ल्यूकेमिया में साइटोकेमिस्ट्री और फ्लो साइटोमेट्री

साइटोकेमिस्ट्री और फ्लो साइटोमेट्री वे प्रयोगशाला तकनीकें हैं जो ल्यूकेमिया निदान को एक रूपात्मक धारणा से एक परिभाषित वंश और इम्यूनोफेनोटाइप में बदल देती हैं। साइटोकेमिकल दाग ल्यूकेमिक कोशिकाओं के एंजाइमी और चयापचय गुणों को प्रकट करते हैं, जबकि मल्टीपैरामीटर फ्लो साइटोमेट्री एक साथ कई सतह और इंट्रासेलुलर मार्करों को मापती है, जो वंश को निर्धारित करती है और मापने योग्य अवशिष्ट रोग का पता लगाती है।

Definition

साइटोकेमिस्ट्री और फ्लो साइटोमेट्री ल्यूकेमिक कोशिकाओं को चिह्नित करने के लिए प्रयोगशाला विधियाँ हैं: साइटोकेमिस्ट्री उन दागों का उपयोग करती है जो एंजाइमी या जैव रासायनिक विशेषताओं (उदाहरण के लिए मायलोपरॉक्सिडेस गतिविधि) को प्रकट करते हैं, और मल्टीपैरामीटर फ्लो साइटोमेट्री वंश को निर्धारित करने, इम्यूनोफेनोटाइप को परिभाषित करने और अवशिष्ट रोग को मापने के लिए प्रति कोशिका कई सतह और इंट्रासेलुलर एंटीजन को मापती है।

Scope

यह विषय रूपात्मकता से परे ल्यूकेमिक कोशिकाओं को चिह्नित करने के लिए उपयोग की जाने वाली विधियों को शामिल करता है: मायलोपरॉक्सिडेस जैसे क्लासिक साइटोकेमिकल दाग, और आधुनिक मल्टीपैरामीटर फ्लो साइटोमेट्रिक इम्यूनोफेनोटाइपिंग, जिसमें मानकीकृत एंटीबॉडी पैनल और मापने योग्य (न्यूनतम) अवशिष्ट रोग का पता लगाना शामिल है। यह प्रयोगशाला पद्धति पर संदर्भ सामग्री है, न कि एक नैदानिक प्रोटोकॉल।

Key concepts

• मायलोपरॉक्सिडेस और अन्य साइटोकेमिकल दाग
• इम्यूनोफेनोटाइप द्वारा वंश निर्धारण
• मल्टीपैरामीटर (बहुरंगी) फ्लो साइटोमेट्री
• मानकीकृत एंटीबॉडी पैनल
• असामान्य एंटीजन अभिव्यक्ति
• गेटिंग और जनसंख्या विश्लेषण
• मापने योग्य (न्यूनतम) अवशिष्ट रोग का पता लगाना

Mechanisms

साइटोकेमिकल दाग कोशिका-विशिष्ट एंजाइमों और घटकों का फायदा उठाते हैं: उदाहरण के लिए, मायलोपरॉक्सिडेस गतिविधि, मायलॉइड वंश को चिह्नित करती है और एक दागदार स्मीयर पर तीव्र मायलॉइड ल्यूकेमिया को तीव्र लिम्फोब्लास्टिक ल्यूकेमिया से अलग करने में मदद करती है। फ्लो साइटोमेट्री कोशिकाओं को लेजर के सामने एक धारा में निलंबित करती है और प्रकाश प्रकीर्णन और एंटीबॉडी-बाउंड मार्करों से प्रतिदीप्ति को रिकॉर्ड करती है, जिससे प्रत्येक कोशिका पर कई एंटीजन को मापा जा सकता है; विशिष्ट और असामान्य एंटीजन संयोजन वंश को परिभाषित करते हैं और ल्यूकेमिक आबादी की पहचान करते हैं। मानकीकृत पैनलों के साथ उच्च संवेदनशीलता पर लागू यही दृष्टिकोण, उपचार के बाद छोटे अवशिष्ट ल्यूकेमिक आबादी का पता लगाता है जिसे मापने योग्य अवशिष्ट रोग (वैन डोंगें एट अल।, 2012; शूरहुइस एट अल।, 2018) कहा जाता है।

Clinical relevance

ये तकनीकें वंश निर्धारण और इम्यूनोफेनोटाइपिंग को रेखांकित करती हैं जिन पर आधुनिक ल्यूकेमिया वर्गीकरण निर्भर करता है, और फ्लो साइटोमेट्रिक मापने योग्य-अवशिष्ट-रोग मूल्यांकन साहित्य में एक महत्वपूर्ण प्रतिक्रिया मार्कर बन गया है। यह प्रविष्टि संदर्भ स्तर पर विधियों का वर्णन करती है और किसी व्यक्तिगत रोगी के परिणामों की व्याख्या के लिए मार्गदर्शन नहीं है।

Evidence & guidelines

यूरोफ्लो एंटीबॉडी पैनल जैसे मानकीकरण प्रयास प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य फ्लो साइटोमेट्रिक इम्यूनोफेनोटाइपिंग को परिभाषित करते हैं, और यूरोपीय ल्यूकेमियानेट एमआरडी वर्किंग पार्टी तीव्र मायलॉइड ल्यूकेमिया में मापने योग्य अवशिष्ट रोग मूल्यांकन के लिए आम सहमति मानदंड प्रदान करती है; वंश मानदंड डब्ल्यूएचओ वर्गीकरण में भी अंतर्निहित हैं (वैन डोंगें एट अल।, 2012; शूरहुइस एट अल।, 2018; आर्बर एट अल।, 2016)।

History

साइटोकेमिकल दाग तीव्र ल्यूकेमिया के रूपात्मक निदान को परिष्कृत करने और वंश को निर्धारित करने का मूल साधन था। फ्लो साइटोमेट्रिक इम्यूनोफेनोटाइपिंग ने तब प्रति कोशिका कई एंटीजन को मापकर वंश निर्धारण के लिए साइटोकेमिस्ट्री को काफी हद तक प्रतिस्थापित कर दिया, और मानकीकरण पहल और मापने योग्य-अवशिष्ट-रोग आम सहमति दस्तावेजों ने बाद में इसकी भूमिका को प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य, उच्च-संवेदनशीलता मूल्यांकन (वैन डोंगें एट अल।, 2012; शूरहुइस एट अल।, 2018) तक विस्तारित किया।

Seminal works

• van-dongen-2012
• schuurhuis-2018

Frequently asked questions

तीव्र ल्यूकेमिया में मायलोपरॉक्सिडेस दाग क्यों उपयोगी है?

मायलोपरॉक्सिडेस मायलॉइड वंश का एक मार्कर है, इसलिए एक साइटोकेमिकल दाग पर इसकी उपस्थिति तीव्र मायलॉइड ल्यूकेमिया के निदान का समर्थन करती है और इसे तीव्र लिम्फोब्लास्टिक ल्यूकेमिया से अलग करने में मदद करती है।

फ्लो साइटोमेट्री द्वारा मापने योग्य अवशिष्ट रोग का पता लगाना क्या है?

यह उपचार के बाद बनी रहने वाली ल्यूकेमिक कोशिकाओं की छोटी आबादी का पता लगाने के लिए उच्च-संवेदनशीलता मल्टीपैरामीटर फ्लो साइटोमेट्री का उपयोग है, जो नियमित रूपात्मकता पर दिखाई देने वाले स्तर से नीचे है, प्रतिक्रिया के एक मार्कर के रूप में।