Hóa tế bào và Tế bào dòng chảy trong bệnh bạch cầu

Hóa tế bào và tế bào dòng chảy là các kỹ thuật xét nghiệm biến chẩn đoán bệnh bạch cầu từ một ấn tượng hình thái thành một dòng tế bào và kiểu hình miễn dịch xác định. Các vết nhuộm hóa tế bào cho thấy các đặc tính enzyme và chuyển hóa của tế bào bạch cầu, trong khi tế bào dòng chảy đa thông số đo nhiều dấu hiệu bề mặt và nội bào cùng lúc, cùng nhau xác định dòng tế bào và phát hiện bệnh tồn dư có thể đo lường được.

Definition

Hóa tế bào và tế bào dòng chảy là các phương pháp xét nghiệm để mô tả đặc điểm tế bào bạch cầu: hóa tế bào sử dụng các vết nhuộm cho thấy các đặc điểm enzyme hoặc sinh hóa (ví dụ hoạt tính myeloperoxidase), và tế bào dòng chảy đa thông số đo nhiều kháng nguyên bề mặt và nội bào trên mỗi tế bào để xác định dòng tế bào, định nghĩa kiểu hình miễn dịch và định lượng bệnh tồn dư.

Scope

Chủ đề này bao gồm các phương pháp được sử dụng để mô tả đặc điểm tế bào bạch cầu ngoài hình thái học: các vết nhuộm hóa tế bào cổ điển như myeloperoxidase, và phương pháp miễn dịch kiểu hình tế bào dòng chảy đa thông số hiện đại, bao gồm các bảng kháng thể tiêu chuẩn hóa và phát hiện bệnh tồn dư có thể đo lường được (tối thiểu). Đây là tài liệu tham khảo về phương pháp luận xét nghiệm, không phải là một phác đồ lâm sàng.

Key concepts

• Myeloperoxidase và các vết nhuộm hóa tế bào khác
• Xác định dòng tế bào bằng kiểu hình miễn dịch
• Tế bào dòng chảy đa thông số (đa màu)
• Các bảng kháng thể tiêu chuẩn hóa
• Biểu hiện kháng nguyên bất thường
• Phân cổng và phân tích quần thể
• Phát hiện bệnh tồn dư có thể đo lường được (tối thiểu)

Mechanisms

Các vết nhuộm hóa tế bào khai thác các enzyme và thành phần đặc hiệu của tế bào: ví dụ, hoạt tính myeloperoxidase đánh dấu dòng tủy và giúp phân biệt bệnh bạch cầu tủy cấp tính với bệnh bạch cầu lympho cấp tính trên một tiêu bản nhuộm. Tế bào dòng chảy đình chỉ các tế bào trong một dòng chảy đi qua các tia laser và ghi lại sự tán xạ ánh sáng và huỳnh quang từ các dấu hiệu gắn kháng thể, cho phép đo nhiều kháng nguyên trên mỗi tế bào; các kết hợp kháng nguyên đặc trưng và bất thường xác định dòng tế bào và nhận dạng quần thể bạch cầu. Cách tiếp cận tương tự, được áp dụng với độ nhạy cao với các bảng tiêu chuẩn hóa, phát hiện các quần thể bạch cầu tồn dư nhỏ sau điều trị dưới dạng bệnh tồn dư có thể đo lường được (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018).

Clinical relevance

Các kỹ thuật này củng cố việc xác định dòng tế bào và kiểu hình miễn dịch mà phân loại bệnh bạch cầu hiện đại phụ thuộc vào, và đánh giá bệnh tồn dư có thể đo lường bằng tế bào dòng chảy đã trở thành một dấu hiệu đáp ứng quan trọng trong y văn. Mục này mô tả các phương pháp ở cấp độ tham khảo và không phải là hướng dẫn để diễn giải kết quả của từng bệnh nhân.

Evidence & guidelines

Các nỗ lực tiêu chuẩn hóa như các bảng kháng thể EuroFlow định nghĩa kiểu hình miễn dịch tế bào dòng chảy có thể tái tạo, và Nhóm công tác MRD của Mạng lưới bệnh bạch cầu châu Âu cung cấp các tiêu chí đồng thuận để đánh giá bệnh tồn dư có thể đo lường được trong bệnh bạch cầu tủy cấp tính; các tiêu chí dòng tế bào cũng được tích hợp trong phân loại của WHO (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018; Arber et al., 2016).

History

Nhuộm hóa tế bào là phương tiện ban đầu để tinh chỉnh chẩn đoán hình thái bệnh bạch cầu cấp tính và xác định dòng tế bào. Miễn dịch kiểu hình tế bào dòng chảy sau đó phần lớn thay thế hóa tế bào để xác định dòng tế bào bằng cách đo nhiều kháng nguyên trên mỗi tế bào, và các sáng kiến tiêu chuẩn hóa và các tài liệu đồng thuận về bệnh tồn dư có thể đo lường được sau đó đã mở rộng vai trò của nó thành đánh giá có thể tái tạo, độ nhạy cao (van Dongen et al., 2012; Schuurhuis et al., 2018).

Seminal works

• van-dongen-2012
• schuurhuis-2018

Frequently asked questions

Tại sao nhuộm myeloperoxidase hữu ích trong bệnh bạch cầu cấp tính?

Myeloperoxidase là một dấu hiệu của dòng tủy, vì vậy sự hiện diện của nó trên một vết nhuộm hóa tế bào hỗ trợ chẩn đoán bệnh bạch cầu tủy cấp tính và giúp phân biệt nó với bệnh bạch cầu lympho cấp tính.

Phát hiện bệnh tồn dư có thể đo lường được bằng tế bào dòng chảy là gì?

Đó là việc sử dụng tế bào dòng chảy đa thông số có độ nhạy cao để phát hiện các quần thể tế bào bạch cầu nhỏ còn sót lại sau điều trị, dưới mức có thể nhìn thấy bằng hình thái học thông thường, như một dấu hiệu của sự đáp ứng.