क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण

क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण जटिल प्राकृतिक-उत्पाद मिश्रणों को अलग-अलग यौगिकों में हल करने के लिए प्रमुख डाउनस्ट्रीम तकनीक है। एक मोबाइल चरण द्वारा ले जाया गया मिश्रण एक स्थिर चरण पर से गुजरता है, और जो घटक स्थिर चरण के साथ अधिक मजबूती से बातचीत करते हैं, वे अधिक धीरे-धीरे पलायन करते हैं, इसलिए घटक अंतरिक्ष या समय में अलग हो जाते हैं। साधारण कॉलम और पतली-परत क्रोमैटोग्राफी से लेकर उच्च-प्रदर्शन तरल और प्रतिधारा वेरिएंट तक, क्रोमैटोग्राफी प्राकृतिक उत्पाद अलगाव और गुणवत्ता नियंत्रण का मुख्य आधार है।

Definition

क्रोमैटोग्राफिक पृथक्करण एक मिश्रण को एक मोबाइल चरण में घोलकर, एक स्थिर चरण पर से गुजारकर हल करता है; घटक दो चरणों के लिए अपनी अलग-अलग आत्मीयता के अनुसार अलग हो जाते हैं, जो उनके प्रवासन की सापेक्ष दरों को निर्धारित करते हैं।

Scope

यह प्रविष्टि विभेदक-विभाजन सिद्धांत को शामिल करती है जो सभी क्रोमैटोग्राफी, फार्माकोग्नॉसी में उपयोग किए जाने वाले प्रमुख तरीकों और प्रारंभिक अलगाव और विश्लेषणात्मक फिंगरप्रिंटिंग दोनों में क्रोमैटोग्राफी की भूमिका को रेखांकित करती है। यह एक कार्यप्रणाली संदर्भ है और उपकरण प्रोटोकॉल, खुराक या चिकित्सीय निर्देश प्रदान नहीं करता है।

Core questions

• मोबाइल और स्थिर चरणों के बीच विभेदक विभाजन घटकों को कैसे अलग करता है?
• कौन से क्रोमैटोग्राफिक मोड प्राकृतिक उत्पाद के किन वर्गों के लिए उपयुक्त हैं?
• प्रारंभिक क्रोमैटोग्राफी (अलगाव के लिए) को विश्लेषणात्मक क्रोमैटोग्राफी (फिंगरप्रिंटिंग के लिए) से कैसे अलग किया जाता है?
• बायोएसे-निर्देशित अलगाव कार्यप्रवाह में क्रोमैटोग्राफी को कैसे एकीकृत किया जाता है?

Key concepts

• मोबाइल चरण और स्थिर चरण
• विभेदक विभाजन और प्रतिधारण
• कॉलम और पतली-परत क्रोमैटोग्राफी
• उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी
• प्रतिधारा क्रोमैटोग्राफी
• प्रारंभिक बनाम विश्लेषणात्मक क्रोमैटोग्राफी
• क्रोमैटोग्राफिक फिंगरप्रिंटिंग
• बायोएसे-निर्देशित अलगाव

Mechanisms

सभी क्रोमैटोग्राफी एक गतिशील मोबाइल चरण और एक निश्चित स्थिर चरण के बीच विश्लेषकों के बार-बार संतुलन का उपयोग करती है: एक घटक जो स्थिर चरण में अधिक मजबूती से विभाजित होता है, उसे अधिक समय तक बनाए रखा जाता है और अधिक धीरे-धीरे पलायन करता है, इसलिए एक मिश्रण हल किए गए बैंड या चोटियों में फैलता है (स्टिचर, 2008)। स्थिर चरण (उदाहरण के लिए सामान्य- या रिवर्स-फेज सिलिका) और मोबाइल-चरण संरचना को समायोजित करना यौगिकों के एक लक्ष्य वर्ग के लिए चयनात्मकता को ट्यून करता है, और आधुनिक चयनात्मक और लघु तकनीकें इस संकल्प को और तेज करती हैं (लेफेब्रे एट अल।, 2021)। प्राकृतिक उत्पाद के काम में क्रोमैटोग्राफी दो भूमिकाएँ निभाती है: शुद्ध यौगिकों को अलग करने के लिए प्रारंभिक पृथक्करण, अक्सर बायोएसे द्वारा निर्देशित ताकि सक्रिय अंशों को लगातार कॉलम के माध्यम से ट्रैक किया जा सके, और पहचान और गुणवत्ता नियंत्रण के लिए फेनोलिक एसिड जैसे घटकों को फिंगरप्रिंट और मापने के लिए विश्लेषणात्मक पृथक्करण (स्टिचर, 2008; आर्सेउज़ एट अल।, 2013)।

