ایمونوسیتوشیمی و نشانگرهای سلولی
ایمونوسیتوشیمی (ICC) کاربرد رنگآمیزی مبتنی بر آنتیبادی در آمادهسازیهای سیتولوژیک برای شناسایی آنتیژنهای پروتئینی خاص در داخل یا روی سلولها است. با آشکار ساختن ایمونوفنوتیپ یک سلول، به تعیین رده سلولی، تمایز فرآیندهای واکنشی از نئوپلاستیک، شناسایی محل اولیه متاستاز، و تشخیص نشانگرهایی که تنها با مورفولوژی قابل مشاهده نیستند، کمک میکند.
Definition
ایمونوسیتوشیمی یک تکنیک کمکی است که در آن از آنتیبادیهای نشاندار برای مکانیابی آنتیژنهای پروتئینی خاص در آمادهسازیهای سیتولوژیک استفاده میشود و یک پروفایل ایمونوفنوتیپی ایجاد میکند که تشخیص مورفولوژیک را تکمیل میکند.
Scope
این مدخل شامل اصول مکانیابی آنتیژن-آنتیبادی در اسمیرها، آمادهسازیهای مبتنی بر مایع، سیتواسپینها و بلوکهای سلولی؛ پانلهای نشانگرهای مورد استفاده برای پاسخ به سوالات تشخیصی رایج؛ و عوامل پیشتحلیلی و تفسیری خاص مواد سیتولوژیک است. این مبحث ایمونوسیتوشیمی را به عنوان یک موضوع روششناختی بررسی میکند، نه به عنوان منبعی برای پروتکلهای تشخیصی.
Core questions
- چگونه آمادهسازی و تثبیت نمونه بر حفظ آنتیژن و کیفیت رنگآمیزی در سیتولوژی تأثیر میگذارد؟
- کدام پانلهای نشانگر، تشخیصهای افتراقی اصلی را در یک نمونه سیتولوژیک مشخص تمایز میدهند؟
- چگونه باید مواد سیتولوژیک محدود را حفظ کرد تا بتوان یک ایمونوپانل کافی را انجام داد؟
Key concepts
- اتصال آنتیژن-آنتیبادی و سیستمهای تشخیص
- بلوک سلولی در مقابل اسمیر و بسترهای مبتنی بر مایع
- پانلهای نشانگر به جای رنگآمیزیهای منفرد
- نشانگرهای رده سلولی و محل منشأ
- متغیرهای پیشتحلیلی (تثبیت، پردازش)
- اعتبارسنجی آنتیبادیها بر روی بسترهای سیتولوژیک
Mechanisms
یک آنتیبادی اولیه به آنتیژن هدف خود در آمادهسازی سیتولوژیک تثبیتشده متصل میشود، و سپس آنتیبادی متصلشده از طریق یک سیستم تشخیص که یک کروموژن رنگی یا فلوروفور را در محل آنتیژن رسوب میدهد، قابل مشاهده میشود. از آنجایی که نمونههای سیتولوژیک به روشهای مختلفی آماده میشوند - اسمیرهای خشکشده در هوا یا تثبیتشده با الکل، محیطهای مبتنی بر مایع، سیتواسپینها، و بلوکهای سلولی تثبیتشده با فرمالین - حفظ آنتیژن و رنگآمیزی پسزمینه با بستر متفاوت است، بنابراین نمیتوان فرض کرد که آنتیبادیهای معتبر برای بافتشناسی به طور یکسان در سیتولوژی عمل میکنند. تفسیر بر اساس الگو و توزیع رنگآمیزی در یک پانل از نشانگرها که برای حل یک افتراق خاص انتخاب شدهاند، تکیه دارد، نه بر اساس هر نتیجه مثبت واحد.
Clinical relevance
ایمونوسیتوشیمی به طبقهبندی تومور، تعیین رده سلولی، و شناسایی محل اولیه احتمالی بیماری متاستاتیک در نمونههای سیتولوژیک کمک میکند. به عنوان محتوای مرجع، نحوه تولید و تفسیر اطلاعات ایمونوفنوتیپی را توضیح میدهد؛ انتخاب پانلهای آنتیبادی و گزارشدهی تصمیمات آزمایشگاهی هستند و مشاوره بالینی فردی نیستند.
Evidence & guidelines
بررسیهای ایمونوسیتوشیمی بر روی مواد سیتولوژیک تأکید میکنند که نتایج به شدت به آمادهسازی و اعتبارسنجی بستگی دارد و نشانگرها باید به صورت پانلهایی که در زمینه مورفولوژیک تفسیر میشوند، به کار روند (Fetsch & Abati, 2001; Hirokawa et al., 2024). اعتبارسنجی خاص بستر به طور مکرر مورد تأکید قرار میگیرد زیرا عملکرد آنتیبادی میتواند بین مقاطع بافتی و آمادهسازیهای سیتولوژیک متفاوت باشد.
History
مکانیابی مبتنی بر آنتیبادی، که برای مقاطع بافتی توسعه یافته بود، به تدریج با بهبود شیمی تشخیص و روشهای حفظ آنتیژن، با سیتولوژی تطبیق داده شد. سیتولوژی افیوژن یک زمینه اولیه و تأثیرگذار بود که در آن پانلهایی برای جداسازی سلولهای مزوتلیال واکنشی از کارسینوم متاستاتیک گردآوری شد، مشکلی که به تفصیل توسط Fetsch و Abati (2001) بررسی شده است.
Debates
- قابلیت انتقال آنتیبادیهای معتبرشده برای بافتشناسی به بسترهای سیتولوژیک چقدر است؟
- از آنجایی که تثبیت و آمادهسازی در اسمیرها، محیطهای مبتنی بر مایع و بلوکهای سلولی متفاوت است، حساسیت و ویژگی آنتیبادی ممکن است از مقاطع بافتی منتقل نشود، بنابراین اعتبارسنجی خاص بستر قبل از استفاده بالینی توصیه میشود.
Related topics
Seminal works
- fetsch-abati-2001
Frequently asked questions
- تفاوت بین ایمونوسیتوشیمی و ایمونوهیستوشیمی چیست؟
- هر دو از آنتیبادیها برای مکانیابی آنتیژنها استفاده میکنند، اما ایمونوسیتوشیمی بر روی آمادهسازیهای سیتولوژیک مانند اسمیرها، لامهای مبتنی بر مایع و بلوکهای سلولی اعمال میشود، در حالی که ایمونوهیستوشیمی بر روی مقاطع بافتی اعمال میشود؛ بسترهای متفاوت نیاز به اعتبارسنجی جداگانه دارند.
- چرا نشانگرها به صورت پانل و نه به صورت تکی استفاده میشوند؟
- هیچ نشانگر واحدی کاملاً اختصاصی نیست، بنابراین یک پانل که برای پرداختن به یک افتراق تعریفشده انتخاب شده و همراه با مورفولوژی تفسیر میشود، ایمونوفنوتیپ قابل اعتمادتری نسبت به هر رنگآمیزی منفرد ارائه میدهد.