Xét nghiệm kháng globulin trực tiếp và gián tiếp (Coombs)

Xét nghiệm kháng globulin, thường được gọi là xét nghiệm Coombs, sử dụng thuốc thử kháng globulin người để phát hiện immunoglobulin hoặc bổ thể gắn vào hồng cầu. Dạng trực tiếp của xét nghiệm này cho thấy kháng thể đã bao phủ hồng cầu của bệnh nhân in vivo, trong khi dạng gián tiếp phát hiện kháng thể trong huyết tương gắn với hồng cầu thuốc thử in vitro; cùng với nhau, chúng là những công cụ trung tâm của miễn dịch huyết học.

Definition

Xét nghiệm kháng globulin (Coombs) phát hiện immunoglobulin hoặc các thành phần bổ thể của người trên hồng cầu bằng cách sử dụng thuốc thử kháng globulin người, thuốc thử này liên kết chéo các tế bào được bao phủ thành các cụm ngưng kết có thể nhìn thấy; xét nghiệm trực tiếp kiểm tra hồng cầu của chính bệnh nhân, và xét nghiệm gián tiếp kiểm tra hồng cầu thuốc thử sau khi ủ với huyết tương của bệnh nhân.

Scope

Chủ đề này giải thích nguyên lý của phản ứng kháng globulin và sự khác biệt giữa xét nghiệm kháng globulin trực tiếp (DAT) và xét nghiệm kháng globulin gián tiếp (IAT), cũng như vị trí của mỗi xét nghiệm trong quy trình huyết thanh học. Nó mô tả phương pháp xét nghiệm và cách diễn giải theo khái niệm, không phải là một quy trình để chẩn đoán hoặc quản lý bệnh nhân cụ thể.

Core questions

• Thuốc thử kháng globulin người làm cho các tế bào được bao phủ kháng thể ngưng kết như thế nào?
• Điều gì phân biệt xét nghiệm kháng globulin trực tiếp với xét nghiệm kháng globulin gián tiếp?
• Kết quả xét nghiệm kháng globulin trực tiếp dương tính cho thấy điều gì?
• Xét nghiệm kháng globulin gián tiếp được sử dụng như thế nào trong phát hiện kháng thể và phản ứng chéo?

Key concepts

• Thuốc thử kháng globulin người (AHG)
• Kháng thể không hoàn chỉnh (IgG)
• Xét nghiệm kháng globulin trực tiếp (DAT)
• Xét nghiệm kháng globulin gián tiếp (IAT)
• Sự nhạy cảm in vivo so với in vitro
• Thuốc thử đa đặc hiệu và đơn đặc hiệu (IgG, C3)
• Ngưng kết là kết quả đọc

Mechanisms

Nhiều kháng thể hồng cầu quan trọng về mặt lâm sàng là IgG và không trực tiếp ngưng kết các tế bào dương tính với kháng nguyên trong dung dịch muối vì các phân tử quá nhỏ để bắc cầu giữa các tế bào bị đẩy lùi bởi điện tích bề mặt của chúng. Thuốc thử kháng globulin người, được tạo ra để chống lại IgG và bổ thể của người, liên kết các phân tử bao phủ này và bắc cầu giữa các tế bào nhạy cảm liền kề, tạo ra sự ngưng kết có thể nhìn thấy. Trong xét nghiệm trực tiếp, hồng cầu đã rửa của bệnh nhân được trộn với thuốc thử để phát hiện kháng thể hoặc bổ thể đã gắn in vivo, như xảy ra trong các phản ứng truyền máu tan máu, bệnh tan máu ở trẻ sơ sinh và thiếu máu tan máu tự miễn. Trong xét nghiệm gián tiếp, huyết tương được ủ trước với hồng cầu thuốc thử để bất kỳ kháng thể nào cũng gắn in vitro, sau đó thuốc thử kháng globulin được thêm vào; điều này là cơ sở cho sàng lọc kháng thể, xác định kháng thể và phản ứng chéo kháng globulin.

Clinical relevance

Xét nghiệm kháng globulin hỗ trợ điều tra trong phòng thí nghiệm về tan máu và lựa chọn an toàn các thành phần máu. Mục này mô tả cách xét nghiệm hoạt động và ý nghĩa của kết quả dương tính và âm tính về nguyên tắc; việc diễn giải bất kỳ kết quả riêng lẻ nào thuộc về bối cảnh lâm sàng và phòng thí nghiệm và không được đề cập ở đây như một hướng dẫn.

Evidence & guidelines

Kỹ thuật kháng globulin và các biến thể của nó được mô tả trong các tài liệu tham khảo miễn dịch huyết học tiêu chuẩn như Sổ tay Kỹ thuật AABB và Sách Mollison's Blood Transfusion in Clinical Medicine, trong đó đưa ra phương pháp và cách diễn giải theo sự đồng thuận.

History

Coombs, Mourant và Race đã giới thiệu xét nghiệm kháng globulin vào năm 1945 để phát hiện các kháng thể Rh yếu và không hoàn chỉnh mà xét nghiệm ngưng kết dung dịch muối thông thường đã bỏ sót. Kỹ thuật này đã thay đổi miễn dịch huyết học bằng cách làm cho sự nhạy cảm của IgG trở nên rõ ràng, và nó vẫn là cơ sở của sàng lọc kháng thể, xác định kháng thể, phản ứng chéo và điều tra tan máu miễn dịch.

Key figures

• Robert Coombs
• Arthur Mourant
• Robert Race

Seminal works

• coombs-1945
• mollison-2014
• daniels-2013

Frequently asked questions

Sự khác biệt giữa xét nghiệm Coombs trực tiếp và gián tiếp là gì?

Xét nghiệm trực tiếp phát hiện kháng thể hoặc bổ thể đã gắn vào hồng cầu của bệnh nhân trong cơ thể; xét nghiệm gián tiếp phát hiện kháng thể trong huyết tương bằng cách gắn nó vào hồng cầu thuốc thử trong ống nghiệm trước khi thêm thuốc thử kháng globulin.

Điều gì có thể gây ra kết quả xét nghiệm kháng globulin trực tiếp dương tính?

Kết quả xét nghiệm kháng globulin trực tiếp dương tính cho thấy hồng cầu được bao phủ bởi immunoglobulin hoặc bổ thể, điều này có thể xảy ra trong thiếu máu tan máu tự miễn, bệnh tan máu ở trẻ sơ sinh và các phản ứng truyền máu tan máu, cùng với các trường hợp khác.