Thử nghiệm độ nhạy cảm của kháng sinh

Thử nghiệm độ nhạy cảm của kháng sinh là tập hợp các phương pháp xét nghiệm trong phòng thí nghiệm để đo lường liệu một chủng vi khuẩn có bị ức chế bởi một loại thuốc kháng khuẩn nhất định và ở nồng độ nào. Kết quả chính của nó là nồng độ ức chế tối thiểu (MIC) hoặc một phép đo vùng tương đương, được so sánh với các điểm cắt chuẩn hóa để phân loại chủng là nhạy cảm, trung gian (hoặc nhạy cảm phụ thuộc liều), hoặc kháng thuốc.

Definition

Thử nghiệm độ nhạy cảm của kháng sinh là việc xác định in vitro phản ứng của một chủng vi khuẩn đối với các tác nhân kháng khuẩn, được định lượng bằng nồng độ ức chế tối thiểu hoặc đường kính vùng ức chế và được diễn giải dựa trên các điểm cắt xác định để gán một danh mục độ nhạy cảm.

Scope

Mục này bao gồm các phương pháp thử nghiệm chính (pha loãng trong canh thang và thạch, khuếch tán đĩa, dải gradient và hệ thống tự động), khái niệm nồng độ ức chế tối thiểu, và cách các điểm cắt diễn giải từ các cơ quan tiêu chuẩn chuyển đổi một phép đo thành một danh mục. Đây là một chủ đề tham khảo và giáo dục về phương pháp luận và không cung cấp hướng dẫn lựa chọn điều trị hoặc liều lượng.

Core questions

• Nồng độ ức chế tối thiểu là gì và nó được đo như thế nào?
• Các phương pháp pha loãng, khuếch tán đĩa, gradient và tự động khác nhau như thế nào?
• Các điểm cắt chuyển đổi một phép đo thành nhạy cảm, trung gian hoặc kháng thuốc như thế nào?
• Các tổ chức tiêu chuẩn như CLSI và EUCAST đóng vai trò gì?

Key concepts

• Nồng độ ức chế tối thiểu (MIC)
• Pha loãng trong canh thang và trên thạch
• Khuếch tán đĩa (Kirby-Bauer)
• Khuếch tán gradient (dải thử nghiệm MIC)
• Hệ thống độ nhạy cảm tự động
• Điểm cắt diễn giải
• Các danh mục nhạy cảm / trung gian / kháng thuốc
• Tiêu chuẩn và quy tắc chuyên gia của CLSI và EUCAST

Mechanisms

Thử nghiệm độ nhạy cảm cho phép một lượng cấy chuẩn hóa của chủng vi khuẩn tiếp xúc với các nồng độ kháng sinh xác định. Các phương pháp pha loãng tham chiếu (pha loãng vi lượng trong canh thang, pha loãng trên thạch) xác định trực tiếp nồng độ ức chế tối thiểu là nồng độ thấp nhất ngăn chặn sự phát triển có thể nhìn thấy. Khuếch tán đĩa đặt các đĩa tẩm kháng sinh lên thạch đã cấy và đo vùng ức chế phát triển, tương quan với MIC; dải gradient đọc MIC tại nơi elip ức chế cắt một thang đo đã hiệu chuẩn; và các thiết bị tự động thu được kết quả từ việc phát hiện sự phát triển theo thời gian (Jorgensen & Ferraro, 2009). Phép đo thô sau đó được diễn giải dựa trên các điểm cắt — nồng độ phân tách nhạy cảm với kháng thuốc — được thiết lập bởi các tổ chức tiêu chuẩn như CLSI và EUCAST, với các quy tắc chuyên gia cũng gắn cờ các kết quả không phù hợp với các cơ chế kháng thuốc đã biết (Leclercq et al., 2013; Blair et al., 2015).

Clinical relevance

Thử nghiệm độ nhạy cảm kết nối phòng thí nghiệm vi sinh với việc ra quyết định lâm sàng bằng cách báo cáo, đối với một chủng vi khuẩn, những tác nhân nào có khả năng hoạt động. Các phân loại danh mục và điểm cắt được mô tả ở đây là nền tảng cho việc báo cáo đó và cung cấp thông tin cho quản lý và giám sát. Mục này giải thích các phương pháp để định hướng và nghiên cứu; nó không phải là cơ sở để lựa chọn hoặc định liều điều trị.

Epidemiology

Các kết quả độ nhạy cảm tổng hợp tạo thành kháng sinh đồ và cung cấp dữ liệu cho các hệ thống giám sát kháng thuốc, và việc hài hòa các điểm cắt và quy tắc chuyên gia của CLSI và EUCAST là điều làm cho các kết quả có thể so sánh được giữa các phòng thí nghiệm và theo thời gian (Jorgensen & Ferraro, 2009; Leclercq et al., 2013).

History

Thử nghiệm độ nhạy cảm chuẩn hóa được củng cố vào những năm 1960, khi phương pháp khuếch tán đĩa Kirby-Bauer thiết lập các quy trình và tiêu chí diễn giải có thể tái lập. Các thập kỷ tiếp theo đã mang lại các bảng pha loãng thương mại, phương pháp dải gradient và các thiết bị tự động, cùng với việc chính thức hóa các điểm cắt và quy tắc chuyên gia của CLSI và EUCAST (Jorgensen & Ferraro, 2009; Leclercq et al., 2013).

Debates

Các điểm cắt nên được thiết lập và hài hòa như thế nào?

Các điểm cắt xác định ranh giới nhạy cảm-kháng thuốc và khác nhau ở một số nơi giữa các hệ thống tiêu chuẩn như CLSI và EUCAST; việc suy ra chúng từ dữ liệu dược động học-dược lực học, phân bố MIC và cơ chế kháng thuốc là một lĩnh vực liên tục được tinh chỉnh về phương pháp luận.

Key figures

• James H. Jorgensen
• Mary Jane Ferraro
• Roland Leclercq

Seminal works

• jorgensen-ferraro-2009
• leclercq-2013

Frequently asked questions

Nồng độ ức chế tối thiểu có nghĩa là gì?

MIC là nồng độ kháng sinh thấp nhất ngăn chặn sự phát triển vi khuẩn có thể nhìn thấy in vitro; đây là kết quả định lượng cốt lõi của thử nghiệm độ nhạy cảm và được diễn giải dựa trên các điểm cắt.

Các thuật ngữ 'nhạy cảm', 'trung gian' và 'kháng thuốc' trên một báo cáo có nghĩa là gì?

Chúng là các danh mục diễn giải được gán bằng cách so sánh MIC đo được hoặc vùng ức chế với các điểm cắt chuẩn hóa, cho biết liệu chủng vi khuẩn có khả năng bị ức chế bởi, có phản ứng không chắc chắn với, hoặc không bị ức chế bởi thuốc trong điều kiện tiêu chuẩn.