नमूना संग्रह और तैयारी

नमूना संग्रह और तैयारी साइटोपैथोलॉजी का पूर्व-विश्लेषणात्मक आधार है: यह उन तकनीकों का समूह है जिनके द्वारा शरीर से कोशिकीय सामग्री प्राप्त की जाती है और एक स्लाइड पर प्रस्तुत की जाती है ताकि व्यक्तिगत कोशिकाओं को माइक्रोस्कोप के तहत जांचा जा सके। चूंकि साइटोलॉजिक निदान बरकरार ऊतक वास्तुकला के बजाय कोशिकाओं और छोटे कोशिका समूहों की आकृति विज्ञान पर निर्भर करता है, इसलिए नमूना कैसे एकत्र किया जाता है, स्थानांतरित किया जाता है, स्थिर किया जाता है और दाग लगाया जाता है, यह काफी हद तक निर्धारित करता है कि एक विश्वसनीय निदान संभव है या नहीं।

Definition

नमूना संग्रह और तैयारी में साइटोप्रिपरेटरी चरण शामिल हैं - नमूनाकरण, स्लाइड या फिक्सेटिव माध्यम में स्थानांतरण, स्थिरीकरण और धुंधलापन - जो एक नैदानिक साइटोलॉजिक नमूने को रूपात्मक व्याख्या के लिए उपयुक्त माइक्रोस्कोप स्लाइड में परिवर्तित करते हैं।

Scope

यह क्षेत्र पाठक को साइटोलॉजी में उपयोग किए जाने वाले मुख्य तैयारी मार्गों से परिचित कराता है: प्रत्यक्ष पारंपरिक स्मीयर, तरल-आधारित प्रसंस्करण, स्थिरीकरण रणनीतियाँ, और दो महान धुंधला परंपराएँ (अल्कोहल-स्थिर पैपानिकोलाउ दाग और हवा में सूखे रोमानोव्स्की दाग)। यह इन्हें प्रयोगशाला विधियों के रूप में प्रस्तुत करता है जो नमूने की पर्याप्तता और व्याख्यात्मकता को आकार देते हैं; यह एक प्रक्रियात्मक मैनुअल नहीं है और रोगी-विशिष्ट निर्देश नहीं देता है।

Sub-topics

• वायु-शुष्क तैयारी और रोमानोव्स्की दाग
• पारंपरिक स्मियर तैयारी
• तरल-आधारित साइटोलॉजी
• पैपानिकोलाऊ अभिरंजन
• नमूना स्थिरीकरण और अभिरंजन

Key concepts

• साइटोलॉजी का पूर्व-विश्लेषणात्मक चरण
• नमूने की पर्याप्तता और कोशिकीयता
• पारंपरिक स्मीयर बनाम तरल-आधारित प्रसंस्करण
• गीला स्थिरीकरण बनाम हवा में सुखाना
• पैपानिकोलाउ दाग और रोमानोव्स्की दाग
• स्थिरीकरण, पारदर्शिता और परमाणु विवरण
• सुखाने की कलाकृति

Mechanisms

एक साइटोलॉजिक नमूना तरल में निलंबित कोशिकाओं के रूप में या एक उपकरण पर खुरच कर शुरू होता है। पारंपरिक तैयारी में सामग्री को सीधे एक ग्लास स्लाइड पर फैलाया जाता है और या तो तुरंत स्थिर किया जाता है (गीला-स्थिर) पैपानिकोलाउ दाग के लिए या रोमानोव्स्की दाग के लिए हवा में सूखने दिया जाता है। तरल-आधारित साइटोलॉजी में नमूने को इसके बजाय एक संरक्षक तरल में धोया जाता है और एक उपकरण स्लाइड पर कोशिकाओं की एक पतली, यहां तक कि मोनोलियर जमा करता है, जिससे अस्पष्ट रक्त, बलगम और ओवरलैप कम हो जाता है (Arbyn 2008)। स्थिरीकरण कोशिकीय प्रोटीन को स्थिर करता है और परमाणु क्रोमेटिन विवरण को संरक्षित करता है; धुंधला कदम तब रंग और कंट्रास्ट प्रदान करता है जो नाभिक, साइटोप्लाज्म और पृष्ठभूमि को पढ़ने की अनुमति देता है। तैयारी और दाग का चुनाव नैदानिक प्रश्न से मेल खाता है - पैपानिकोलाउ दाग उपकला कोशिकाओं में परमाणु और क्रोमेटिन विवरण का पक्षधर है, जबकि हवा में सूखे रोमानोव्स्की दाग साइटोप्लाज्मिक और स्ट्रोमल विशेषताओं पर जोर देते हैं जो आकांक्षा साइटोलॉजी में उपयोगी होते हैं (Papanicolaou 1942; Koss & Melamed 2006)।