Clinical relevance

क्रोमैटोग्राफी शुद्ध संदर्भ यौगिक, मानकीकृत फिंगरप्रिंट और सामग्री परख प्रदान करती है जो हर्बल औषधीय उत्पादों और प्राकृतिक-उत्पाद दवा लीड की पहचान और गुणवत्ता नियंत्रण को रेखांकित करती है, इसलिए इसे समझना यह समझने में मदद करता है कि ऐसे उत्पादों को कैसे चित्रित किया जाता है। यह वर्णनात्मक कार्यप्रणाली संदर्भ है और नैदानिक मार्गदर्शन नहीं है; इसका उपयोग, खुराक या संकेत पर कोई सिफारिश नहीं है।

Evidence & guidelines

क्रोमैटोग्राफिक पहचान और परख के तरीके हर्बल दवाओं के लिए फार्माकोपियल मोनोग्राफ में अंतर्निहित हैं, और कार्यप्रणाली साहित्य प्राकृतिक उत्पादों को अलग करने और मापने के लिए उपयोग किए जाने वाले तरीकों और हालिया प्रगति की समीक्षा करता है (स्टिचर, 2008; लेफेब्रे एट अल।, 2021; आर्सेउज़ एट अल।, 2013)। यह प्रविष्टि संदर्भ स्तर पर इस साहित्य को सारांशित करती है और यह एक नियामक या नैदानिक दिशानिर्देश नहीं है।

History

क्रोमैटोग्राफी की उत्पत्ति मिखाइल त्सवेट के बीसवीं सदी की शुरुआत में एक पैक किए गए कॉलम पर पौधों के पिगमेंट के पृथक्करण से हुई, जिससे इसका नाम निकला, और कागज, पतली-परत, गैस और उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी के माध्यम से उत्तरोत्तर विस्तृत किया गया, जो प्राकृतिक उत्पाद अलगाव और विश्लेषण के लिए अपरिहार्य हो गया (स्टिचर, 2008)।

Seminal works

• sticher-2008
• lefebvre-2021

Frequently asked questions

प्राकृतिक उत्पाद अलगाव के लिए क्रोमैटोग्राफी क्यों केंद्रीय है?

प्राकृतिक अर्क जटिल मिश्रण होते हैं, और क्रोमैटोग्राफी उन्हें अलग-अलग यौगिकों में हल कर सकती है, जिसमें घटकों के मोबाइल और स्थिर चरण के बीच विभाजन के तरीके में छोटे अंतर का फायदा उठाया जाता है, जिससे यह कच्चे अर्क से शुद्ध यौगिक तक का मुख्य मार्ग बन जाता है।

यहां प्रारंभिक और विश्लेषणात्मक क्रोमैटोग्राफी में क्या अंतर है?

प्रारंभिक क्रोमैटोग्राफी का उपयोग करने योग्य मात्रा में शुद्ध यौगिकों को अलग करने और पुनर्प्राप्त करने के लिए किया जाता है, जबकि विश्लेषणात्मक क्रोमैटोग्राफी का उपयोग पहचान और गुणवत्ता-नियंत्रण उद्देश्यों के लिए घटकों की पहचान, फिंगरप्रिंट और मात्रा निर्धारित करने के लिए किया जाता है।