การเตรียมและการประเมินความเพียงพอของสิ่งส่งตรวจทางเซลล์วิทยาปัสสาวะ

การเตรียมและการประเมินความเพียงพอของสิ่งส่งตรวจเป็นรากฐานสำคัญของเซลล์วิทยาปัสสาวะที่เชื่อถือได้ วิธีการเก็บ การตรึง และการแปรรูปสิ่งส่งตรวจปัสสาวะ รวมถึงเกณฑ์ที่ใช้ในการตัดสินว่าสิ่งส่งตรวจนั้นเพียงพอต่อการแปลผลหรือไม่ ล้วนเป็นปัจจัยโดยตรงที่กำหนดว่าสามารถตรวจพบเซลล์มะเร็งได้หรือไม่ และรายงานผลสามารถออกได้อย่างมั่นใจเพียงใด

Definition

การเตรียมสิ่งส่งตรวจทางเซลล์วิทยาปัสสาวะประกอบด้วยการเก็บ การตรึง และการแปรรูปตัวอย่างปัสสาวะในห้องปฏิบัติการเพื่อทำเป็นสไลด์สำหรับการตรวจด้วยกล้องจุลทรรศน์ และการประเมินความเพียงพอคือการตัดสินว่าสิ่งส่งตรวจที่เตรียมไว้มีวัสดุเซลล์ที่เพียงพอและเก็บรักษาไว้ดีพอที่จะสนับสนุนการแปลผลทางเซลล์วิทยาหรือไม่

Scope

บทความนี้ครอบคลุมถึงประเภทหลักของสิ่งส่งตรวจปัสสาวะและข้อดีข้อเสียเปรียบเทียบกัน วิธีการเตรียมทั่วไป เช่น การปั่นแยกเซลล์ (cytocentrifugation) และการแปรรูปด้วยของเหลว (liquid-based processing) บทบาทของการตรึงเซลล์ และแนวคิดและเกณฑ์ความเพียงพอของสิ่งส่งตรวจตามที่กำหนดไว้ในการรายงานมาตรฐาน บทความนี้เน้นด้านระเบียบวิธีและให้ความรู้ ไม่ได้ให้แนวทางการเก็บหรือแปรรูปเพื่อใช้ทางคลินิก

Core questions

• สิ่งส่งตรวจปัสสาวะประเภทใดที่เหมาะสมที่สุดในการตรวจหามะเร็งเยื่อบุทางเดินปัสสาวะ?
• การเตรียมด้วยของเหลวและการปั่นแยกเซลล์แตกต่างกันอย่างไรในการนำเสนอเซลล์?
• เกณฑ์ใดที่กำหนดว่าสิ่งส่งตรวจปัสสาวะมีความเพียงพอ?
• การเก็บรักษาและการตรึงเซลล์ส่งผลต่อการเก็บรักษาเซลล์และปริมาณเซลล์ที่ได้มาอย่างไร?

Key concepts

• ปัสสาวะที่ขับถ่ายเองเทียบกับสิ่งส่งตรวจที่ได้จากการสอดเครื่องมือ
• การล้างกระเพาะปัสสาวะ (barbotage)
• ปัสสาวะที่เก็บโดยการใส่สายสวน
• เซลล์วิทยาชนิดเหลว (Liquid-based cytology)
• การปั่นแยกเซลล์ (cytospin)
• การตรึงและการเสื่อมสภาพ
• เกณฑ์ความเพียงพอของปริมาตรและความหนาแน่นของเซลล์

Mechanisms

ปัสสาวะที่ขับถ่ายเอง (voided urine) เป็นวิธีที่ไม่รุกราน แต่ให้เซลล์น้อยกว่าและมักจะเสื่อมสภาพมากกว่า ในขณะที่สิ่งส่งตรวจที่ได้จากการสอดเครื่องมือ เช่น การล้างกระเพาะปัสสาวะ (bladder washings) จะทำให้เซลล์เยื่อบุทางเดินปัสสาวะหลุดออกมาได้มากขึ้นและเก็บรักษาไว้ได้ดีกว่า แต่ก็มีความรุกรานมากกว่า เซลล์ในปัสสาวะจะเสื่อมสภาพไปตามกาลเวลา ดังนั้นการตรึงหรือการแช่เย็นอย่างรวดเร็วจะช่วยรักษาสัณฐานวิทยาไว้ได้ วิธีการเตรียมมีผลต่อลักษณะของเซลล์ที่ปรากฏ: การปั่นแยกเซลล์และวิธีการใช้ของเหลวจะทำให้เซลล์มีความเข้มข้นต่างกัน และอาจเปลี่ยนแปลงอัตราส่วนนิวเคลียสต่อไซโตพลาสซึมที่ปรากฏ ซึ่งเป็นเหตุผลว่าทำไมเกณฑ์ที่ได้จากการเตรียมวิธีหนึ่งจึงต้องได้รับการตรวจสอบความถูกต้องกับวิธีอื่น (olson-2016-adequacy; richardson-2020)