Clinical relevance

एक साइटोलॉजिक नमूने की पर्याप्तता और गुणवत्ता नैदानिक सटीकता पर एक ऊपरी सीमा निर्धारित करती है, यही कारण है कि नमूना तैयारी इस बात का अभिन्न अंग है कि साइटोलॉजी स्क्रीनिंग और निदान में कैसे योगदान करती है। यह क्षेत्र बताता है कि विश्वसनीय साइटोलॉजिक सामग्री कैसे उत्पन्न होती है और प्रयोगशाला अभ्यास को समझने के लिए पृष्ठभूमि के रूप में अभिप्रेत है; यह व्यक्तिगत नैदानिक निर्णयों का आधार नहीं है।

Evidence & guidelines

तैयारी विधियों के लिए तुलनात्मक साक्ष्य गर्भाशय ग्रीवा स्क्रीनिंग में सबसे अधिक विकसित है, जहां व्यवस्थित समीक्षा में तरल-आधारित और पारंपरिक साइटोलॉजी को मोटे तौर पर समान सटीकता वाला पाया गया, जबकि तरल-आधारित प्रसंस्करण असंतोषजनक नमूनों को कम करता है (Arbyn 2008; Siebers 2012, तरल-आधारित-साइटोलॉजी प्रविष्टि में उद्धृत)। बेथेस्डा सिस्टम जैसे रिपोर्टिंग फ्रेमवर्क में स्पष्ट नमूना-पर्याप्तता मानदंड शामिल हैं जो सीधे तैयारी की गुणवत्ता पर निर्भर करते हैं (Solomon 2002, संबंधित विषय प्रविष्टियों में उद्धृत)।

History

आधुनिक साइटोप्रिपरेशन बीसवीं शताब्दी की शुरुआत में जॉर्ज पैपानिकोलाउ द्वारा स्थिर स्मीयरों के लिए एक बहुक्रोमैटिक दाग के विकास से विकसित हुआ, जिसने जनसंख्या-स्तर पर गर्भाशय ग्रीवा स्क्रीनिंग को संभव बनाया। प्रत्यक्ष स्मीयर और अल्कोहल स्थिरीकरण ने दशकों तक अभ्यास पर हावी रहा; 1990 के दशक से तरल-आधारित विधियों ने मानकीकृत मोनोलियर तैयारी की शुरुआत की, और क्षेत्र अवशिष्ट नमूना सामग्री पर आणविक और सहायक परीक्षणों को एकीकृत करना जारी रखता है (Koss & Melamed 2006; Bibbo & Wilbur 2014)।

Key figures

• George Papanicolaou
• Leopold Koss

Seminal works

• papanicolaou-1942
• arbyn-2008
• koss-melamed-2006

Frequently asked questions

साइटोलॉजी में नमूना संग्रह और नमूना तैयारी के बीच क्या अंतर है?

संग्रह रोगी से कोशिकीय नमूना प्राप्त करना है; तैयारी प्रयोगशाला प्रसंस्करण है - स्लाइड या तरल में स्थानांतरण, स्थिरीकरण और धुंधलापन - जो उस नमूने को एक पठनीय माइक्रोस्कोप स्लाइड में बदल देता है। दोनों पूर्व-विश्लेषणात्मक चरण का हिस्सा हैं जो नमूने की गुणवत्ता को नियंत्रित करते हैं।

साइटोलॉजी के नमूने को दाग लगाने से पहले स्थिर या हवा में सुखाने की आवश्यकता क्यों होती है?

स्थिरीकरण या नियंत्रित हवा में सुखाना कोशिकीय संरचना को संरक्षित करता है और कोशिकाओं को एक प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य तरीके से डाई लेने के लिए तैयार करता है। गीला स्थिरीकरण पैपानिकोलाउ दाग जैसे परमाणु-विस्तार दागों का समर्थन करता है, जबकि जानबूझकर हवा में सुखाना रोमानोव्स्की दागों के लिए प्रारंभिक कदम है।