इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री और सेल मार्कर

इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री (ICC) कोशिकाओं में या उन पर विशिष्ट प्रोटीन एंटीजन का पता लगाने के लिए साइटोलॉजिक तैयारी पर एंटीबॉडी-आधारित स्टेनिंग का अनुप्रयोग है। एक कोशिका के इम्यूनोफेनोटाइप को प्रकट करके, यह वंश को निर्धारित करने, नियोप्लास्टिक प्रक्रियाओं से प्रतिक्रियाशील को अलग करने, मेटास्टेसिस के प्राथमिक स्थल की पहचान करने और उन मार्करों का पता लगाने में मदद करता है जिन्हें केवल मॉर्फोलॉजी नहीं दिखा सकती है।

Definition

इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री एक सहायक तकनीक है जिसमें लेबल किए गए एंटीबॉडी का उपयोग साइटोलॉजिक तैयारी में विशिष्ट प्रोटीन एंटीजन को स्थानीयकृत करने के लिए किया जाता है, जिससे एक इम्यूनोफेनोटाइपिक प्रोफ़ाइल उत्पन्न होती है जो मॉर्फोलॉजिक निदान को पूरक करती है।

Scope

यह प्रविष्टि स्मीयर, तरल-आधारित तैयारी, साइटोस्पिन और सेल ब्लॉक पर एंटीजन-एंटीबॉडी स्थानीयकरण के सिद्धांत को शामिल करती है; सामान्य नैदानिक ​​प्रश्नों को संबोधित करने के लिए उपयोग किए जाने वाले मार्करों के पैनल; और साइटोलॉजिक सामग्री के लिए विशिष्ट पूर्व-विश्लेषणात्मक और व्याख्यात्मक कारक। यह आईसीसी को एक पद्धतिगत विषय के रूप में मानता है, न कि नैदानिक ​​प्रोटोकॉल के स्रोत के रूप में।

Core questions

• नमूना तैयार करने और फिक्सेशन से साइटोलॉजी में एंटीजन संरक्षण और स्टेनिंग गुणवत्ता कैसे प्रभावित होती है?
• कौन से मार्कर पैनल किसी दिए गए साइटोलॉजिक नमूने पर प्रमुख अंतर निदान को अलग करते हैं?
• सीमित साइटोलॉजिक सामग्री को कैसे संरक्षित किया जाना चाहिए ताकि एक पर्याप्त इम्यूनोपैनल किया जा सके?

Key concepts

• एंटीजन-एंटीबॉडी बंधन और पहचान प्रणाली
• सेल ब्लॉक बनाम स्मीयर और तरल-आधारित सब्सट्रेट
• एकल दाग के बजाय मार्कर पैनल
• वंश और उत्पत्ति स्थल के मार्कर
• पूर्व-विश्लेषणात्मक चर (फिक्सेशन, प्रसंस्करण)
• साइटोलॉजिक सब्सट्रेट पर एंटीबॉडी का सत्यापन

Mechanisms

एक प्राथमिक एंटीबॉडी निश्चित साइटोलॉजिक तैयारी में अपने लक्ष्य एंटीजन को बांधता है, और फिर बंधे हुए एंटीबॉडी को एक पहचान प्रणाली के माध्यम से देखा जाता है जो एंटीजन साइट पर एक रंगीन क्रोमोजेन या फ्लोरोफोर जमा करता है। क्योंकि साइटोलॉजिक नमूने विभिन्न तरीकों से तैयार किए जाते हैं - हवा में सूखे या अल्कोहल-स्थिर स्मीयर, तरल-आधारित मीडिया, साइटोस्पिन और फॉर्मेलिन-स्थिर सेल ब्लॉक - एंटीजन संरक्षण और पृष्ठभूमि स्टेनिंग सब्सट्रेट के साथ भिन्न होती है, इसलिए हिस्टोलॉजी के लिए मान्य एंटीबॉडी को साइटोलॉजी पर समान रूप से व्यवहार करने के लिए नहीं माना जा सकता है। व्याख्या किसी एक सकारात्मक परिणाम के बजाय एक विशिष्ट अंतर को हल करने के लिए चुने गए मार्करों के एक पैनल में स्टेनिंग के पैटर्न और वितरण पर निर्भर करती है।

