Metode Uji Kepekaan Antimikroba

Uji kepekaan antimikroba (AST) adalah serangkaian metode laboratorium terstandardisasi yang digunakan untuk menentukan apakah suatu mikroorganisme dihambat atau dibunuh oleh agen antimikroba dan pada konsentrasi berapa. Hasilnya, biasanya berupa konsentrasi hambat minimum (MIC) atau diameter zona hambat, diinterpretasikan terhadap titik henti (breakpoint) yang dipublikasikan untuk mengklasifikasikan organisme sebagai rentan (susceptible), intermediet, atau resisten.

Definition

Uji kepekaan antimikroba adalah pengukuran terstandardisasi respons in vitro mikroorganisme terhadap agen antimikroba, yang dinyatakan sebagai MIC atau diameter zona dan diinterpretasikan terhadap titik henti untuk menetapkan kategori rentan, intermediet, atau resisten.

Scope

Entri ini mencakup metode AST utama, kuantitas yang diukurnya, dan bagaimana hasilnya diinterpretasikan. Ini membahas metode dilusi (mikrodilusi kaldu, dilusi agar), metode difusi (difusi cakram, strip gradien), dan sistem otomatis, bersama dengan sistem titik henti CLSI dan EUCAST. Ini bersifat metodologis dan tidak memberikan rekomendasi dosis atau pengobatan.

Core questions

• Konsentrasi antimikroba berapa yang menghambat pertumbuhan organisme ini?
• Bagaimana metode dilusi dan difusi berbeda dalam apa yang mereka ukur dan bagaimana mereka dibaca?
• Bagaimana MIC atau diameter zona yang terukur diterjemahkan ke dalam kategori klinis?

Key concepts

• Konsentrasi hambat minimum (MIC)
• Mikrodilusi kaldu (metode referensi)
• Dilusi agar
• Difusi cakram (Kirby-Bauer)
• Difusi gradien (strip gradien MIC)
• Diameter zona hambat
• Titik henti klinis (CLSI, EUCAST)
• Kategori rentan-intermediet-resisten
• Strain kontrol kualitas dan inokulum terstandardisasi

Mechanisms

Metode AST memiliki logika umum: inokulum organisme yang terstandardisasi dipaparkan pada konsentrasi antimikroba yang terdefinisi dalam kondisi terkontrol, dan penghambatan pertumbuhan dibaca. Metode dilusi (mikrodilusi kaldu, yang dianggap sebagai metode referensi, dan dilusi agar) menentukan konsentrasi terendah yang menghambat pertumbuhan yang terlihat, yaitu MIC. Metode difusi menempatkan obat ke dalam agar sehingga berdifusi membentuk gradien konsentrasi: difusi cakram membaca diameter zona hambat, sementara strip gradien membaca MIC di mana elips hambat memotong skala terkalibrasi. Sistem komersial otomatis menghasilkan MIC dari dilusi kaldu miniatur dan deteksi pertumbuhan optik atau turbidimetrik. Hasil diinterpretasikan terhadap titik henti dari CLSI atau EUCAST, dan aturan ahli memeriksa silang hasil untuk konsistensi dengan fenotipe resistensi yang diketahui (jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints).

Clinical relevance

Hasil kepekaan memberikan informasi untuk manajemen penyakit menular, pengelolaan antimikroba, dan surveilans, serta mengisi antibiogram kumulatif yang dilaporkan laboratorium. Entri ini menjelaskan bagaimana hasil tersebut diproduksi dan diinterpretasikan sebagai materi referensi; ini bukan sumber keputusan diagnostik atau peresepan individual.

Epidemiology

Karena AST terstandardisasi, hasilnya dapat dibandingkan antar laboratorium dan dari waktu ke waktu, memungkinkan agregasi ke dalam antibiogram lokal dan ke dalam surveilans resistensi nasional dan internasional. Pilihan metode, versi titik henti, dan kontrol kualitas semuanya memengaruhi komparabilitas data ini (clsi-m100; eucast-breakpoints).

History

Pengujian kepekaan berkembang dalam beberapa dekade setelah pengenalan antibiotik. Metode difusi cakram distandardisasi pada tahun 1960-an dan menjadi banyak digunakan karena kesederhanaannya, sementara dilusi kaldu dan agar memberikan MIC kuantitatif. Seiring waktu, badan standar, terutama CLSI di Amerika Serikat dan EUCAST di Eropa, memformalkan metode, titik henti, dan kontrol kualitas, serta sistem otomatis dan strip gradien memperluas praktik rutin (jorgensen-2009).

Debates

Perbedaan antara titik henti CLSI dan EUCAST

CLSI dan EUCAST menetapkan titik henti menggunakan proses yang terkait tetapi berbeda, dan kategorisasi serta definisi kategori intermediet mereka dapat berbeda; harmonisasi dan interpretasi hasil yang berbeda merupakan masalah metodologis yang berkelanjutan.

Reproduksibilitas di dekat titik henti

MIC yang terukur memiliki variabilitas inheren, sehingga hasil yang mendekati titik henti dapat dikategorikan secara berbeda di seluruh replika atau metode, yang mempersulit interpretasi organisme batas.

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

Apa itu konsentrasi hambat minimum (MIC)?

MIC adalah konsentrasi terendah antimikroba yang mencegah pertumbuhan organisme yang terlihat dalam kondisi terstandardisasi; ini adalah hasil kuantitatif yang ingin ditentukan oleh metode dilusi.

Mengapa ada metode AST yang berbeda?

Metode dilusi memberikan MIC numerik, metode difusi seperti difusi cakram sederhana dan murah, dan sistem otomatis menawarkan kecepatan dan throughput; laboratorium memilih di antara mereka berdasarkan organisme, obat yang diuji, dan sumber daya yang tersedia.

Apa arti rentan, intermediet, dan resisten?

Ini adalah kategori interpretatif yang ditetapkan dengan membandingkan MIC atau diameter zona yang terukur dengan titik henti yang ditetapkan oleh badan standar; mereka merangkum kemungkinan bahwa suatu organisme akan merespons agen dalam kondisi biasa dan didefinisikan secara metodologis daripada sebagai saran pengobatan.