Nhuộm Papanicolaou
Nhuộm Papanicolaou là kỹ thuật nhuộm đa sắc tiêu chuẩn trong tế bào bệnh học, được George Papanicolaou phát triển cho các tiêu bản tế bào cố định ướt. Kỹ thuật này kết hợp một thuốc nhuộm nhân với một số thuốc nhuộm đối màu bào tương để tạo ra các tế bào trong suốt, đa màu sắc, trong đó cả chất nhiễm sắc nhân và sự trưởng thành của bào tương đều có thể nhìn thấy rõ ràng. Độ rõ nét của nó đối với chi tiết nhân đã trở thành nền tảng của sàng lọc cổ tử cung và tế bào học bong tróc nói chung.
Definition
Nhuộm Papanicolaou là một kỹ thuật nhuộm tế bào học đa sắc được áp dụng cho các tiêu bản cố định bằng cồn (cố định ướt), sử dụng thuốc nhuộm nhân haematoxylin cùng với thuốc nhuộm đối màu bào tương màu cam và đa sắc để tạo ra các tế bào trong suốt với chất nhiễm sắc nhân chi tiết.
Scope
Mục này bao gồm thành phần và cơ sở lý luận của nhuộm Papanicolaou, việc cố định ướt mà nó yêu cầu, các đặc điểm tế bào mà nó bộc lộ, và vị trí của nó trong báo cáo tế bào học. Đây là một tài liệu tham khảo về phương pháp và không đưa ra hướng dẫn chẩn đoán hoặc điều trị.
Key concepts
- Yêu cầu cố định ướt (cồn)
- Nhuộm nhân bằng Haematoxylin
- Nhuộm đối màu bào tương bằng OG-6 và EA
- Độ trong suốt của bào tương và khả năng đọc các tế bào chồng lên nhau
- Hiển thị sự trưởng thành của tế bào vảy
- Chi tiết chất nhiễm sắc nhân để đánh giá mức độ ác tính
Mechanisms
Thuốc nhuộm được áp dụng cho một tiêu bản đã được cố định khi còn ẩm, giúp bảo tồn cấu trúc chất nhiễm sắc. Haematoxylin, một thuốc nhuộm nhân cơ bản, liên kết với chất nhiễm sắc có tính axit để làm cho nhân có màu xanh-tím với các chi tiết bên trong tinh tế. Bào tương sau đó được nhuộm đối màu theo hai bước: thuốc nhuộm màu cam (orange G) đánh dấu bào tương vảy sừng hóa, và hỗn hợp eosin-azure đa sắc nhuộm các bào tương khác với các sắc thái xanh lá cây, xanh dương và hồng khác nhau. Vì các thuốc nhuộm được sử dụng ở nồng độ giữ cho bào tương bán trong suốt, các tế bào chồng lên nhau và các nhóm tế bào vẫn có thể được đọc - một đặc tính thiết yếu cho các tiêu bản dày. Các gradient màu cũng hiển thị sự trưởng thành của tế bào vảy, giúp phân biệt tế bào bề mặt với tế bào trung gian và cận đáy (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).
Clinical relevance
Nhuộm Papanicolaou là kỹ thuật nhuộm mà sàng lọc tế bào học cổ tử cung và phần lớn tế bào học chẩn đoán dựa vào, và các đặc điểm mà nó bộc lộ là cơ sở của các loại báo cáo tiêu chuẩn hóa. Mục này mô tả kỹ thuật nhuộm và những gì nó thể hiện như một nền tảng để hiểu tế bào học; nó không phải là cơ sở cho các quyết định lâm sàng cá nhân.
Evidence & guidelines
Các khung báo cáo tế bào học tiêu chuẩn hóa được xây dựng dựa trên các đặc điểm tế bào và nhân mà nhuộm Papanicolaou làm cho có thể nhìn thấy; ví dụ, Hệ thống Bethesda cho tế bào học cổ tử cung định nghĩa các loại diễn giải và tiêu chí đầy đủ của nó trên vật liệu nhuộm Papanicolaou (Solomon 2002). Các văn bản tham khảo coi kỹ thuật nhuộm này là phương pháp tham chiếu cho tế bào học chi tiết nhân, bổ sung cho các kỹ thuật nhuộm Romanowsky khô không khí (Bibbo & Wilbur 2014).
History
George Papanicolaou đã mô tả quy trình nhuộm của mình cho các tiêu bản âm đạo vào năm 1942, dựa trên các kỹ thuật nhuộm mô học trước đó nhưng tối ưu hóa cân bằng màu sắc và độ trong suốt cho các tế bào bong tróc. Kỹ thuật nhuộm này đã làm nền tảng cho xét nghiệm sàng lọc cổ tử cung mang tên ông và sau đó được điều chỉnh, với các công thức sửa đổi, cho tế bào học của hầu hết mọi vị trí (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006).
Key figures
- George Papanicolaou
Related topics
Seminal works
- papanicolaou-1942
- solomon-2002
Frequently asked questions
- Tại sao nhuộm Papanicolaou yêu cầu tiêu bản cố định ướt?
- Cố định ướt (cồn) bảo tồn chất nhiễm sắc nhân tinh tế mà thành phần haematoxylin được thiết kế để hiển thị. Một tiêu bản khô không khí sẽ mất đi chi tiết này, vì vậy nhuộm Papanicolaou được dành riêng cho các tiêu bản được cố định ướt kịp thời.
- Điều gì làm cho nhuộm Papanicolaou đặc biệt hữu ích cho tế bào học?
- Các thuốc nhuộm đối màu đa dạng của nó giữ cho bào tương trong suốt, do đó các tế bào chồng lên nhau trong một tiêu bản vẫn có thể được đọc, và nó cho thấy cả chất nhiễm sắc nhân chi tiết và sự trưởng thành của tế bào vảy - những đặc điểm trung tâm cho việc diễn giải tế bào học.