Clinical relevance

इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री ट्यूमर वर्गीकरण, वंश निर्धारण और साइटोलॉजिक नमूनों में मेटास्टेटिक रोग के संभावित प्राथमिक स्थल की पहचान में योगदान करती है। संदर्भ सामग्री के रूप में यह वर्णन करता है कि इम्यूनोफेनोटाइपिक जानकारी कैसे उत्पन्न और व्याख्या की जाती है; एंटीबॉडी पैनल का चुनाव और रिपोर्टिंग प्रयोगशाला के निर्णय हैं और व्यक्तिगत नैदानिक ​​सलाह नहीं हैं।

Evidence & guidelines

साइटोलॉजिक सामग्री पर इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री की समीक्षाएं इस बात पर जोर देती हैं कि परिणाम तैयारी और सत्यापन पर बहुत अधिक निर्भर करते हैं, और मार्करों को मॉर्फोलॉजिक संदर्भ में व्याख्या किए गए पैनलों के रूप में लागू किया जाना चाहिए (Fetsch & Abati, 2001; Hirokawa et al., 2024)। सब्सट्रेट-विशिष्ट सत्यापन पर बार-बार जोर दिया जाता है क्योंकि एंटीबॉडी का प्रदर्शन हिस्टोलॉजिक वर्गों और साइटोलॉजिक तैयारी के बीच भिन्न हो सकता है।

History

एंटीबॉडी-आधारित स्थानीयकरण, ऊतक वर्गों के लिए विकसित, धीरे-धीरे साइटोलॉजी के लिए अनुकूलित किया गया क्योंकि पहचान रसायन विज्ञान और एंटीजन-संरक्षण विधियों में सुधार हुआ। इफ्यूजन साइटोलॉजी एक प्रारंभिक और प्रभावशाली परीक्षण स्थल था, जहां प्रतिक्रियाशील मेसोथेलियल कोशिकाओं को मेटास्टेटिक कार्सिनोमा से अलग करने के लिए पैनल इकट्ठे किए गए थे, एक समस्या जिसकी फेट्स और अबाती (2001) द्वारा विस्तार से समीक्षा की गई थी।

Debates

हिस्टोलॉजी-मान्य एंटीबॉडी साइटोलॉजिक सब्सट्रेट में कितनी हस्तांतरणीय हैं?

क्योंकि स्मीयर, तरल-आधारित मीडिया और सेल ब्लॉक में फिक्सेशन और तैयारी भिन्न होती है, एंटीबॉडी संवेदनशीलता और विशिष्टता ऊतक वर्गों से आगे नहीं बढ़ सकती है, इसलिए नैदानिक ​​उपयोग से पहले सब्सट्रेट-विशिष्ट सत्यापन की वकालत की जाती है।

Seminal works

• fetsch-abati-2001

Frequently asked questions

इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री और इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री में क्या अंतर है?

दोनों एंटीजन को स्थानीयकृत करने के लिए एंटीबॉडी का उपयोग करते हैं, लेकिन इम्यूनोसाइटोकेमिस्ट्री को साइटोलॉजिक तैयारी जैसे स्मीयर, तरल-आधारित स्लाइड और सेल ब्लॉक पर लागू किया जाता है, जबकि इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री को ऊतक के वर्गों पर लागू किया जाता है; विभिन्न सब्सट्रेट के लिए अलग सत्यापन की आवश्यकता होती है।

मार्करों का उपयोग एकल के बजाय पैनलों में क्यों किया जाता है?

कोई भी एकल मार्कर पूरी तरह से विशिष्ट नहीं होता है, इसलिए एक परिभाषित अंतर को संबोधित करने के लिए चुना गया एक पैनल, और मॉर्फोलॉजी के साथ मिलकर व्याख्या किया गया, किसी भी व्यक्तिगत दाग की तुलना में अधिक विश्वसनीय इम्यूनोफेनोटाइप देता है।