Прямой и непрямой антиглобулиновый (тест Кумбса) тесты

Антиглобулиновый тест, широко известный как тест Кумбса, использует античеловеческий глобулиновый реагент для обнаружения иммуноглобулина или комплемента, связанных с эритроцитами. Его прямая форма выявляет антитела, уже покрывающие эритроциты пациента in vivo, тогда как его непрямая форма обнаруживает антитела в плазме, которые связывают реагентные клетки in vitro; вместе они являются центральными инструментами иммуногематологии.

Definition

Антиглобулиновый (Кумбса) тест обнаруживает человеческий иммуноглобулин или компоненты комплемента на эритроцитах с использованием античеловеческого глобулинового реагента, который перекрестно связывает покрытые клетки в видимые агглютинаты; прямой тест исследует собственные эритроциты пациента, а непрямой тест исследует реагентные эритроциты после инкубации с плазмой пациента.

Scope

Эта тема объясняет принцип антиглобулиновой реакции и различие между прямым антиглобулиновым тестом (ПАТ) и непрямым антиглобулиновым тестом (НАТ), а также их место в серологическом исследовании. Она описывает метод и интерпретацию теста концептуально и не является протоколом для диагностики или лечения конкретных пациентов.

Core questions

• Как античеловеческий глобулиновый реагент вызывает агглютинацию клеток, покрытых антителами?
• Что отличает прямой антиглобулиновый тест от непрямого?
• На что указывает положительный прямой антиглобулиновый тест?
• Как непрямой антиглобулиновый тест используется при обнаружении антител и перекрестном подборе?

Key concepts

• Античеловеческий глобулиновый (АЧГ) реагент
• Неполные (IgG) антитела
• Прямой антиглобулиновый тест (ПАТ)
• Непрямой антиглобулиновый тест (НАТ)
• Сенсибилизация in vivo против in vitro
• Полиспецифические и моноспецифические реагенты (IgG, C3)
• Агглютинация как результат

Mechanisms

Многие клинически важные антитела к эритроцитам относятся к классу IgG и не агглютинируют напрямую антиген-положительные клетки в физиологическом растворе, поскольку молекулы слишком малы, чтобы соединить клетки, отталкивающиеся из-за их поверхностного заряда. Античеловеческий глобулиновый реагент, полученный против человеческого IgG и комплемента, связывает эти покрывающие молекулы и соединяет соседние сенсибилизированные клетки, вызывая видимую агглютинацию. В прямом тесте отмытые эритроциты пациента смешивают с реагентом для обнаружения антител или комплемента, уже связанных in vivo, как это происходит при гемолитических трансфузионных реакциях, гемолитической болезни новорожденных и аутоиммунной гемолитической анемии. В непрямом тесте плазму сначала инкубируют с реагентными эритроцитами, чтобы любые антитела связались in vitro, затем добавляют антиглобулиновый реагент; это лежит в основе скрининга антител, их идентификации и антиглобулинового перекрестного подбора.

Clinical relevance

Антиглобулиновое тестирование поддерживает лабораторное исследование гемолиза и безопасный подбор компонентов крови. Эта запись описывает, как работает тест и что в принципе означают положительные и отрицательные результаты; интерпретация любого индивидуального результата относится к клиническому и лабораторному контексту и здесь не рассматривается как руководство.

Evidence & guidelines

Антиглобулиновая техника и ее варианты описаны в стандартных иммуногематологических справочниках, таких как Техническое руководство AABB и «Переливание крови в клинической медицине» Моллисона, которые устанавливают метод и интерпретацию по консенсусу.

History

Кумбс, Морант и Рейс представили антиглобулиновый тест в 1945 году для обнаружения слабых и неполных антител Rh, которые не выявлялись обычной солевой агглютинацией. Эта техника преобразила иммуногематологию, сделав сенсибилизацию IgG видимой, и остается основой скрининга антител, их идентификации, перекрестного подбора и исследования иммунного гемолиза.

Key figures

• Robert Coombs
• Arthur Mourant
• Robert Race

Seminal works

• coombs-1945
• mollison-2014
• daniels-2013

Frequently asked questions

В чем разница между прямым и непрямым тестом Кумбса?

Прямой тест обнаруживает антитела или комплемент, уже связанные с эритроцитами пациента в организме; непрямой тест обнаруживает антитела в плазме путем их связывания с реагентными эритроцитами в пробирке перед добавлением антиглобулинового реагента.

Что может вызвать положительный прямой антиглобулиновый тест?

Положительный прямой антиглобулиновый тест указывает на то, что эритроциты покрыты иммуноглобулином или комплементом, что может происходить при аутоиммунной гемолитической анемии, гемолитической болезни новорожденных и гемолитических трансфузионных реакциях, среди прочих состояний.