فلوسیتومتری در سیتوپاتولوژی
فلوسیتومتری ویژگیهای فیزیکی و آنتیژنیک سلولهای منفرد را هنگام عبور تکفایل از پرتو لیزر اندازهگیری میکند و یک ایمونوفنوتیپ کمی از سوسپانسیون سلولی تولید مینماید. هنگامی که این روش برای مواد سیتولوژیک مانند آسپیراسیون با سوزن ظریف و افیوژنها به کار میرود، به سرعت سلولهای موجود را شناسایی میکند و به ویژه در بررسی تکثیرهای لنفوئیدی ارزشمند است.
Definition
فلوسیتومتری در سیتوپاتولوژی، استفاده از ایمونوفنوتیپینگ فلوسیتومتریک چندپارامتری بر روی سوسپانسیونهای تکسلولی آماده شده از نمونههای سیتولوژیک برای شناسایی جمعیتهای سلولی و حمایت از تشخیص، به ویژه ضایعات هماتولنفوییدی است.
Scope
این مدخل شامل آمادهسازی نمونههای سیتولوژیک به سوسپانسیونهای تکسلولی، اصل ایمونوفنوتیپینگ چندپارامتری، و نقش فلوسیتومتری در کنار مورفولوژی و سایر روشهای کمکی، به ویژه برای لنفوم است. این یک مرجع روششناختی است، نه یک پروتکل تشخیصی.
Core questions
- چگونه یک نمونه سیتولوژیک به سوسپانسیونی مناسب برای فلوسیتومتری تبدیل میشود؟
- کدام ویژگیهای ایمونوفنوتیپی به تمایز جمعیتهای لنفوئیدی واکنشی از کلونال کمک میکنند؟
- فلوسیتومتری چگونه مورفولوژی و بیوپسی بافتی را در بررسی لنفوم تکمیل میکند؟
Key concepts
- آمادهسازی سوسپانسیون تکسلولی
- ایمونوفنوتیپینگ چندپارامتری
- اندازهگیری پراکندگی نور و فلورسانس
- ارزیابی کلونالیته در جمعیتهای لنفوئیدی
- اولویتبندی سریع آسپیراسیونها در محل
- تکمیلکنندگی با مورفولوژی
Mechanisms
سلولهای حاصل از آسپیراسیون یا افیوژن در یک سوسپانسیون مایع پراکنده میشوند، با پنلهایی از آنتیبادیهای کونژوگه شده با فلوروفور نشانگذاری میشوند و یکی یکی از طریق یک یا چند پرتو لیزر عبور داده میشوند؛ آشکارسازها پراکندگی نور رو به جلو و جانبی را ثبت میکنند که منعکسکننده اندازه و پیچیدگی سلول است، همراه با فلورسانس آنتیبادیهای متصل شده. هزاران سلول به سرعت اندازهگیری میشوند و یک ایمونوفنوتیپ چندپارامتری تولید میکنند که در آن جمعیتهای غیرطبیعی یا کلونال قابل شناسایی هستند - برای مثال، با محدودیت زنجیره سبک یا بیان آنتیژن غیرعادی در سلولهای لنفوئیدی. از آنجا که این روش به سلولهای زنده در سوسپانسیون نیاز دارد، مکمل ارزیابی مورفولوژیک و معماری است و جایگزین آن نیست.
Clinical relevance
فلوسیتومتری به تشخیص و طبقهبندی فرعی تکثیرهای لنفوئیدی و سایر تکثیرهای خونساز که با سیتولوژی نمونهبرداری شدهاند کمک میکند و میتواند مواد آسپیراسیون را برای آزمایشهای اضافی اولویتبندی کند. این مدخل نحوه تولید دادههای ایمونوفنوتیپی توسط این تکنیک را توضیح میدهد؛ تفسیر تشخیصی خاص و ادغام نتایج فلوسیتومتری با مورفولوژی تصمیمات آزمایشگاهی و بالینی هستند، نه توصیههای فردی.
Evidence & guidelines
فلوسیتومتری به عنوان یک روش کمکی در تشخیص لنفوم با آسپیراسیون با سوزن ظریف به خوبی تثبیت شده است، جایی که ایمونوفنوتیپینگ سریع سلولهای آسپیراسیون شده را فراهم میکند (Skoog & Tani, 2009). مطالعات مقایسهای همچنان در حال ارزیابی این هستند که چگونه ترکیب آسپیراسیون با فلوسیتومتری، یا جایگزینی رویکردهای بیوپسی سوزنی، بر بازده تشخیصی در لنفوم عمقی تأثیر میگذارد (Yang et al., 2023).
History
فلوسیتومتری در هماتولوژی و ایمونولوژی به عنوان ابزاری برای شمارش و فنوتیپینگ سلولهای خون و مغز استخوان توسعه یافت. تطبیق آن با سیتولوژی آسپیراسیون با سوزن ظریف، امکان اعمال همان ایمونوفنوتیپینگ سریع را برای غدد لنفاوی و سایر ضایعات نمونهبرداری شده بدون برش فراهم کرد و آن را به یک روش کمکی استاندارد در سیتولوژی لنفوم تبدیل نمود.
Debates
- چگونه باید آسپیراسیون با فلوسیتومتری در مقابل بیوپسی سوزنی مرکزی برای تشخیص لنفوم متعادل شود؟
- ترکیب آسپیراسیون با سوزن ظریف و فلوسیتومتری یک ایمونوفنوتیپ سریع و کمتهاجمی ارائه میدهد، اما طبقهبندی فرعی وابسته به معماری ممکن است همچنان به بافت نیاز داشته باشد، بنابراین استراتژی بهینه نمونهبرداری برای لنفوم عمقی همچنان مورد بحث است.
Related topics
Seminal works
- skoog-tani-2009
Frequently asked questions
- چه نوع نمونه سیتولوژیکی برای فلوسیتومتری مناسب است؟
- نمونههایی که میتوانند به یک سوسپانسیون تکسلولی زنده پراکنده شوند، مانند آسپیراسیونهای با سوزن ظریف از غدد لنفاوی و افیوژنها، مناسب هستند؛ سلولها باید برای نشانگذاری آنتیبادی زنده و تثبیت نشده باقی بمانند.
- چرا فلوسیتومتری به ویژه برای لنفوم مفید است؟
- این روش به سرعت بسیاری از آنتیژنها را بر روی تعداد زیادی از سلولهای منفرد اندازهگیری میکند و امکان تشخیص جمعیتهای لنفوئیدی کلونال یا غیرعادی را فراهم میآورد، برای مثال از طریق محدودیت زنجیره سبک، که از تشخیص و طبقهبندی فرعی لنفومها حمایت میکند.