Сбор и подготовка образцов
Сбор и подготовка образцов являются преаналитической основой цитопатологии: это совокупность методов, с помощью которых клеточный материал получают из организма и наносят на предметное стекло, чтобы отдельные клетки можно было исследовать под микроскопом. Поскольку цитологический диагноз основывается на морфологии клеток и небольших клеточных групп, а не на интактной тканевой архитектуре, способ сбора, переноса, фиксации и окрашивания образца во многом определяет возможность постановки достоверного диагноза.
Definition
Сбор и подготовка образцов включают цитопрепараторные этапы — взятие образца, перенос на предметное стекло или в фиксирующую среду, фиксацию и окрашивание, — которые преобразуют клинический цитологический образец в микроскопический препарат, пригодный для морфологической интерпретации.
Scope
Этот раздел знакомит читателя с основными методами подготовки, используемыми в цитологии: прямые традиционные мазки, жидкостная обработка, стратегии фиксации и две основные традиции окрашивания (окрашивание по Папаниколау фиксированных в спирте образцов и окрашивание по Романовскому высушенных на воздухе образцов). Эти методы рассматриваются как лабораторные, определяющие адекватность и интерпретируемость образца; это не процедурное руководство и не содержит инструкций, специфичных для пациента.
Sub-topics
Key concepts
- Преаналитический этап цитологии
- Адекватность и клеточность образца
- Традиционный мазок против жидкостной обработки
- Влажная фиксация против высушивания на воздухе
- Окрашивание по Папаниколау и окрашивания по Романовскому
- Фиксация, прозрачность и детализация ядра
- Артефакт высушивания
Mechanisms
Цитологический образец изначально представляет собой клетки, взвешенные в жидкости или соскобленные на инструмент. При традиционной подготовке материал наносится непосредственно на предметное стекло и либо немедленно фиксируется (влажная фиксация) для окрашивания по Папаниколау, либо высушивается на воздухе для окрашивания по Романовскому. При жидкостной цитологии образец вместо этого промывается в консервирующей жидкости, и инструмент наносит тонкий, равномерный монослой клеток на предметное стекло, уменьшая количество крови, слизи и перекрывающихся клеток, которые могут затруднять обзор (Arbyn 2008). Фиксация стабилизирует клеточные белки и сохраняет детали ядерного хроматина; этап окрашивания затем придает цвет и контраст, что позволяет исследовать ядра, цитоплазму и фон. Выбор метода подготовки и окрашивания соответствует диагностическому вопросу — окрашивание по Папаниколау предпочтительно для выявления деталей ядер и хроматина в эпителиальных клетках, тогда как высушенные на воздухе окрашивания по Романовскому подчеркивают цитоплазматические и стромальные особенности, полезные при аспирационной цитологии (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).
Clinical relevance
Адекватность и качество цитологического образца устанавливают верхний предел диагностической точности, поэтому подготовка образца является неотъемлемой частью того, как цитология способствует скринингу и диагностике. Этот раздел описывает, как производится надежный цитологический материал, и предназначен для понимания лабораторной практики; он не является основой для индивидуальных клинических решений.
Evidence & guidelines
Сравнительные данные по методам подготовки наиболее развиты в скрининге рака шейки матки, где систематический обзор показал, что жидкостная и традиционная цитология имеют в целом схожую точность, при этом жидкостная обработка уменьшает количество неудовлетворительных образцов (Arbyn 2008; Siebers 2012, цитируется в статье о жидкостной цитологии). Системы отчетности, такие как Система Бетесда, включают явные критерии адекватности образца, которые напрямую зависят от качества подготовки (Solomon 2002, цитируется в соответствующих тематических статьях).
History
Современная цитопрепарация выросла из разработки Джорджем Папаниколау в начале двадцатого века многоцветного окрашивания для фиксированных мазков, что сделало возможным популяционный скрининг рака шейки матки. Прямой мазок и спиртовая фиксация доминировали в практике на протяжении десятилетий; с 1990-х годов жидкостные методы внедрили стандартизированную монослойную подготовку, и область продолжает интегрировать молекулярные и вспомогательные тесты на остаточный материал образца (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014).
Key figures
- George Papanicolaou
- Leopold Koss
Related topics
Seminal works
- papanicolaou-1942
- arbyn-2008
- koss-melamed-2006
Frequently asked questions
- В чем разница между сбором образца и подготовкой образца в цитологии?
- Сбор — это получение клеточного образца от пациента; подготовка — это лабораторная обработка (перенос на предметное стекло или в жидкость, фиксация и окрашивание), которая превращает этот образец в читаемый микроскопический препарат. Оба этапа являются частью преаналитической фазы, которая определяет качество образца.
- Почему цитологический образец необходимо фиксировать или высушивать на воздухе перед окрашиванием?
- Фиксация или контролируемое высушивание на воздухе сохраняет клеточную структуру и подготавливает клетки к воспроизводимому поглощению красителя. Влажная фиксация поддерживает окрашивание деталей ядра, как при окрашивании по Папаниколау, тогда как преднамеренное высушивание на воздухе является подготовительным этапом для окрашиваний по Романовскому.