Sitolojik Örneklerde Moleküler Testler ve HPV Tespiti
Sitolojik örneklerde moleküler testler, eksfoliasyon veya aspirasyon yoluyla elde edilen hücrelere nükleik asit bazlı testleri uygulamakta, enfeksiyonu, mutasyonları veya diğer klinik olarak önemli değişiklikleri ortaya koyan DNA veya RNA hedeflerini tespit etmektedir. Servikal sitoloji örneklerinde yüksek riskli insan papillomavirüsü (HPV) tespiti en yaygın örneği teşkil etmekte, ince iğne aspiratlarının dizilenmesi ise moleküler tanıyı solid tümörlere kadar genişletmektedir.
Tanım
Sitolojik örneklerde moleküler testler, eksfolyatif veya aspirasyon sitolojisi ile elde edilen hücrelere veya bunların sıvı bazlı artık materyallerine nükleik asit bazlı testlerin —viral nükleik asit tespiti ve tümör mutasyon profillemesi dahil— uygulanmasıdır.
Kapsam
Bu madde, nükleik asit kaynağı olarak sitolojik ve sıvı bazlı artık materyalin kullanımını, servikal taramada HPV tespitini ve aspiratlarda yeni nesil dizileme gibi daha geniş moleküler testleri kapsamaktadır. Bu, metodolojik ve referans niteliğinde bir genel bakış olup, tarama protokolleri veya tedavi rehberliği sağlamamaktadır.
Temel sorular
- Hangi pre-analitik faktörler, sitolojik materyalin test için yeterli nükleik asit sağlayıp sağlamadığını belirlemektedir?
- Yüksek riskli HPV tespiti, taramada morfolojik servikal sitolojiyi nasıl tamamlamaktadır?
- İnce iğne aspiratı ve artık sitoloji materyali üzerinde hangi moleküler testler yapılabilmektedir?
Anahtar kavramlar
- Sitolojik materyalden nükleik asit ekstraksiyonu
- Yüksek riskli HPV tespiti
- Moleküler substrat olarak sıvı bazlı sitoloji
- Refleks ve ko-test stratejileri
- Aspiratlarda yeni nesil dizileme
- Moleküler testler için örnek yeterliliği
Mekanizmalar
Sitolojik örnekler, özellikle sıvı bazlı preparatlar, DNA ve RNA'nın ekstrakte edilebileceği hücreleri ve artık sıvıyı muhafaza etmektedir; bu nükleik asitler daha sonra amplifikasyon, hibridizasyon veya dizileme testleri ile incelenmektedir. Servikal uygulamalarda, testler, kalıcı enfeksiyonu servikal karsinogenezin temelini oluşturan yüksek riskli HPV tiplerinin DNA veya RNA'sını tespit etmekte, bu tür testler morfolojik sitoloji ile birleştirilebilmekte veya onun yerine kullanılabilmektedir. Solid tümör sitolojisinde, ince iğne aspirat materyali, tanısal veya terapötik olarak ilgili değişiklikleri belirlemek için hedefe yönelik veya yeni nesil dizileme için yeterli nükleik asit sağlayabilmektedir.
Klinik önem
Moleküler testler, sitolojik bir örneği sınıflandırma, risk sınıflandırması ve biyobelirteç raporlamasında kullanılan genomik ve viral bilgi kaynağına dönüştürmektedir; özellikle HPV tespiti, servikal tarama paradigmalarını yeniden şekillendirmiştir. Bu madde, bu tür testlerin nasıl yapıldığını açıklamaktadır; belirli tarama algoritmaları ve biyobelirteç tabanlı kararlar klinik konular olup, burada kişiselleştirilmiş tavsiye niteliği taşımamaktadır.
Epidemiyoloji
Yüksek riskli HPV tipleri ile kalıcı enfeksiyon, neredeyse tüm serviks kanserlerinin gerekli nedenidir; bu da servikal sitoloji örneklerinde viral nükleik asit tespitini biyolojik olarak temellendirilmiş bir tarama hedefi haline getirmektedir (Schiffman et al., 2007).
Kanıt ve kılavuzlar
ATHENA çalışmasından elde edilen çalışma sonu sonuçları da dahil olmak üzere randomize tarama kanıtları, primer HPV testini sitoloji tabanlı yaklaşımlarla karşılaştırarak birinci basamak servikal tarama stratejisi olarak değerlendirmiştir (Wright et al., 2015). Solid tümörler için yapılan çalışmalar, moleküler tanı elde etmek amacıyla ince iğne aspirat sitoloji örneklerinde yeni nesil dizileme yapılabileceğini göstermiştir (Qiu et al., 2015).
Tarihçe
Yüksek riskli HPV'nin serviks kanserinin gerekli nedeni olduğunun keşfedilmesi, servikal sitolojiyi, tamamen morfolojik bir taramadan moleküler ko-test ve daha sonra primer HPV taraması için bir ortama dönüştürmüştür. Buna paralel olarak, hedefe yönelik kanser tedavisinin gelişimi, moleküler ve dizileme testlerinin ince iğne aspirasyonu ile elde edilen küçük örneklere uyarlanmasını sağlamıştır.
Tartışmalar
- Primer HPV testi, sitoloji tabanlı servikal taramanın yerini almalı mıdır?
- ATHENA gibi çalışmalar, primer HPV testini birinci basamak tarama olarak desteklemektedir, ancak HPV testi, sitoloji ve triyajın optimal kombinasyonu tartışılmaya devam etmekte ve tarama programlarına göre değişiklik göstermektedir.
İlgili konular
Temel eserler
- schiffman-2007
- wright-2015
Sıkça sorulan sorular
- Moleküler testler, sitoloji için kullanılan aynı örnek üzerinde yapılabilir mi?
- Çoğunlukla evet; sıvı bazlı sitoloji preparatları, nükleik asitlerin ekstrakte edilebileceği artık hücreleri ve sıvıyı muhafaza ederek, aynı örnek üzerinde HPV tespiti veya diğer moleküler testlerin yapılmasına olanak tanımaktadır.
- HPV testi neden serviks kanseri taramasında kullanılmaktadır?
- Yüksek riskli HPV tipleri ile kalıcı enfeksiyon, neredeyse tüm serviks kanserlerinin gerekli nedenidir; bu nedenle viral nükleik asidin tespiti, risk altındaki popülasyonu belirlemekte ve morfolojik sitolojiyi tamamlamakta veya bazı programlarda ondan önce gelmektedir.