Методы определения чувствительности к антимикробным препаратам

Определение чувствительности к антимикробным препаратам (ОЧАП) — это набор стандартизированных лабораторных методов, используемых для определения того, подавляется или уничтожается ли микроорганизм антимикробным агентом и в какой концентрации. Его результаты, как правило, минимальная ингибирующая концентрация (МИК) или диаметр зоны ингибирования, интерпретируются на основе опубликованных пороговых значений для классификации организма как чувствительного, умеренно чувствительного или резистентного.

Definition

Определение чувствительности к антимикробным препаратам — это стандартизированное измерение реакции микроорганизма in vitro на антимикробные агенты, выраженное в виде МИК или диаметра зоны и интерпретируемое на основе пороговых значений для присвоения категории чувствительного, умеренно чувствительного или резистентного.

Scope

Эта статья охватывает основные методы ОЧАП, измеряемые ими величины и способы интерпретации результатов. В ней рассматриваются методы разведений (микроразведения в бульоне, разведения в агаре), диффузионные методы (диско-диффузионный метод, метод градиентных полосок) и автоматизированные системы, а также системы пороговых значений CLSI и EUCAST. Статья носит методологический характер и не содержит рекомендаций по дозированию или лечению.

Core questions

• Какая концентрация антимикробного препарата ингибирует рост данного организма?
• Чем методы разведений и диффузионные методы отличаются по тому, что они измеряют и как они считываются?
• Как измеренная МИК или диаметр зоны переводится в клиническую категорию?

Key concepts

• Минимальная ингибирующая концентрация (МИК)
• Микроразведение в бульоне (референсный метод)
• Разведение в агаре
• Диско-диффузионный метод (Кирби-Бауэра)
• Градиентная диффузия (градиентная полоска для МИК)
• Диаметр зоны ингибирования
• Клинические пороговые значения (CLSI, EUCAST)
• Категории чувствительный-умеренно чувствительный-резистентный
• Контрольные штаммы и стандартизированный инокулят

Mechanisms

Методы ОЧАП имеют общую логику: стандартизированный инокулят организма подвергается воздействию определенных концентраций антимикробного препарата в контролируемых условиях, и считывается ингибирование роста. Методы разведений (микроразведения в бульоне, считающийся референсным методом, и разведения в агаре) определяют наименьшую концентрацию, которая ингибирует видимый рост, то есть МИК. Диффузионные методы помещают препарат в агар таким образом, чтобы он диффундировал, образуя градиент концентрации: диско-диффузионный метод считывает диаметр зоны ингибирования, в то время как градиентные полоски считывают МИК в точке пересечения эллипса ингибирования с калиброванной шкалой. Автоматизированные коммерческие системы генерируют МИК на основе миниатюризированных разведений в бульоне и оптического или турбидиметрического обнаружения роста. Результаты интерпретируются на основе пороговых значений CLSI или EUCAST, а экспертные правила перепроверяют результаты на соответствие известным фенотипам резистентности (jorgensen-2009; leclercq-2013; clsi-m100; eucast-breakpoints).

Clinical relevance

Результаты определения чувствительности используются для управления инфекционными заболеваниями, рационального использования антимикробных препаратов и эпиднадзора, а также для составления кумулятивных антибиотикограмм, которые предоставляют лаборатории. Эта статья объясняет, как эти результаты получаются и интерпретируются в качестве справочного материала; она не является источником индивидуальных диагностических или предписывающих решений.

Epidemiology

Поскольку ОЧАП стандартизировано, результаты сопоставимы между лабораториями и с течением времени, что позволяет агрегировать их в локальные антибиотикограммы и в национальный и международный эпиднадзор за резистентностью. Выбор метода, версия пороговых значений и контроль качества влияют на сопоставимость этих данных (clsi-m100; eucast-breakpoints).

History

Тестирование чувствительности развивалось в десятилетия после внедрения антибиотиков. Диско-диффузионный метод был стандартизирован в 1960-х годах и получил широкое распространение благодаря своей простоте, в то время как разведения в бульоне и агаре обеспечивали количественные МИК. Со временем стандартизирующие органы, в частности CLSI в США и EUCAST в Европе, формализовали методы, пороговые значения и контроль качества, а автоматизированные системы и градиентные полоски расширили рутинную практику (jorgensen-2009).

Debates

Различия между пороговыми значениями CLSI и EUCAST

CLSI и EUCAST устанавливают пороговые значения, используя схожие, но различные процессы, и их категоризации, а также определение промежуточной категории могут отличаться; гармонизация и интерпретация расходящихся результатов являются текущими методологическими проблемами.

Воспроизводимость вблизи пороговых значений

Измеренные МИК обладают присущей им изменчивостью, поэтому результаты, близкие к пороговому значению, могут быть по-разному категоризированы в разных повторах или методах, что усложняет интерпретацию пограничных организмов.

Seminal works

• jorgensen-2009
• leclercq-2013
• clsi-m100

Frequently asked questions

Что такое минимальная ингибирующая концентрация (МИК)?

МИК — это наименьшая концентрация антимикробного препарата, которая предотвращает видимый рост организма в стандартизированных условиях; это количественный результат, который стремятся определить методы разведений.

Почему существуют разные методы ОЧАП?

Методы разведений дают числовую МИК, диффузионные методы, такие как диско-диффузионный, просты и недороги, а автоматизированные системы обеспечивают скорость и пропускную способность; лаборатории выбирают между ними в зависимости от организма, тестируемых препаратов и имеющихся ресурсов.

Что означают чувствительный, умеренно чувствительный и резистентный?

Это интерпретационные категории, присваиваемые путем сравнения измеренной МИК или диаметра зоны с пороговыми значениями, установленными стандартизирующими органами; они обобщают вероятность того, что организм отреагирует на препарат в обычных условиях, и определяются методологически, а не как рекомендации по лечению.