उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी

उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी (HPLC) उच्च दबाव में एक पैक्ड कॉलम पर एक पौधे के अर्क के घटकों को अलग करती है, जिसमें डिटेक्टर होते हैं जो विशिष्ट फिंगरप्रिंट प्रोफाइल और मार्कर यौगिकों के सटीक मात्रात्मक निर्धारण दोनों की अनुमति देते हैं। यह हर्बल सामग्री के मात्रात्मक मानकीकरण के लिए प्रमुख वाद्य विधि है और आधुनिक फार्माकोग्नोस्टिक गुणवत्ता नियंत्रण में एक केंद्रीय उपकरण है।

Definition

उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी एक कॉलम पृथक्करण तकनीक है जिसमें एक तरल मोबाइल चरण उच्च दबाव में एक पैक्ड स्थिर चरण के माध्यम से नमूना घटकों को वहन करता है, उन्हें पहचान के लिए हल करता है ताकि उन्हें प्रतिधारण और पैटर्न द्वारा पहचाना जा सके और संदर्भ मानकों के विरुद्ध मात्रा निर्धारित की जा सके।

Scope

यह प्रविष्टि कॉलम तरल क्रोमैटोग्राफी के सिद्धांत, फिंगरप्रिंटिंग और कच्चे औषधियों और अर्क में मार्कर घटकों के मात्रात्मक विश्लेषण के लिए HPLC के उपयोग, और क्रोमैटोग्राफिक गुणवत्ता-नियंत्रण विधियों के बीच इसके स्थान को कवर करती है। यह एक कार्यप्रणाली संदर्भ है न कि नैदानिक ​​मार्गदर्शन।

Core questions

• क्या किसी नमूने का HPLC प्रोफाइल घोषित सामग्री के लिए संदर्भ फिंगरप्रिंट से मेल खाता है?
• विनिर्देश के सापेक्ष मार्कर या सक्रिय घटकों की मात्रात्मक सामग्री क्या है?
• क्या क्रोमैटोग्राम में मिलावट, प्रतिस्थापन, या सीमा से बाहर के घटक सामने आते हैं?

Key concepts

• उच्च दबाव में कॉलम तरल क्रोमैटोग्राफी
• स्थिर और मोबाइल चरण; रिवर्स-फेज पृथक्करण
• प्रतिधारण समय और संकल्प
• डिटेक्टर (UV/DAD, MS, ELSD)
• संदर्भ मानकों के विरुद्ध मात्रात्मक विश्लेषण
• HPLC फिंगरप्रिंटिंग और मार्कर यौगिक
• फिंगरप्रिंट का केमोमेट्रिक विश्लेषण

Mechanisms

एक पंप एक तरल मोबाइल चरण को चलाता है जो घुले हुए नमूने को महीन स्थिर-चरण कणों से भरे एक कॉलम के माध्यम से ले जाता है; घटक चरणों के बीच उनके भिन्न विभाजन के अनुसार अलग होते हैं और विशिष्ट प्रतिधारण समय पर निकलते हैं। पराबैंगनी या डायोड-सरणी, मास स्पेक्ट्रोमेट्रिक, या वाष्पीकरणीय प्रकाश-प्रकीर्णन उपकरणों जैसे डिटेक्टर निकलने वाले शिखरों को रिकॉर्ड करते हैं, जिससे एक फिंगरप्रिंट प्रोफाइल और, संदर्भ मानकों के विरुद्ध अंशांकन द्वारा, मार्कर घटकों की मात्रात्मक सामग्री दोनों का उत्पादन होता है। गुणात्मक फिंगरप्रिंट को मात्रात्मक विश्लेषण के साथ जोड़ना—अक्सर केमोमेट्रिक तकनीकों के साथ व्याख्या किया जाता है—हर्बल सामग्री की पहचान, स्थिरता और सामग्री नियंत्रण के लिए एक शक्तिशाली आधार प्रदान करता है (xie-2006, liang-2010, who-2011-qc)।

Clinical relevance

HPLC हर्बल सामग्री में मार्कर या सक्रिय घटकों की पहचान और सटीक माप के सत्यापन का समर्थन करता है, जो बैच की स्थिरता और गुणवत्ता का दस्तावेजीकरण करने के लिए केंद्रीय है। यह प्रविष्टि एक विश्लेषणात्मक विधि का वर्णन करती है और व्यक्तिगत उपचार निर्णयों का आधार नहीं है।

Evidence & guidelines

WHO गुणवत्ता-नियंत्रण मार्गदर्शन और फार्माकोपियल मोनोग्राफ हर्बल सामग्री की पहचान और मात्रात्मक विश्लेषण के लिए HPLC का उपयोग करते हैं, और क्रोमैटोग्राफिक फिंगरप्रिंटिंग की समीक्षाएं HPLC को, अक्सर केमोमेट्रिक्स के साथ, हर्बल गुणवत्ता मूल्यांकन के लिए एक अग्रणी दृष्टिकोण के रूप में स्थापित करती हैं (who-2011-qc, xie-2006, liang-2010, evans-2009)।

History

उच्च-प्रदर्शन तरल क्रोमैटोग्राफी बीसवीं शताब्दी के अंत में शास्त्रीय कॉलम क्रोमैटोग्राफी से विकसित हुई और फार्मास्युटिकल विश्लेषण में प्रमुख मात्रात्मक पृथक्करण विधि बन गई; फिंगरप्रिंटिंग और मार्कर मात्रात्मक निर्धारण के लिए इसके अनुप्रयोग ने इसे हर्बल-दवा मानकीकरण का एक आधार बना दिया, जिसे तेजी से मास स्पेक्ट्रोमेट्री और केमोमेट्रिक डेटा विश्लेषण के साथ जोड़ा गया (xie-2006, liang-2010, evans-2009)।

Seminal works

• xie-2006
• liang-2010

Frequently asked questions

मात्रात्मक मानकीकरण के लिए HPLC को क्यों प्राथमिकता दी जाती है?

क्योंकि यह संवेदनशील डिटेक्टरों के साथ एक कॉलम पर घटकों को हल करता है और संदर्भ मानकों के विरुद्ध कैलिब्रेट किया जा सकता है, यह मार्कर या सक्रिय यौगिकों की सामग्री को सटीक रूप से मापता है, जो सरल गुणात्मक विधियाँ नहीं कर सकती हैं।

HPLC फिंगरप्रिंट क्या है?

यह परिभाषित प्रतिधारण समय पर शिखरों का विशिष्ट पैटर्न है जो एक अर्क द्वारा उत्पन्न होता है; इस प्रोफाइल की तुलना एक संदर्भ से करने से पहचान और स्थिरता की पुष्टि करने में मदद मिलती है और इसे केमोमेट्रिक तकनीकों के साथ विश्लेषण किया जा सकता है।