Viral Saptama ve Serolojik Testler
Viral saptama ve serolojik testler, bir kişinin viral bir enfeksiyona sahip olup olmadığını veya daha önce geçirip geçirmediğini belirlemek için kullanılan laboratuvar yöntemleridir. Saptama yöntemleri virüsün kendisini – nükleik asidini veya antijenlerini – bulurken, serolojik testler virüse karşı antikor yanıtını ölçmektedir. Bu yöntemler birlikte tanıya, enfeksiyonun evrelendirilmesine ve sürveyansa destek olmaktadır.
Tanım
Viral saptama, bir örnekte virüsün nükleik asidi veya antijenleri aracılığıyla laboratuvar ortamında tanımlanmasıdır; serolojik testler ise konakçı tarafından viral bir enfeksiyona yanıt olarak üretilen antikorların saptanması ve ölçülmesidir.
Kapsam
Bu madde, nükleik asit amplifikasyon testlerini (gerçek zamanlı PCR gibi), viral antijen saptamasını ve serolojik antikor testlerini, enfeksiyonun zamanlamasının hangi testin bilgilendirici olduğunu ve sonuçların nasıl yorumlandığını nasıl etkilediği de dahil olmak üzere ele almaktadır. Bu yöntemler laboratuvar metotları olarak ele alınmakta olup, bireysel tanı veya tedavi tavsiyesi sunmamaktadır.
Temel sorular
- Bu örnekte bir virüs mevcut mudur, yoksa güncel veya geçmiş enfeksiyonun serolojik kanıtı var mıdır?
- Hangi yaklaşım – nükleik asit amplifikasyonu, antijen saptaması veya antikor serolojisi – klinik soruya ve enfeksiyonun evresine uymaktadır?
- Antijen, nükleik asit ve antikorların ortaya çıkış zamanlaması test yorumlamasını nasıl etkilemektedir?
- Her bir yöntemin hassasiyet, özgüllük ve sonuçlanma süresi sınırları nelerdir?
Anahtar kavramlar
- Nükleik asit amplifikasyon testi (örn. gerçek zamanlı PCR)
- Viral antijen saptaması
- Antikor serolojisi (IgM, IgG, serokonversiyon)
- Birleşik antijen-antikor testleri
- Pencere dönemi ve belirteçlerin zamanlaması
- Kalitatif ve kantitatif (viral yük) testler
- Doğrudan saptama ve dolaylı (serolojik) kanıt
- Analitik hassasiyet ve özgüllük
Mekanizmalar
Doğrudan saptama yöntemleri virüsün kendisini tanımlamaktadır: gerçek zamanlı PCR gibi nükleik asit amplifikasyonu, viral genomları yüksek hassasiyetle çoğaltmakta ve saptamakta olup kantitatif de olabilmektedir, antijen testleri ise viral proteinleri saptamaktadır (Espy ve ark., 2006). Serolojik yöntemler dolaylıdır; enfeksiyon süreci boyunca izotipi ve titresi değişen konakçı antikorlarını saptamaktadır – IgM ve ardından IgG genellikle maruziyet sonrası ortaya çıkmakta, bu nedenle serokonversiyon yakın zamanda geçirilmiş enfeksiyonu işaret ederken, IgG geçmiş maruziyeti veya bağışıklığı gösterebilmektedir. Antijen, nükleik asit ve antikorlar farklı zamanlarda ortaya çıktığından, enfeksiyonun evresi hangi belirtecin bilgilendirici olduğunu belirlemektedir ve bazı testler erken enfeksiyon penceresini daraltmak için antijen ve antikor saptamasını birleştirmektedir. Daha hızlı ve daha iyi entegre edilmiş viral tanı yöntemleri, bulaşıcı hastalık testlerinin iyileştirilmesi yönündeki daha geniş çabanın bir parçasıdır (Caliendo ve ark., 2013); kütle spektrometrisi genel olarak mikrobiyal tanımlamayı yeniden şekillendirmiş olsa da, kültür ve moleküler yöntemler virolojide merkezi konumunu korumaktadır (Clark ve ark., 2013).
Klinik önem
Viral saptama ve seroloji sonuçları, bir enfeksiyonun mevcut, yakın zamanda geçirilmiş veya geçmişte olup olmadığı ve bağışıklık durumu hakkında klinik akıl yürütmeyi beslemektedir, ancak anlamları testin zamanlamasına ve klinik bağlama bağlıdır. Bu madde, yöntemlerin nasıl çalıştığını ve zamanlamanın yorumlamayı nasıl etkilediğini açıklamaktadır; bir referans materyali olup bireysel tanı veya tedavi için bir temel oluşturmamaktadır.
Epidemiyoloji
Viral saptama ve seroloji, sürveyans, salgın araştırması ve örneğin seroprevalans çalışmaları aracılığıyla popülasyon bağışıklığının ölçülmesinin temelini oluşturmaktadır. Daha hızlı, daha doğru ve daha iyi entegre edilmiş tanı yöntemlerine yönelik çaba, bunların halk sağlığı ve klinik değerini yansıtmaktadır (Caliendo ve ark., 2013).
Tarihçe
Klinik viroloji, emek yoğun viral kültür ve erken serolojik testlerden antijen saptamaya ve kesin olarak nükleik asit amplifikasyonuna doğru ilerlemiştir, bu da hassas ve genellikle kantitatif doğrudan saptamayı rutin hale getirmiştir (Espy ve ark., 2006). Birleşik antijen-antikor testleri ve yüksek verimli moleküler platformlar, daha sonra örnekten sonuca kadar geçen süreyi daha da kısaltmış olup, bulaşıcı hastalık tanı yöntemlerinin daha geniş modernizasyonuyla uyumludur (Caliendo ve ark., 2013).
İlgili konular
Temel eserler
- espy-2006
- caliendo-2013
Sıkça sorulan sorular
- Virüs saptama ile serolojik testler arasındaki fark nedir?
- Virüs saptama, organizmayı doğrudan – nükleik asidini (PCR gibi yöntemlerle) veya antijenlerini – bulmak anlamına gelmektedir. Serolojik testler dolaylıdır: konakçının virüse yanıt olarak ürettiği antikorları ölçer ve bunlar güncel veya geçmiş enfeksiyonu göstermektedir.
- Viral testler için zamanlama neden önemlidir?
- Viral nükleik asit ve antijenler enfeksiyonun erken dönemlerinde ortaya çıkarken, antikorlar daha sonra gelişmektedir; bu nedenle, hedef belirteç yükselmeden önce yapılırsa bir test yanlış negatif sonuç verebilmektedir. Enfeksiyonun evresi hangi yöntemin bilgilendirici olduğunu belirlemektedir.