Clinical relevance

การตัดสินใจเกี่ยวกับความเพียงพอและการเตรียมสิ่งส่งตรวจเป็นตัวกำหนดความสามารถในการแปลผลของสิ่งส่งตรวจทางเซลล์วิทยาปัสสาวะ และด้วยเหตุนี้จึงเป็นตัวกำหนดความหมายของรายงานผล สิ่งเหล่านี้อธิบายถึงคุณภาพก่อนการวิเคราะห์มากกว่าที่จะกำหนดแนวทางการจัดการผู้ป่วย เนื้อหาในที่นี้มีวัตถุประสงค์เพื่อให้ความรู้และไม่ใช่แนวทางปฏิบัติทางคลินิก

Evidence & guidelines

ระบบปารีสสำหรับการรายงานเซลล์วิทยาปัสสาวะ (The Paris System for Reporting Urinary Cytology) กำหนดความเพียงพอในแง่ของประเภทสิ่งส่งตรวจ ปริมาตร และการเก็บรักษาเซลล์ และกล่าวถึงวิธีการเตรียมที่แตกต่างกันมีความสัมพันธ์กับเกณฑ์ทางเซลล์สัณฐานวิทยาอย่างไร การศึกษาเปรียบเทียบจะตรวจสอบว่าเกณฑ์ต่างๆ เช่น อัตราส่วนนิวเคลียสต่อไซโตพลาสซึม มีความสอดคล้องกันในวิธีการเตรียมที่แตกต่างกันหรือไม่ (olson-2016-adequacy; richardson-2020; kurtycz-2020)

History

เซลล์วิทยาปัสสาวะในยุคแรกอาศัยการทำสเมียร์โดยตรงและการเตรียมด้วยแผ่นกรอง การนำการปั่นแยกเซลล์มาใช้ และต่อมาคือการแปรรูปด้วยของเหลว ช่วยปรับปรุงความเข้มข้นและความสม่ำเสมอของเซลล์ การกำหนดมาตรฐานเกณฑ์ความเพียงพอภายในระบบปารีสทำให้สาขาวิชานี้มีเกณฑ์ที่ชัดเจนและทำซ้ำได้สำหรับการยอมรับหรือการจัดประเภทสิ่งส่งตรวจ (olson-2016-adequacy)

Debates

เกณฑ์ความเพียงพอเชิงปริมาณควรแตกต่างกันตามวิธีการเตรียมหรือไม่?

เนื่องจากการเตรียมด้วยของเหลวและการปั่นแยกเซลล์นำเสนอเซลล์เยื่อบุทางเดินปัสสาวะแตกต่างกัน การใช้มาตรฐานความเพียงพอและอัตราส่วนนิวเคลียสต่อไซโตพลาสซึมเพียงชุดเดียวกับทุกวิธีจึงยังคงเป็นประเด็นของการศึกษาและปรับปรุงระเบียบวิธี

Key figures

• Matthew Olson
• Daniel Kurtycz
• Güliz Barkan

Seminal works

• olson-2016-adequacy
• kurtycz-2020

Frequently asked questions

เหตุใดบางครั้งจึงนิยมการล้างกระเพาะปัสสาวะมากกว่าปัสสาวะที่ขับถ่ายเอง?

การล้างกระเพาะปัสสาวะจะทำให้เซลล์เยื่อบุทางเดินปัสสาวะหลุดออกมาได้จำนวนมากและเก็บรักษาไว้ได้ดีกว่า ซึ่งช่วยเพิ่มปริมาณเซลล์ที่ได้มา แม้ว่าจะต้องใช้เครื่องมือและมีความรุกรานมากกว่าการเก็บปัสสาวะที่ขับถ่ายเองก็ตาม

อะไรทำให้สิ่งส่งตรวจปัสสาวะไม่เพียงพอ?

ปริมาตรไม่เพียงพอ เซลล์น้อยเกินไป หรือการเสื่อมสภาพของเซลล์อย่างชัดเจน อาจทำให้สิ่งส่งตรวจไม่เพียงพอหรือไม่สมบูรณ์ เนื่องจากเซลล์ที่น้อยเกินไปหรือไม่ได้รับการเก็บรักษาที่ดีพอไม่สามารถสนับสนุนการแปลผลที่มั่นใจได้