MALDI-TOF
Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry · Ayrıca şöyle bilinir: MALDI mass spectrometry, MALDI-TOF-MS, laser desorption mass spectrometry
Matris Destekli Lazer Desorpsiyonu/İyonizasyonu (MALDI) ile Uçuş Süresi (TOF) kütle analizinin birleşimi olan MALDI-TOF, biyomolekülleri ve uçucu organik bileşikleri nazikçe iyonlaştıran, ardından alan-içermeyen bir sürüklenme bölgesinde uçuş süresi ölçülerek kütle-yük oranlarını belirleyen yumuşak bir iyonizasyon kütle spektrometrisi tekniğidir. 1988'de Karas, Hillenkamp ve Tanaka tarafından bağımsız olarak tanıtılan MALDI-TOF, 100 kDa'ı aşan protein ve polimerlerin kütle belirlemesini sağlayarak proteomik, mikrobiyoloji ve organik analizde devrim yaratmıştır.
Tam yöntemi oku
Bu bölümü okumak için ücretsiz hesapla giriş yapın.
Yöntem haritası
İlişkili yöntemlerin komşuluğu — keşfetmek için bir düğüm seçin.
Ne zaman kullanılır
Hızlı, hassas kütle belirlemesi gerektiğinde ve karmaşık numune hazırlığı olmadan proteinleri, peptitleri, polimerleri ve küçük organik molekülleri karakterize etmek için MALDI-TOF'u uygulayın. MALDI, karmaşık karışımlar ve minimum parçalanma gerektiğinde üstündür. Mikrobiyal tanımlama için idealdir. MALDI-TOF sağlam, nispeten ucuz ve hızlıdır; tipik olarak analiz başlangıcından kütle spektrumuna kadar numune başına 1 dakika. Matris seçiminin analite uygun olduğunu ve iyonizasyon verimliliğinin yeterli olduğunu varsayar.
Güçlü yönler & sınırlılıklar
- Nazik iyonizasyon, kararsız bağları korur; sağlam moleküler iyonlar baskındır, bu da kütle belirlemesini kolaylaştırır
- Son derece hızlı analiz; MALDI cihazları saatte yüzlerce numuneyi analiz edebilir
- FT-ICR veya Orbitrap'a kıyasla düşük maliyet; MALDI-TOF cihazları uygun fiyatlı ve yaygındır
- Tuz, tampon ve kirliliğe tolerans; matris genellikle girişimi bastırır
- FT-ICR veya yüksek çözünürlüklü TOF'a kıyasla daha düşük kütle çözünürlüğü (< 10.000); kimyasal formül belirlemesi daha az hassastır
- İyonizasyon verimliliği analit özelliklerine ve numune matris bileşimine göre değiştiği için miktar tayini zordur
- Matris tepeciklerinden kaynaklanan kimyasal gürültü nedeniyle küçük moleküller (< 500 Da) zordur
- Spektral kalite, matris seçimine ve kristal boyutuna kritik derecede bağlıdır; optimizasyon genellikle gereklidir
SSS
MALDI'de matris seçimi neden kritiktir?
Matris, lazer dalga boyunda fotonları emmeli, enerjiyi analit moleküllerine verimli bir şekilde aktarmalı ve reaksiyona girmeden iyonizasyonu kolaylaştırmalıdır. Yaygın matrisler arasında peptitler ve proteinler için alfa-siyano-4-hidroksisinamik asit, oligonükleotitler için 2,5-dihidroksibenzoik asit ve lipitler için ditranol bulunur. Yanlış matris, zayıf veya hiç iyonizasyona yol açar.
MALDI, elektrosprey iyonizasyonundan (ESI) nasıl farklıdır?
MALDI, lazer darbesi iyonizasyonunu kullanır ve katı numuneler üzerinde çalışır; ESI, çözeltiden ortam elektriksel iyonizasyonunu kullanır. MALDI daha hızlıdır ve tuzları daha iyi tolere eder; ESI, sıvı kromatografisi ile daha uyumludur ve bazı cihazlarda daha yüksek çözünürlük elde eder. Her ikisi de biyomoleküller için uygun yumuşak iyonizasyon yöntemleridir.
[M+H]+ iyonu neyi temsil eder?
[M+H]+ iyonu, tek ek proton almış sağlam analit molekülü M'dir. Matrisin verimli bir şekilde proton bağışlaması nedeniyle MALDI'de en yaygın pozitif iyondur. Kütle, bu tepe noktasının m/z (kütle-yük oranı) değerinden doğrudan okunur; bu değeri yüküne (bu durumda 1) bölmek gerçek moleküler kütleyi verir.
Kaynaklar
- Karas, M., & Hillenkamp, F. (1988). Laser desorption ionization of proteins with molecular masses exceeding 10,000 daltons. Analytical Chemistry, 60(20), 2299-2301. DOI: 10.1021/ac00171a028 ↗
- Tanaka, K., Waki, H., Ido, Y., Akita, S., Yoshida, Y., & Yoshida, T. (1988). Protein and polymer analyses up to m/z 100,000 by laser ionization time-of-flight mass spectrometry. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 2(8), 151-153. DOI: 10.1002/rcm.1290020802 ↗
- Fenn, J. B., Mann, M., Meng, C. K., Wong, S. F., & Whitehouse, C. M. (1989). Electrospray ionization for mass spectrometry of large biomolecules. Science, 246(4926), 64-71. DOI: 10.1126/science.2675315 ↗
Bu sayfayı kaynak gösterin
ScholarGate. (2026, June 3). Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-Flight Mass Spectrometry. ScholarGate. https://scholargate.app/tr/spectroscopy/maldi-tof
Hangi yöntem?
Bu yöntemi en yakın akrabalarının yanına koyup yan yana okuyun — kütüphane kitapları masaya serer; seçim sizindir.
- Dairesel DikroizmSpektroskopi↔ karşılaştır
- FT-ICR Kütle SpektrometrisiSpektroskopi↔ karşılaştır
- Yüzey Plazmon RezonansıSpektroskopi↔ karşılaştır