色谱分离

色谱分离是用于将复杂的天然产物混合物分离成单个化合物的主要下游技术。由流动相携带的混合物通过固定相，与固定相相互作用更强的组分迁移速度更慢，因此组分在空间或时间上得以分离。从简单的柱层析和薄层色谱到高效液相和逆流色谱变体，色谱法是天然产物分离和质量控制的“主力军”。

Definition

色谱分离通过将溶解在流动相中的混合物通过固定相来分离混合物；组分根据其对两相的不同亲和力（这决定了它们的相对迁移速率）而分离。

Scope

本条目涵盖了所有色谱法所依据的差示分配原理、药物识别学中使用的主要模式，以及色谱法在制备性分离和分析性指纹图谱中的作用。它是一个方法学参考，不提供仪器操作规程、剂量或治疗说明。

Core questions

• 流动相和固定相之间的差示分配如何分离组分？
• 哪些色谱模式适合哪些类别的天然产物？
• 制备性色谱（用于分离）与分析性色谱（用于指纹图谱分析）有何区别？
• 色谱法如何整合到生物测定指导的分离工作流程中？

Key concepts

• 流动相和固定相
• 差示分配和保留
• 柱层析和薄层色谱
• 高效液相色谱
• 逆流色谱
• 制备性色谱与分析性色谱
• 色谱指纹图谱
• 生物测定指导的分离

Mechanisms

所有色谱法都利用分析物在移动流动相和固定固定相之间反复达到平衡的原理：分配到固定相中更强的组分被保留的时间更长，迁移速度更慢，因此混合物会分散成已分离的谱带或峰（Sticher, 2008）。调整固定相（例如正相或反相硅胶）和流动相组成可以调节对目标化合物类别的选择性，现代选择性微型技术进一步提高了这种分离度（Lefebvre et al., 2021）。在天然产物工作中，色谱法有两种作用：制备性分离以分离纯化合物，通常通过生物测定指导，以便活性组分通过连续的色谱柱进行跟踪；以及分析性分离以对酚酸等组分进行指纹图谱分析和定量，用于鉴定和质量控制（Sticher, 2008; Arceusz et al., 2013）。

Clinical relevance

色谱法可提供纯化的参考化合物、标准化的指纹图谱和含量测定，这些是草药产品和天然产物药物先导化合物鉴定和质量控制的基础，因此理解它有助于批判性评估此类产品的特性。这是描述性的方法学背景，并非临床指导；它不暗示任何关于使用、剂量或适应症的建议。

Evidence & guidelines

色谱鉴定和测定方法已纳入草药药典专论中，方法学文献综述了用于分离和定量天然产物的方法和最新进展（Sticher, 2008; Lefebvre et al., 2021; Arceusz et al., 2013）。本条目在参考层面总结了这些文献，并非监管或临床指南。

History

色谱法起源于米哈伊尔·茨维特（Mikhail Tswett）在20世纪初在填充柱上分离植物色素，其名称也由此而来，并逐步发展为纸层析、薄层色谱、气相色谱和高效液相色谱，成为天然产物分离和分析不可或缺的工具（Sticher, 2008）。

Seminal works

• sticher-2008
• lefebvre-2021

Frequently asked questions

为什么色谱法对天然产物分离至关重要？

天然提取物是复杂的混合物，色谱法可以通过利用组分在流动相和固定相之间分配的微小差异，将它们分离成单个化合物，使其成为从粗提物到纯化合物的主要途径。

制备性色谱和分析性色谱在此有何区别？

制备性色谱旨在分离和回收可用量的纯化合物，而分析性色谱旨在鉴定、指纹图谱分析和定量组分，以用于鉴定和质量控制目的。