрининга и большей части диагностической цитологии, а выявляемые им особенности лежат в основе стандартизированных категорий отчетности. Эта статья описывает окрашивание и то, что оно показывает, как основу для понимания цитологии; она не является основой для индивидуальных клинических решений.

Evidence & guidelines

Стандартизированные рамки цитологической отчетности строятся вокруг клеточных и ядерных особенностей, которые делает видимыми окрашивание по Папаниколау; например, система Bethesda для цервикальной цитологии определяет свои интерпретационные категории и критерии адекватности на материале, окрашенном по Папаниколау (Solomon 2002). Справочные тексты рассматривают это окрашивание как эталонный метод для цитологии с детальным изучением ядра, дополняющий Романовского окрашивания высушенных на воздухе мазков (Bibbo & Wilbur 2014).

History

Джордж Папаниколау описал свою процедуру окрашивания вагинальных мазков в 1942 году, основываясь на более ранних гистологических окрашиваниях, но оптимизировав цветовой баланс и прозрачность для эксфолиированных клеток. Это окрашивание легло в основу теста цервикального скрининга, носящего его имя, и впоследствии было адаптировано с модифицированными формулами для цитологии почти каждого участка тела (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).

Key figures

• George Papanicolaou

Seminal works

• papanicolaou-1942
• solomon-2002

Frequently asked questions

Почему окрашивание по Папаниколау требует влажно-фиксированного мазка?

Влажная (спиртовая) фиксация сохраняет тонкий ядерный хроматин, который предназначен для отображения компонентом гематоксилина. Высушенный на воздухе мазок теряет эту детализацию, поэтому окрашивание по Папаниколау применяется только для быстро влажно-фиксированных препаратов.

Что делает окрашивание по Папаниколау особенно полезным для цитологии?

Его многочисленные контрастирующие красители сохраняют цитоплазму прозрачной, поэтому перекрывающиеся клетки в мазке все еще могут быть прочитаны, и оно показывает как детализированный ядерный хроматин, так и созревание плоскоклеточного эпителия — особенности, центральные для цитологической интерпретации.