Métodos de Prueba de Susceptibilidad Antimicrobiana

La prueba de susceptibilidad antimicrobiana (AST) es el conjunto de métodos de laboratorio estandarizados utilizados para determinar si un microorganismo es inhibido o eliminado por un agente antimicrobiano y a qué concentración. Sus resultados, típicamente una concentración mínima inhibitoria (CMI) o un diámetro de zona de inhibición, se interpretan frente a puntos de corte publicados para clasificar el organismo como susceptible, intermedio o resistente.

Definition

La prueba de susceptibilidad antimicrobiana es la medición estandarizada de la respuesta in vitro de un microorganismo a los agentes antimicrobianos, expresada como una CMI o un diámetro de zona e interpretada frente a puntos de corte para asignar una categoría de susceptible, intermedio o resistente.

Scope

Esta entrada cubre los principales métodos de AST, las cantidades que miden y cómo se interpretan los resultados. Aborda los métodos de dilución (microdilución en caldo, dilución en agar), los métodos de difusión (difusión en disco, tira de gradiente) y los sistemas automatizados, junto con los sistemas de puntos de corte de CLSI y EUCAST. Es metodológica y no proporciona recomendaciones de dosificación o tratamiento.

Core questions

• ¿Qué concentración de un antimicrobiano inhibe el crecimiento de este organismo?
• ¿Cómo difieren los métodos de dilución y difusión en lo que miden y cómo se leen?
• ¿Cómo se traduce una CMI o un diámetro de zona medido en una categoría clínica?

Key concepts

• Concentración mínima inhibitoria (CMI)
• Microdilución en caldo (método de referencia)
• Dilución en agar
• Difusión en disco (Kirby-Bauer)
• Difusión en gradiente (tira de gradiente de CMI)
• Diámetro de la zona de inhibición
• Puntos de corte clínicos (CLSI, EUCAST)
• Categorías susceptible-intermedio-resistente
• Cepas de control de calidad e inóculo estandarizado

Mechanisms

Los métodos de AST comparten una lógica común: un inóculo estandarizado del organismo se expone a concentraciones definidas de un antimicrobiano bajo condiciones controladas, y se lee la inhibición del crecimiento. Los métodos de dilución (microdilución en caldo, considerada un método de referencia, y dilución en agar) determinan la concentración más baja que inhibe el crecimiento visible, la CMI. Los métodos de difusión colocan el fármaco en agar para que se difunda y forme un gradiente de concentración: la difusión en disco lee el diámetro de la zona de inhibición, mientras que las tiras de gradiente leen la CMI donde la elipse de inhibición se cruza con una escala calibrada. Los sistemas comerciales automatizados generan CMI a partir de microdilución en caldo miniaturizada y detección óptica o turbidimétrica del crecimiento. Los resultados se interpretan frente a los puntos de corte de CLSI o EUCAST, y las reglas expertas verifican la consistencia de los resultados con los fenotipos de resistencia conocidos (jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints).

Clinical relevance

Los resultados de susceptibilidad informan la gestión de enfermedades infecciosas, la administración de antimicrobianos y la vigilancia, y alimentan los antibiogramas acumulativos que reportan los laboratorios. Esta entrada explica cómo se producen e interpretan esos resultados como material de referencia; no es una fuente de decisiones diagnósticas o de prescripción individuales.

Epidemiology

Debido a que el AST está estandarizado, los resultados son comparables entre laboratorios y a lo largo del tiempo, lo que permite la agregación en antibiogramas locales y en la vigilancia de la resistencia nacional e internacional. La elección del método, la versión del punto de corte y el control de calidad influyen en la comparabilidad de estos datos (clsi-m100; eucast-breakpoints).

History

Las pruebas de susceptibilidad se desarrollaron en las décadas posteriores a la introducción de los antibióticos. El método de difusión en disco se estandarizó en la década de 1960 y se generalizó por su simplicidad, mientras que la dilución en caldo y agar proporcionó CMI cuantitativas. Con el tiempo, los organismos de normalización, en particular CLSI en los Estados Unidos y EUCAST en Europa, formalizaron los métodos, los puntos de corte y el control de calidad, y los sistemas automatizados y las tiras de gradiente ampliaron la práctica rutinaria (jorgensen-2009).

Debates

Diferencias entre los puntos de corte de CLSI y EUCAST

CLSI y EUCAST establecen puntos de corte utilizando procesos relacionados pero distintos, y sus categorizaciones y la definición de la categoría intermedia pueden diferir; la armonización y la interpretación de resultados discrepantes son cuestiones metodológicas en curso.

Reproducibilidad cerca de los puntos de corte

Las CMI medidas conllevan una variabilidad inherente, por lo que los resultados cercanos a un punto de corte pueden categorizarse de manera diferente entre réplicas o métodos, lo que complica la interpretación de organismos limítrofes.

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

¿Qué es una concentración mínima inhibitoria (CMI)?

La CMI es la concentración más baja de un antimicrobiano que previene el crecimiento visible de un organismo bajo condiciones estandarizadas; es el resultado cuantitativo que los métodos de dilución buscan determinar.

¿Por qué existen diferentes métodos de AST?

Los métodos de dilución proporcionan una CMI numérica, los métodos de difusión como la difusión en disco son simples y económicos, y los sistemas automatizados ofrecen velocidad y rendimiento; los laboratorios eligen entre ellos según el organismo, los fármacos probados y los recursos disponibles.

¿Qué significan susceptible, intermedio y resistente?

Son categorías interpretativas asignadas al comparar una CMI o un diámetro de zona medido con los puntos de corte establecidos por los organismos de normalización; resumen la probabilidad de que un organismo responda a un agente en condiciones habituales y se definen metodológicamente en lugar de como un consejo de tratamiento.