Mantar Tanımlaması ve Antifungal Duyarlılık Testi
Mantar tanımlaması ve antifungal duyarlılık testi, insan enfeksiyonlarına neden olan mayaları ve küfleri tespit eden, adlandıran ve antifungal ajanlara karşı duyarlılıklarını ölçen laboratuvar yöntemleridir. Tanısal mikoloji, mikroskopi ve kültürü antijen ve antikor tespiti, moleküler yöntemler ve proteomik tanımlama ile birleştirmekte, ayrıca antifungal ajanlar için in vitro duyarlılık testini de içermektedir.
Tanım
Mantar tanımlaması, mikroskopi, kültür, seroloji, moleküler veya proteomik yöntemlerle klinik bir örnekten bir maya veya küfün türünün laboratuvar ortamında belirlenmesidir; antifungal duyarlılık testi ise bir mantar izolatının antifungal ajanlara karşı duyarlılığının in vitro ölçümüdür.
Kapsam
Bu madde, doğrudan mikroskopi ve kültürü, antijen ve antikor (serolojik) tespitini, mantarların nükleik asit ve proteomik tanımlamasını ve yorumlayıcı kırılma noktalarıyla birlikte antifungal duyarlılık testini kapsamaktadır. Bunları laboratuvar yöntemleri olarak ele almakta olup, hastalar için antifungal seçimi veya dozajı hakkında bilgi sağlamamaktadır.
Temel sorular
- Bu örnekte bir mantar bulunmakta mıdır ve hangi türdendir?
- Hangi yöntemler – mikroskopi, kültür, antijen veya antikor tespiti, moleküler testler veya kütle spektrometrisi – onu en iyi şekilde tespit ve tanımlamaktadır?
- İzolat ilgili antifungal ajanlara duyarlı mıdır ve bu nasıl ölçülmekte ve yorumlanmaktadır?
- Mantar tanısının duyarlılık, hız ve standardizasyon açısından sınırları nelerdir?
Anahtar kavramlar
- Doğrudan mikroskopi (KOH, kalsiyoflor, histopatoloji)
- Mantar kültürü ve morfolojisi
- Antijen tespiti (örn. galaktomannan, kriptokoksik antijen, beta-D-glukan)
- Antikor (serolojik) testi
- Moleküler ve proteomik tanımlama
- Mantarların MALDI-TOF kütle spektrometrisi
- Antifungal duyarlılık testi ve kırılma noktaları
- Mayalar ve küfler
Mekanizmalar
Tanısal mikoloji, mantarları örneklerde boyalar ve mikroskopi ile görselleştirerek, kültürde büyüterek ve koloni ile mikroskobik morfolojiyi okuyarak ve kültürden bağımsız yöntemlerle tespit etmektedir. Antijen testleri dolaşımdaki mantar hücre duvarı veya kapsüler bileşenleri tespit ederken, antikor testleri konak yanıtını saptamaktadır; moleküler testler ve proteomik tanımlama ile birlikte bunlar, yavaş büyüyen veya kültürü zor olan organizmaların tespitini genişletmektedir (Kozel & Wickes, 2014). Tür düzeyinde tanımlama, giderek artan bir şekilde, bir mantar izolatının protein spektrumunu bir referans veri tabanıyla eşleştiren MALDI-TOF kütle spektrometrisini kullanmaktadır (Clark et al., 2013). Antifungal duyarlılık testi daha sonra antifungal ajanların bir izolata karşı inhibitör aktivitesini ölçmekte ve bunu kırılma noktalarına göre yorumlamaktadır; bu testin standardizasyonu ve sonuçlarla ilişkilendirilmesi gelişen bir çaba olmuştur (Rex & Pfaller, 2002). Profesyonel kılavuzlar, bu laboratuvar yöntemlerini mantar hastalığının daha geniş tanısal değerlendirmesi içinde konumlandırmaktadır (Pappas et al., 2016).
Klinik önem
Mantar tanımlaması ve duyarlılık sonuçları, invaziv ve yüzeysel mantar enfeksiyonları hakkındaki klinik akıl yürütmeye katkıda bulunmakta ve antifungal ajanların yönetimine bilgi sağlamaktadır. Bu madde, bu laboratuvar sonuçlarının nasıl üretildiğini ve yorumlandığını açıklamaktadır; bir referans materyalidir ve bireysel bir hasta için antifungal tedavinin seçimi veya dozajı için bir temel teşkil etmemektedir; bu konular klinik kılavuzlar ve tedavi ekibi tarafından ele alınmaktadır.
Epidemiyoloji
Tanısal mikoloji, mantar patojenlerinin ve ortaya çıkan antifungal direncin, kandidiyazis gibi enfeksiyonlardan sorumlu türlerdeki değişimler de dahil olmak üzere, sürveyansını desteklemektedir. Kılavuz belgeleri, laboratuvar tanı ve duyarlılık verilerinin popülasyon ve bireysel düzeyde yönetimi nasıl bilgilendirdiğini yansıtmaktadır (Pappas et al., 2016).
Tarihçe
Mikolojik tanı uzun süre mikroskopiye ve morfolojik tanımlama ile yavaş kültüre dayanmıştır. Antijen ve antikor testleri, ardından moleküler ve proteomik yöntemler, tespiti genişletmiş ve hızlandırmıştır (Kozel & Wickes, 2014); antifungal duyarlılık testi ise yirminci yüzyılın sonları ve yirmi birinci yüzyılın başlarında bir araştırma aracından standartlaştırılmış bir klinik teste doğru olgunlaşmıştır (Rex & Pfaller, 2002).
İlgili konular
Temel eserler
- kozel-2014
- rex-2002
- pappas-2016
Sıkça sorulan sorular
- Kültür yavaş veya negatif olduğunda mantarlar nasıl tespit edilmektedir?
- Laboratuvarlar, yavaş büyüyen veya belirli bir örnekten kültürü yapılamayan mantarları tespit etmek için kültürden bağımsız yöntemler – antijen testleri (kriptokoksik antijen, galaktomannan veya beta-D-glukan gibi), antikor testleri ve moleküler testler – kullanmaktadır (Kozel & Wickes, 2014).
- Antifungal duyarlılık testi nedir?
- Bu, bir antifungal ajanın bir mantar izolatını inhibe edip etmediğinin in vitro ölçümüdür ve kırılma noktalarına göre yorumlanmaktadır. Bu testin standardizasyonu ve klinik sonuçlarla ilişkilendirilmesi kademeli bir süreç olmuştur (Rex & Pfaller, 2002).