Thu thập và Chuẩn bị Mẫu vật
Thu thập và chuẩn bị mẫu vật là nền tảng tiền phân tích của tế bào học bệnh lý: tập hợp các kỹ thuật mà vật liệu tế bào được lấy từ cơ thể và đưa lên lam kính để các tế bào riêng lẻ có thể được kiểm tra dưới kính hiển vi. Bởi vì chẩn đoán tế bào học dựa trên hình thái của tế bào và các nhóm tế bào nhỏ hơn là kiến trúc mô nguyên vẹn, cách một mẫu được thu thập, chuyển giao, cố định và nhuộm phần lớn quyết định liệu có thể đưa ra chẩn đoán đáng tin cậy hay không.
Definition
Thu thập và chuẩn bị mẫu vật bao gồm các bước chuẩn bị tế bào học – lấy mẫu, chuyển sang lam kính hoặc môi trường cố định, cố định và nhuộm – nhằm biến một mẫu tế bào học lâm sàng thành một lam kính hiển vi phù hợp để diễn giải hình thái học.
Scope
Lĩnh vực này định hướng người đọc đến các phương pháp chuẩn bị chính được sử dụng trong tế bào học: phết trực tiếp thông thường, xử lý dựa trên chất lỏng, các chiến lược cố định và hai truyền thống nhuộm lớn (nhuộm Papanicolaou cố định bằng cồn và nhuộm Romanowsky khô trong không khí). Nó coi đây là các phương pháp phòng thí nghiệm định hình sự đầy đủ và khả năng diễn giải của mẫu vật; nó không phải là một cẩm nang thủ tục và không đưa ra hướng dẫn cụ thể cho bệnh nhân.
Sub-topics
Key concepts
- Giai đoạn tiền phân tích của tế bào học
- Độ đầy đủ và mật độ tế bào của mẫu vật
- Phết thông thường so với xử lý dựa trên chất lỏng
- Cố định ướt so với làm khô trong không khí
- Nhuộm Papanicolaou và nhuộm Romanowsky
- Cố định, độ trong suốt và chi tiết hạt nhân
- Hiện tượng khô do tạo tác
Mechanisms
Một mẫu tế bào học bắt đầu dưới dạng các tế bào lơ lửng trong chất lỏng hoặc được cạo lên một dụng cụ. Trong chuẩn bị thông thường, vật liệu được phết trực tiếp lên lam kính và được cố định ngay lập tức (cố định ướt) để nhuộm Papanicolaou hoặc để khô trong không khí để nhuộm Romanowsky. Trong tế bào học dựa trên chất lỏng, mẫu được rửa vào một chất lỏng bảo quản và một dụng cụ sẽ lắng đọng một lớp tế bào mỏng, đều lên lam kính, giảm thiểu máu, chất nhầy và sự chồng chéo gây che khuất (Arbyn 2008). Cố định làm ổn định protein tế bào và bảo tồn chi tiết nhiễm sắc chất hạt nhân; bước nhuộm sau đó tạo màu sắc và độ tương phản cho phép đọc nhân, bào tương và nền. Việc lựa chọn phương pháp chuẩn bị và nhuộm được điều chỉnh theo câu hỏi chẩn đoán – nhuộm Papanicolaou ưu tiên chi tiết nhân và nhiễm sắc chất trong các tế bào biểu mô, trong khi nhuộm Romanowsky khô trong không khí nhấn mạnh các đặc điểm bào tương và mô đệm hữu ích trong tế bào học chọc hút (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).
Clinical relevance
Sự đầy đủ và chất lượng của một mẫu tế bào học đặt ra giới hạn trên cho độ chính xác chẩn đoán, đó là lý do tại sao việc chuẩn bị mẫu vật là không thể thiếu đối với cách tế bào học đóng góp vào sàng lọc và chẩn đoán. Lĩnh vực này mô tả cách tạo ra vật liệu tế bào học đáng tin cậy và được dùng làm nền tảng để hiểu thực hành phòng thí nghiệm; nó không phải là cơ sở cho các quyết định lâm sàng cá nhân.
Evidence & guidelines
Bằng chứng so sánh về các phương pháp chuẩn bị được phát triển nhiều nhất trong sàng lọc cổ tử cung, nơi đánh giá hệ thống cho thấy tế bào học dựa trên chất lỏng và tế bào học thông thường có độ chính xác tương tự nhau, trong khi xử lý dựa trên chất lỏng làm giảm các mẫu không đạt yêu cầu (Arbyn 2008; Siebers 2012, được trích dẫn trong mục tế bào học dựa trên chất lỏng). Các khuôn khổ báo cáo như Hệ thống Bethesda kết hợp các tiêu chí đầy đủ mẫu vật rõ ràng phụ thuộc trực tiếp vào chất lượng chuẩn bị (Solomon 2002, được trích dẫn trong các mục chủ đề liên quan).
History
Chuẩn bị tế bào học hiện đại phát triển từ sự phát triển của George Papanicolaou vào đầu thế kỷ 20 về một loại thuốc nhuộm đa sắc cho các phết cố định, giúp sàng lọc cổ tử cung trên quy mô dân số trở nên khả thi. Phết trực tiếp và cố định bằng cồn đã thống trị thực hành trong nhiều thập kỷ; từ những năm 1990, các phương pháp dựa trên chất lỏng đã giới thiệu chuẩn bị đơn lớp tiêu chuẩn hóa, và lĩnh vực này tiếp tục tích hợp xét nghiệm phân tử và phụ trợ vào vật liệu mẫu còn lại (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014).
Key figures
- George Papanicolaou
- Leopold Koss
Related topics
Seminal works
- papanicolaou-1942
- arbyn-2008
- koss-melamed-2006
Frequently asked questions
- Sự khác biệt giữa thu thập mẫu vật và chuẩn bị mẫu vật trong tế bào học là gì?
- Thu thập là lấy mẫu tế bào từ bệnh nhân; chuẩn bị là quá trình xử lý trong phòng thí nghiệm – chuyển sang lam kính hoặc chất lỏng, cố định và nhuộm – biến mẫu đó thành một lam kính hiển vi có thể đọc được. Cả hai đều là một phần của giai đoạn tiền phân tích chi phối chất lượng mẫu vật.
- Tại sao mẫu tế bào học cần được cố định hoặc làm khô trong không khí trước khi nhuộm?
- Cố định hoặc làm khô trong không khí có kiểm soát giúp bảo tồn cấu trúc tế bào và chuẩn bị tế bào để hấp thụ thuốc nhuộm một cách có thể tái lập. Cố định ướt hỗ trợ các loại thuốc nhuộm chi tiết hạt nhân như nhuộm Papanicolaou, trong khi làm khô trong không khí có chủ đích là bước chuẩn bị cho nhuộm Romanowsky.