Воздушно-сухие препараты и окраски по Романовскому

Воздушно-сухие препараты — это цитологические мазки, которые намеренно высушиваются на воздухе, а не фиксируются во влажном состоянии, и окрашиваются красителями семейства Романовского (такими как Май-Грюнвальд-Гимза или быстрый Diff-Quik). Этот метод, унаследованный из гематологии, распластывает и увеличивает клетки, а также подчеркивает цитоплазматические гранулы, секреторный материал и стромальный фон — особенности, которые дополняют детали ядер, выявляемые при влажной фиксации и окраске по Папаниколау. Он особенно ценится в цитологии тонкоигольной аспирации.

Definition

Воздушно-сухие препараты — это цитологические мазки, высушенные на воздухе перед окрашиванием и обработанные красителями типа Романовского — смесями азуровых (основных) и эозиновых (кислых) красителей — для выделения цитоплазматических, секреторных и фоновых особенностей для микроскопической интерпретации.

Scope

Статья охватывает этап воздушной сушки, химический состав и внешний вид окрасок по Романовскому, а также то, как этот метод подготовки дополняет влажно фиксированный материал, окрашенный по Папаниколау, в аспирационной цитологии. Это справочник по методам, который не содержит рекомендаций, специфичных для пациентов.

Key concepts

• Намеренное высушивание на воздухе вместо влажной фиксации
• Красители Романовского: смеси азуровых и эозиновых красителей
• Варианты Май-Грюнвальд-Гимза и быстрый Diff-Quik
• Метахромазия стромы и секреторного материала
• Распластывание и кажущееся увеличение клеток
• Взаимодополняемость с окраской по Папаниколау
• Пригодность для тонкоигольной аспирации и оценки на месте

Mechanisms

Когда мазок оставляют для высыхания, клетки распластываются на предметном стекле и расширяются, становясь больше, чем их влажно фиксированные аналоги; само высыхание служит подготовительным этапом для окрашивания по Романовскому. Красители Романовского сочетают основной азуровый краситель, который связывается с кислыми структурами, такими как нуклеиновые кислоты и гранулы, с кислым эозином, который связывается с основными цитоплазматическими белками. Их взаимодействие дает характерный спектр — пурпурно-синий хроматин, розово-красная цитоплазма и метахроматическое окрашивание стромы, муцина и секреторных гранул — что делает фон и цитоплазматический материал заметными. Исследования по стандартизации определили определенную смесь азура B и эозина Y как эталонную окраску по Романовскому-Гимзе для уменьшения изменчивости между составами (Wittekind 1982). Быстрые варианты, такие как Diff-Quik, позволяют окрасить и прочитать мазок в течение нескольких минут, поддерживая оценку адекватности аспиратов на месте (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014).

Clinical relevance

Воздушно-сухие препараты, окрашенные по Романовскому, являются рутинным дополнением к препаратам, окрашенным по Папаниколау, при тонкоигольной аспирации, где они помогают охарактеризовать цитоплазму, секреторные продукты и фон, а также обеспечивают быструю оценку на месте. Статья описывает метод и то, что он выявляет в качестве основы для понимания цитологической практики; она не является основанием для индивидуальных клинических решений.

Evidence & guidelines

Справочные тексты по цитопатологии представляют воздушно-сухие препараты по Романовскому и влажно фиксированные препараты по Папаниколау как намеренно взаимодополняющие, при этом многие протоколы аспирации предусматривают подготовку обоих, чтобы особенности цитоплазмы и фона, а также детали ядер были хорошо отображены (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014). Химическая литература определяет стандартизированные смеси красителей Романовского для обеспечения воспроизводимости окрашивания в разных лабораториях (Wittekind 1982).

History

Красители типа Романовского появились в гематологии и микроскопии малярии в конце XIX века благодаря открытию, что выдержанный или полихромный метиленовый синий в сочетании с эозином давал новые цвета (эффект Романовского), позже усовершенствованные Гимзой и другими. Цитопатология приняла эти красители для воздушно-сухих мазков в качестве дополнения к влажно фиксированной окраске по Папаниколау, и работы по стандартизации в XX веке были направлены на создание воспроизводимых составов красителей (Wittekind 1982; Koss & Melamed 2006).

Key figures

• Dmitri Romanowsky
• Gustav Giemsa
• Dietrich Wittekind

Seminal works

• wittekind-1982
• koss-melamed-2006

Frequently asked questions

Почему некоторые цитологические мазки высушиваются на воздухе, а не фиксируются во влажном состоянии?

Воздушная сушка является необходимым подготовительным этапом для окрасок по Романовскому, которые подчеркивают цитоплазматические гранулы, секреторный материал и стромальный фон. Эти особенности дополняют детали ядер, видимые на влажно фиксированных препаратах, окрашенных по Папаниколау, поэтому оба метода часто используются для одного и того же аспирата.

Какова связь между красителями Романовского и Diff-Quik?

Diff-Quik — это быстрый коммерческий краситель типа Романовского. Как и другие красители Романовского, он использует азуровые и эозиновые красители для воздушно-сухих мазков, но он разработан для скорости, позволяя окрасить и прочитать препарат в течение нескольких минут для оценки на месте.