جمعآوری و آمادهسازی نمونه
جمعآوری و آمادهسازی نمونه، اساس پیشتحلیلی سیتوپاتولوژی است: مجموعهای از تکنیکها که به وسیله آنها مواد سلولی از بدن به دست آمده و روی لام قرار میگیرند تا سلولهای منفرد زیر میکروسکوپ بررسی شوند. از آنجا که تشخیص سیتولوژیک بر مورفولوژی سلولها و گروههای کوچک سلولی، به جای ساختار بافت دستنخورده، استوار است، نحوه جمعآوری، انتقال، تثبیت و رنگآمیزی نمونه تا حد زیادی تعیین میکند که آیا تشخیص قابل اعتماد امکانپذیر است یا خیر.
Definition
جمعآوری و آمادهسازی نمونه شامل مراحل آمادهسازی سیتولوژیک – نمونهبرداری، انتقال به لام یا محیط تثبیتکننده، تثبیت، و رنگآمیزی – است که یک نمونه سیتولوژیک بالینی را به یک لام میکروسکوپی مناسب برای تفسیر مورفولوژیک تبدیل میکند.
Scope
این بخش خواننده را با مسیرهای اصلی آمادهسازی مورد استفاده در سیتولوژی آشنا میکند: اسمیرهای معمولی مستقیم، پردازش مبتنی بر مایع، استراتژیهای تثبیت، و دو سنت بزرگ رنگآمیزی (رنگآمیزی پاپانیکولائو با تثبیت الکلی و رنگآمیزیهای رومانوفسکی با خشک شدن در هوا). این موارد به عنوان روشهای آزمایشگاهی که کفایت و قابلیت تفسیر نمونه را شکل میدهند، مطرح میشوند؛ این یک راهنمای رویهای نیست و دستورالعملهای خاص بیمار را ارائه نمیدهد.
Sub-topics
Key concepts
- فاز پیشتحلیلی سیتولوژی
- کفایت و سلولیت نمونه
- اسمیر معمولی در مقابل پردازش مبتنی بر مایع
- تثبیت مرطوب در مقابل خشک شدن در هوا
- رنگآمیزی پاپانیکولائو و رنگآمیزیهای رومانوفسکی
- تثبیت، شفافیت، و جزئیات هستهای
- آرتیفکت خشک شدن
Mechanisms
یک نمونه سیتولوژیک با سلولهایی که در مایع معلق هستند یا روی ابزاری خراشیده شدهاند، آغاز میشود. در آمادهسازی معمولی، مواد مستقیماً روی یک لام شیشهای مالیده شده و بلافاصله تثبیت میشوند (تثبیت مرطوب) برای رنگآمیزی پاپانیکولائو یا اجازه داده میشود در هوا خشک شوند برای رنگآمیزی رومانوفسکی. در سیتولوژی مبتنی بر مایع، نمونه به جای آن در یک مایع نگهدارنده شسته میشود و یک ابزار یک لایه نازک و یکنواخت از سلولها را روی لام قرار میدهد، که خون، مخاط و همپوشانی مبهم را کاهش میدهد (Arbyn 2008). تثبیت، پروتئینهای سلولی را پایدار میکند و جزئیات کروماتین هستهای را حفظ میکند؛ مرحله رنگآمیزی سپس رنگ و کنتراست را ایجاد میکند که امکان خواندن هستهها، سیتوپلاسم و پسزمینه را فراهم میآورد. انتخاب آمادهسازی و رنگآمیزی با سوال تشخیصی مطابقت دارد – رنگآمیزی پاپانیکولائو جزئیات هستهای و کروماتین را در سلولهای اپیتلیال ترجیح میدهد، در حالی که رنگآمیزیهای رومانوفسکی خشک شده در هوا بر ویژگیهای سیتوپلاسمی و استرومایی مفید در سیتولوژی آسپیراسیون تأکید دارند (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).
Clinical relevance
کفایت و کیفیت یک نمونه سیتولوژیک، حد بالایی را برای دقت تشخیصی تعیین میکند، به همین دلیل آمادهسازی نمونه جزء لاینفک نحوه مشارکت سیتولوژی در غربالگری و تشخیص است. این بخش نحوه تولید مواد سیتولوژیک قابل اعتماد را توصیف میکند و به عنوان پیشزمینهای برای درک عملکرد آزمایشگاهی در نظر گرفته شده است؛ این مبنایی برای تصمیمات بالینی فردی نیست.
Evidence & guidelines
شواهد مقایسهای برای روشهای آمادهسازی بیشتر در غربالگری دهانه رحم توسعه یافته است، جایی که بررسی سیستماتیک نشان داد سیتولوژی مبتنی بر مایع و سیتولوژی معمولی دقت کلی مشابهی دارند، در حالی که پردازش مبتنی بر مایع نمونههای نامطلوب را کاهش میدهد (Arbyn 2008; Siebers 2012، نقل شده در مدخل سیتولوژی مبتنی بر مایع). چارچوبهای گزارشدهی مانند سیستم بتسدا، معیارهای صریح کفایت نمونه را که مستقیماً به کیفیت آمادهسازی بستگی دارد، در بر میگیرند (Solomon 2002، نقل شده در مدخلهای موضوعی مربوطه).
History
آمادهسازی سیتولوژیک مدرن از توسعه رنگآمیزی چندرنگ توسط جورج پاپانیکولائو در اوایل قرن بیستم برای اسمیرهای تثبیت شده نشأت گرفت، که غربالگری دهانه رحم در مقیاس جمعیتی را امکانپذیر ساخت. اسمیر مستقیم و تثبیت الکلی برای دههها بر این عمل غالب بود؛ از دهه 1990، روشهای مبتنی بر مایع، آمادهسازی تکلایه استاندارد شده را معرفی کردند، و این حوزه همچنان به ادغام آزمایشهای مولکولی و کمکی بر روی مواد نمونه باقیمانده ادامه میدهد (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014).
Key figures
- George Papanicolaou
- Leopold Koss
Related topics
Seminal works
- papanicolaou-1942
- arbyn-2008
- koss-melamed-2006
Frequently asked questions
- تفاوت بین جمعآوری نمونه و آمادهسازی نمونه در سیتولوژی چیست؟
- جمعآوری به معنای به دست آوردن نمونه سلولی از بیمار است؛ آمادهسازی فرآیند آزمایشگاهی – انتقال به لام یا مایع، تثبیت، و رنگآمیزی – است که آن نمونه را به یک لام میکروسکوپی قابل خواندن تبدیل میکند. هر دو بخشی از فاز پیشتحلیلی هستند که کیفیت نمونه را تعیین میکند.
- چرا یک نمونه سیتولوژی قبل از رنگآمیزی باید تثبیت یا در هوا خشک شود؟
- تثبیت یا خشک شدن کنترل شده در هوا، ساختار سلولی را حفظ میکند و سلولها را برای جذب رنگ به روشی قابل تکرار آماده میسازد. تثبیت مرطوب از رنگآمیزیهایی که جزئیات هستهای را نشان میدهند مانند رنگآمیزی پاپانیکولائو پشتیبانی میکند، در حالی که خشک شدن عمدی در هوا مرحله آمادهسازی برای رنگآمیزیهای رومانوفسکی است.