Pengujian Molekuler dan Deteksi HPV pada Spesimen Sitologi

Pengujian molekuler pada spesimen sitologi menerapkan pengujian berbasis asam nukleat pada sel yang diperoleh melalui eksfoliasi atau aspirasi, mendeteksi target DNA atau RNA yang mengungkapkan infeksi, mutasi, atau perubahan relevan klinis lainnya. Deteksi human papillomavirus (HPV) risiko tinggi pada sampel sitologi serviks adalah contoh yang paling luas, sementara pengurutan aspirat jarum halus memperluas diagnosis molekuler ke tumor padat.

Definition

Pengujian molekuler pada spesimen sitologi adalah penerapan pengujian berbasis asam nukleat – termasuk deteksi asam nukleat virus dan profil mutasi tumor – pada sel yang diperoleh melalui sitologi eksfoliatif atau aspirasi atau pada bahan residual berbasis cairannya.

Scope

Entri ini mencakup penggunaan bahan residual sitologi dan berbasis cairan sebagai sumber asam nukleat, deteksi HPV dalam skrining serviks, dan pengujian molekuler yang lebih luas seperti pengurutan generasi berikutnya pada aspirat. Ini adalah tinjauan metodologis dan referensi dan tidak menyediakan protokol skrining atau panduan pengobatan.

Core questions

• Faktor pra-analitik apa yang menentukan apakah bahan sitologi menghasilkan asam nukleat yang memadai untuk pengujian?
• Bagaimana deteksi HPV risiko tinggi melengkapi sitologi serviks morfologis dalam skrining?
• Pengujian molekuler apa yang dapat dilakukan pada aspirat jarum halus dan bahan sitologi residual?

Key concepts

• Ekstraksi asam nukleat dari bahan sitologi
• Deteksi HPV risiko tinggi
• Sitologi berbasis cairan sebagai substrat molekuler
• Strategi refleks dan pengujian bersama
• Pengurutan generasi berikutnya pada aspirat
• Kecukupan spesimen untuk pengujian molekuler

Mechanisms

Sampel sitologi, khususnya preparat berbasis cairan, mempertahankan sel dan cairan residual dari mana DNA dan RNA dapat diekstraksi; asam nukleat ini kemudian diinterogasi melalui pengujian amplifikasi, hibridisasi, atau pengurutan. Dalam aplikasi serviks, pengujian mendeteksi DNA atau RNA dari jenis HPV risiko tinggi yang infeksi persistennya mendasari karsinogenesis serviks, dan pengujian semacam itu dapat dikombinasikan dengan atau menggantikan sitologi morfologis. Dalam sitologi tumor padat, bahan aspirat jarum halus dapat menyediakan asam nukleat yang cukup untuk pengurutan bertarget atau generasi berikutnya guna mengidentifikasi perubahan yang relevan secara diagnostik atau terapeutik.

Clinical relevance

Pengujian molekuler mengubah sampel sitologi menjadi sumber informasi genomik dan virus yang digunakan dalam klasifikasi, stratifikasi risiko, dan pelaporan biomarker; deteksi HPV khususnya telah membentuk kembali paradigma skrining serviks. Entri ini menjelaskan bagaimana pengujian semacam itu dilakukan; algoritma skrining spesifik dan keputusan berbasis biomarker adalah masalah klinis dan bukan merupakan saran individual di sini.

Epidemiology

Infeksi persisten dengan jenis HPV risiko tinggi adalah penyebab utama hampir semua kanker serviks, yang menjadikan deteksi asam nukleat virus pada spesimen sitologi serviks sebagai target skrining yang didasarkan secara biologis (Schiffman et al., 2007).

Evidence & guidelines

Bukti skrining acak, termasuk hasil akhir studi dari studi ATHENA, telah mengevaluasi pengujian HPV primer sebagai strategi skrining serviks lini pertama dibandingkan dengan pendekatan berbasis sitologi (Wright et al., 2015). Untuk tumor padat, penelitian telah menunjukkan bahwa pengurutan generasi berikutnya dapat dilakukan pada spesimen sitologi aspirat jarum halus untuk mendapatkan diagnosis molekuler (Qiu et al., 2015).

History

Penemuan bahwa HPV risiko tinggi adalah penyebab utama kanker serviks mengubah sitologi serviks dari skrining murni morfologis menjadi pengaturan untuk pengujian bersama molekuler dan, kemudian, skrining HPV primer. Secara paralel, pertumbuhan terapi kanker bertarget mendorong adaptasi pengujian molekuler dan pengurutan ke sampel kecil yang dihasilkan oleh aspirasi jarum halus.

Debates

Haruskah pengujian HPV primer menggantikan skrining serviks berbasis sitologi?

Uji coba seperti ATHENA mendukung pengujian HPV primer sebagai skrining lini pertama, tetapi kombinasi optimal pengujian HPV, sitologi, dan triase terus diperdebatkan dan bervariasi di seluruh program skrining.

Seminal works

• schiffman-2007
• wright-2015

Frequently asked questions

Bisakah tes molekuler dilakukan pada sampel yang sama yang digunakan untuk sitologi?

Seringkali ya; preparat sitologi berbasis cairan mempertahankan sel dan cairan residual dari mana asam nukleat dapat diekstraksi, memungkinkan deteksi HPV atau pengujian molekuler lainnya pada spesimen yang sama.

Mengapa pengujian HPV digunakan dalam skrining kanker serviks?

Infeksi persisten dengan jenis HPV risiko tinggi adalah penyebab utama hampir semua kanker serviks, sehingga mendeteksi asam nukleat virus mengidentifikasi populasi yang berisiko dan melengkapi atau, dalam beberapa program, mendahului sitologi morfologis.