Các Tiêu Bản Khô Khí và Nhuộm Romanowsky

Các tiêu bản khô khí là các phết tế bào học được cố ý để khô trong không khí thay vì cố định ướt, và chúng được nhuộm bằng họ thuốc nhuộm Romanowsky (chẳng hạn như May-Grunwald-Giemsa hoặc Diff-Quik nhanh). Phương pháp này, kế thừa từ huyết học, làm dẹt và phóng đại các tế bào, đồng thời làm nổi bật các hạt bào tương, vật liệu tiết và nền mô đệm – những đặc điểm bổ sung cho chi tiết nhân của phương pháp nhuộm Papanicolaou cố định ướt. Nó đặc biệt có giá trị trong tế bào học chọc hút kim nhỏ.

Definition

Các tiêu bản khô khí là các phết tế bào học được làm khô trong không khí trước khi nhuộm và được xử lý bằng các loại thuốc nhuộm Romanowsky – hỗn hợp thuốc nhuộm azure (kiềm) và eosin (acid) – để làm nổi bật các đặc điểm bào tương, tiết và nền cho việc diễn giải dưới kính hiển vi.

Scope

Mục này bao gồm bước làm khô khí, hóa học và hình thái của thuốc nhuộm Romanowsky, và cách chuẩn bị này bổ sung cho vật liệu Papanicolaou cố định ướt trong tế bào học chọc hút. Đây là tài liệu tham khảo về phương pháp và không cung cấp hướng dẫn cụ thể cho bệnh nhân.

Key concepts

• Cố ý làm khô khí thay vì cố định ướt
• Thuốc nhuộm Romanowsky: hỗn hợp thuốc nhuộm azure-eosin
• Các biến thể May-Grunwald-Giemsa và Diff-Quik nhanh
• Tính dị sắc của mô đệm và vật liệu tiết
• Tế bào dẹt và phóng đại rõ rệt
• Tính bổ sung với thuốc nhuộm Papanicolaou
• Phù hợp cho chọc hút kim nhỏ và đánh giá tại chỗ

Mechanisms

Khi một phết tế bào được để khô, các tế bào dẹt ra trên lam kính và trải rộng, xuất hiện lớn hơn so với các tế bào được cố định ướt; việc làm khô tự nó đóng vai trò là bước chuẩn bị cho việc nhuộm Romanowsky. Thuốc nhuộm Romanowsky kết hợp thuốc nhuộm azure kiềm, liên kết với các cấu trúc acid như acid nucleic và hạt, với eosin acid, liên kết với các protein bào tương kiềm. Sự tương tác của chúng tạo ra phổ màu đặc trưng – chất nhiễm sắc màu tím-xanh, bào tương màu hồng-đỏ, và sự bắt màu dị sắc của mô đệm, chất nhầy và các hạt tiết – làm cho vật liệu nền và bào tương trở nên dễ nhận thấy. Các nghiên cứu tiêu chuẩn hóa đã xác định hỗn hợp azure B-eosin Y được xác định là thuốc nhuộm Romanowsky-Giemsa tham chiếu để giảm sự thay đổi giữa các công thức (Wittekind 1982). Các phiên bản nhanh như Diff-Quik cho phép một phết tế bào được nhuộm và đọc trong vòng vài phút, hỗ trợ đánh giá nhanh tại chỗ về tính đầy đủ của mẫu chọc hút (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014).

Clinical relevance

Các tiêu bản Romanowsky khô khí là một bổ sung thường quy cho các lam kính nhuộm Papanicolaou trong chọc hút kim nhỏ, nơi chúng giúp mô tả đặc điểm bào tương, sản phẩm tiết và nền, đồng thời cho phép đánh giá nhanh tại chỗ. Mục này mô tả phương pháp và những gì nó tiết lộ làm nền tảng để hiểu thực hành tế bào học; nó không phải là cơ sở cho các quyết định lâm sàng cá nhân.

Evidence & guidelines

Các tài liệu tế bào học tham khảo trình bày các phương pháp Romanowsky khô khí và Papanicolaou cố định ướt như những phương pháp bổ sung có chủ đích, với nhiều quy trình chọc hút chuẩn bị cả hai để các đặc điểm bào tương và nền cũng như chi tiết nhân đều được hiển thị rõ ràng (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014). Tài liệu hóa học định nghĩa các hỗn hợp thuốc nhuộm Romanowsky tiêu chuẩn hóa để làm cho thuốc nhuộm có thể tái tạo giữa các phòng thí nghiệm (Wittekind 1982).

History

Các loại thuốc nhuộm Romanowsky xuất hiện vào cuối thế kỷ XIX trong huyết học và kính hiển vi sốt rét từ việc phát hiện ra rằng xanh methylene đã cũ hoặc đa sắc kết hợp với eosin tạo ra các màu mới (hiệu ứng Romanowsky), sau đó được Giemsa và những người khác tinh chỉnh. Tế bào bệnh học đã áp dụng các thuốc nhuộm này cho các phết tế bào khô khí như một bổ sung cho thuốc nhuộm Papanicolaou cố định ướt, và công trình tiêu chuẩn hóa thế kỷ XX đã tìm kiếm các công thức thuốc nhuộm có thể tái tạo (Wittekind 1982; Koss & Melamed 2006).

Key figures

• Dmitri Romanowsky
• Gustav Giemsa
• Dietrich Wittekind

Seminal works

• wittekind-1982
• koss-melamed-2006

Frequently asked questions

Tại sao một số phết tế bào học được làm khô khí thay vì cố định ướt?

Làm khô khí là trạng thái chuẩn bị cần thiết cho thuốc nhuộm Romanowsky, làm nổi bật các hạt bào tương, vật liệu tiết và nền mô đệm. Những đặc điểm này bổ sung cho chi tiết nhân được thấy trên các lam kính Papanicolaou cố định ướt, vì vậy cả hai thường được chuẩn bị từ cùng một mẫu chọc hút.

Mối quan hệ giữa thuốc nhuộm Romanowsky và Diff-Quik là gì?

Diff-Quik là một loại thuốc nhuộm Romanowsky thương mại nhanh. Giống như các thuốc nhuộm Romanowsky khác, nó sử dụng thuốc nhuộm azure và eosin trên các phết tế bào khô khí, nhưng nó được pha chế để nhanh chóng, cho phép một lam kính được nhuộm và đọc trong vòng vài phút để đánh giá tại chỗ.