Identificação Fúngica e Teste de Antifúngicos

A identificação fúngica e o teste de antifúngicos são os métodos laboratoriais que detectam e nomeiam leveduras e bolores que causam infecções humanas e medem sua suscetibilidade a agentes antifúngicos. A micologia diagnóstica combina microscopia e cultura com detecção de antígenos e anticorpos, métodos moleculares e identificação proteômica, e adiciona testes de suscetibilidade in vitro para agentes antifúngicos.

Definition

A identificação fúngica é a determinação laboratorial da espécie de uma levedura ou bolor a partir de uma amostra clínica, por microscopia, cultura, sorologia, métodos moleculares ou proteômicos; o teste de antifúngicos é a medição in vitro da suscetibilidade de um isolado fúngico a agentes antifúngicos.

Scope

A entrada abrange microscopia direta e cultura, detecção de antígenos e anticorpos (sorológica), identificação de fungos por ácidos nucleicos e proteômica, e testes de suscetibilidade a antifúngicos com seus pontos de corte interpretativos. Aborda-os como métodos laboratoriais e não fornece seleção ou dosagem de antifúngicos para pacientes.

Core questions

• Um fungo está presente nesta amostra, e qual é a sua espécie?
• Quais métodos - microscopia, cultura, detecção de antígenos ou anticorpos, ensaios moleculares ou espectrometria de massa - o detectam e identificam melhor?
• O isolado é suscetível a agentes antifúngicos relevantes, e como isso é medido e interpretado?
• Quais são os limites dos diagnósticos fúngicos em sensibilidade, velocidade e padronização?

Key concepts

• Microscopia direta (KOH, calcofluor, histopatologia)
• Cultura e morfologia fúngica
• Detecção de antígenos (por exemplo, galactomanana, antígeno criptocócico, beta-D-glucana)
• Teste de anticorpos (sorológico)
• Identificação molecular e proteômica
• Espectrometria de massa MALDI-TOF de fungos
• Teste de suscetibilidade a antifúngicos e pontos de corte
• Leveduras versus bolores

Mechanisms

A micologia diagnóstica detecta fungos visualizando-os em amostras com colorações e microscopia, cultivando-os e lendo a morfologia da colônia e microscópica, e por métodos independentes de cultura. Os ensaios de antígenos detectam componentes da parede celular fúngica ou capsulares circulantes, enquanto os testes de anticorpos detectam a resposta do hospedeiro; juntamente com os ensaios moleculares e a identificação proteômica, estes estendem a detecção a organismos de crescimento lento ou difíceis de cultivar (Kozel & Wickes, 2014). A identificação em nível de espécie utiliza cada vez mais a espectrometria de massa MALDI-TOF, que compara o espectro proteico de um isolado fúngico com um banco de dados de referência (Clark et al., 2013). O teste de suscetibilidade a antifúngicos mede então a atividade inibitória de agentes antifúngicos contra um isolado e a interpreta em relação aos pontos de corte; a padronização desses testes e sua relação com os resultados tem sido um esforço contínuo (Rex & Pfaller, 2002). As diretrizes profissionais situam esses métodos laboratoriais dentro da avaliação diagnóstica mais ampla da doença fúngica (Pappas et al., 2016).

Clinical relevance

Os resultados da identificação fúngica e da suscetibilidade contribuem para o raciocínio clínico sobre infecções fúngicas invasivas e superficiais e informam a gestão de agentes antifúngicos. Esta entrada descreve como esses resultados laboratoriais são produzidos e interpretados; é material de referência e não é uma base para selecionar ou dosar a terapia antifúngica para um indivíduo, o que é abordado por diretrizes clínicas e pela equipe de tratamento.

Epidemiology

A micologia diagnóstica apoia a vigilância de patógenos fúngicos e a resistência emergente a antifúngicos, incluindo mudanças nas espécies responsáveis por infecções como a candidíase. Documentos de diretrizes refletem como os diagnósticos laboratoriais e os dados de suscetibilidade informam o manejo em nível populacional e individual (Pappas et al., 2016).

History

O diagnóstico micológico dependeu por muito tempo da microscopia e da cultura lenta com identificação morfológica. Ensaios de antígenos e anticorpos, depois métodos moleculares e proteômicos, ampliaram e aceleraram a detecção (Kozel & Wickes, 2014), enquanto o teste de suscetibilidade a antifúngicos amadureceu de uma ferramenta de pesquisa para um ensaio clínico padronizado no final do século XX e início do século XXI (Rex & Pfaller, 2002).

Seminal works

• kozel-2014
• rex-2002
• pappas-2016

Frequently asked questions

Como os fungos são detectados quando a cultura é lenta ou negativa?

Os laboratórios usam métodos independentes de cultura - ensaios de antígenos (como antígeno criptocócico, galactomanana ou beta-D-glucana), testes de anticorpos e ensaios moleculares - para detectar fungos que crescem lentamente ou não podem ser cultivados a partir de uma determinada amostra (Kozel & Wickes, 2014).

O que é o teste de suscetibilidade a antifúngicos?

É a medição in vitro se um agente antifúngico inibe um isolado fúngico, interpretada em relação aos pontos de corte. A padronização desses testes e sua ligação com os resultados clínicos tem sido um processo gradual (Rex & Pfaller, 2002).