Teknik Penunjang dan Metode Molekuler dalam Sitopatologi

Teknik penunjang adalah metode laboratorium yang diterapkan pada material sitologi setelah apusan yang diwarnai Papanicolaou dan Romanowsky rutin diperiksa, untuk menyempurnakan kesan morfologis, mengklasifikasikan tumor, atau mendeteksi perubahan yang dapat ditindaklanjuti secara klinis. Teknik ini memperluas jangkauan sitologi melampaui morfologi saja, memungkinkan sampel kecil seperti aspirat jarum halus, efusi, dan sediaan eksfoliatif untuk menghasilkan informasi imunofenotipik, sitogenetik, dan molekuler.

Definition

Teknik penunjang dalam sitopatologi adalah studi laboratorium tambahan yang dilakukan pada sediaan sitologi atau material sel sisa untuk melengkapi diagnosis morfologis, meliputi metode imunofenotipik, sitogenetik, molekuler, dan komputasi.

Scope

Area ini mengarahkan pembaca pada metode tambahan utama yang digunakan pada spesimen sitologi: imunositokimia untuk penanda protein, hibridisasi in situ fluoresen untuk perubahan tingkat kromosom dan gen, sitometri alir untuk imunofenotipe suspensi sel, pengujian molekuler dan human papillomavirus pada material sitologi, dan patologi digital dengan analisis gambar otomatis. Ini adalah tinjauan struktural; setiap teknik dibahas secara rinci dalam node topiknya sendiri.

Sub-topics

• Digital Pathology and Automated Image Analysis in Cytology
• Flow Cytometry in Cytopathology
• Fluorescence In Situ Hybridization (FISH) in Cytology
• Immunocytochemistry and Cell Markers
• Molecular Testing and HPV Detection on Cytologic Specimens

Core questions

• Metode penunjang mana yang sesuai untuk spesimen sitologi dan pertanyaan diagnostik tertentu?
• Bagaimana persiapan dan fiksasi spesimen memengaruhi validitas hasil imunositokimia, FISH, dan molekuler?
• Bagaimana material sitologi yang terbatas dapat ditriase sehingga studi morfologis dan penunjang keduanya dapat dipertahankan?

Key concepts

• Kecukupan dan triase spesimen
• Pembuatan blok sel
• Imunofenotipe
• Validasi dan faktor pra-analitik
• Pengujian refleks dan ajuvan
• Alur kerja hemat sampel

Mechanisms

Sampel sitologi dapat diproses sebagai apusan langsung, sediaan berbasis cairan, sitospin, atau blok sel; sediaan yang dipilih menentukan metode penunjang mana yang dapat dilakukan. Imunositokimia melokalisasi antigen protein dengan antibodi berlabel, hibridisasi in situ fluoresen memvisualisasikan sekuens DNA spesifik dengan probe fluoresen, sitometri alir mengukur ekspresi antigen pada sel dalam suspensi, dan uji molekuler mengekstraksi serta menginterogasi asam nukleat. Karena material sitologi seringkali langka, tema yang berulang adalah triase sampel sehingga morfologi dan satu atau lebih studi tambahan dapat dilakukan.

Clinical relevance

Teknik penunjang memperluas apa yang dapat dijawab oleh sampel sitologi, mendukung klasifikasi tumor, penentuan garis keturunan, dan deteksi biomarker yang dilaporkan bersama morfologi. Sebagai materi referensi, area ini menjelaskan bagaimana informasi tersebut dihasilkan; pemilihan dan interpretasi tes spesifik adalah keputusan laboratorium klinis dan bukan merupakan saran individual di sini.

Evidence & guidelines

Badan profesional telah mengeluarkan kerangka kerja validasi dan pelaporan yang relevan dengan metode ini, termasuk pedoman College of American Pathologists tentang validasi pencitraan seluruh slide untuk penggunaan diagnostik (Pantanowitz et al., 2013). Bukti spesifik metode, seperti pengurutan generasi berikutnya yang dilakukan langsung pada material aspirat jarum halus (Qiu et al., 2015), dirangkum dalam node topik yang sesuai.

History

Sitopatologi dimulai sebagai disiplin murni morfologis yang dibangun di atas pewarnaan Papanicolaou. Selama dekade berikutnya, imunositokimia, kemudian hibridisasi in situ dan sitometri alir, dan yang terbaru pengujian molekuler berbasis asam nukleat dan analisis gambar digital diadaptasi dari histopatologi dan kedokteran laboratorium ke sampel yang lebih kecil dan disiapkan secara berbeda yang ditemukan dalam sitologi.

Seminal works

• fetsch-abati-2001
• pantanowitz-2013

Frequently asked questions

Mengapa teknik penunjang sangat penting dalam sitologi?

Sampel sitologi seringkali kecil dan kurang arsitektur, sehingga metode tambahan yang menambahkan informasi imunofenotipik atau molekuler seringkali memungkinkan klasifikasi definitif yang tidak dapat diberikan oleh morfologi saja.

Apa itu blok sel dan mengapa penting untuk pengujian penunjang?

Blok sel adalah sediaan yang tertanam parafin yang dibuat dari material sitologi sisa; blok ini menyediakan sayatan yang cocok untuk imunositokimia, hibridisasi in situ, dan ekstraksi molekuler, menjadikannya pendorong utama studi penunjang pada spesimen sitologi.