جداسازی کروماتوگرافی
جداسازی کروماتوگرافی، تکنیک اصلی پاییندستی برای تفکیک مخلوطهای پیچیده محصولات طبیعی به ترکیبات منفرد است. مخلوطی که توسط فاز متحرک حمل میشود، از روی یک فاز ثابت عبور میکند و اجزایی که با فاز ثابت تعامل قویتری دارند، آهستهتر حرکت میکنند، بنابراین اجزا در فضا یا زمان از هم جدا میشوند. از کروماتوگرافی ستونی ساده و لایه نازک گرفته تا انواع مایع با کارایی بالا و جریان متقابل، کروماتوگرافی ابزار اصلی جداسازی و کنترل کیفیت محصولات طبیعی است.
Definition
جداسازی کروماتوگرافی یک مخلوط را با عبور دادن آن، که در یک فاز متحرک حل شده است، از روی یک فاز ثابت تفکیک میکند؛ اجزا بر اساس تمایلات متفاوت خود به دو فاز، که نرخهای نسبی مهاجرت آنها را تعیین میکند، از هم جدا میشوند.
Scope
این مدخل، اصل تقسیمبندی افتراقی را که زیربنای تمام کروماتوگرافیها است، حالتهای اصلی مورد استفاده در فارماکوگنوزی، و نقش کروماتوگرافی را هم در جداسازی آمادهسازی و هم در انگشتنگاری تحلیلی پوشش میدهد. این یک مرجع روششناختی است و پروتکلهای ابزار، دوز یا دستورالعملهای درمانی را ارائه نمیدهد.
Core questions
- چگونه تقسیمبندی افتراقی بین فازهای متحرک و ثابت، اجزا را از هم جدا میکند؟
- کدام حالتهای کروماتوگرافی برای کدام دستههای محصولات طبیعی مناسب هستند؟
- چگونه کروماتوگرافی آمادهسازی (برای جداسازی) از کروماتوگرافی تحلیلی (برای انگشتنگاری) متمایز میشود؟
- چگونه کروماتوگرافی در یک گردش کار جداسازی هدایتشده با بیواسی ادغام میشود؟
Key concepts
- فاز متحرک و فاز ثابت
- تقسیمبندی افتراقی و نگهداری
- کروماتوگرافی ستونی و لایه نازک
- کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا
- کروماتوگرافی جریان متقابل
- کروماتوگرافی آمادهسازی در مقابل کروماتوگرافی تحلیلی
- انگشتنگاری کروماتوگرافی
- جداسازی هدایتشده با بیواسی
Mechanisms
تمام کروماتوگرافیها از تعادل مکرر آنالیتها بین یک فاز متحرک در حال حرکت و یک فاز ثابت بهره میبرند: جزئی که به شدت بیشتری به فاز ثابت تقسیم میشود، مدت طولانیتری حفظ شده و آهستهتر مهاجرت میکند، بنابراین یک مخلوط به باندهای تفکیکشده یا پیکها گسترش مییابد (Sticher, 2008). تنظیم فاز ثابت (به عنوان مثال سیلیکای فاز نرمال یا معکوس) و ترکیب فاز متحرک، گزینشپذیری را برای یک کلاس هدف از ترکیبات تنظیم میکند، و تکنیکهای انتخابی و مینیاتوری مدرن این تفکیک را بیشتر بهبود میبخشند (Lefebvre et al., 2021). در کار با محصولات طبیعی، کروماتوگرافی دو نقش دارد: جداسازی آمادهسازی برای جداسازی ترکیبات خالص، که اغلب با بیواسی هدایت میشود تا فراکسیونهای فعال از طریق ستونهای متوالی ردیابی شوند، و جداسازی تحلیلی برای انگشتنگاری و کمیسازی اجزا مانند اسیدهای فنولیک برای شناسایی و کنترل کیفیت (Sticher, 2008; Arceusz et al., 2013).
Clinical relevance
کروماتوگرافی ترکیبات مرجع خالص، انگشتنگاریهای استاندارد شده و سنجشهای محتوایی را تولید میکند که زیربنای شناسایی و کنترل کیفیت محصولات دارویی گیاهی و ترکیبات پیشرو دارویی طبیعی هستند، بنابراین درک آن از ارزیابی انتقادی نحوه شناسایی چنین محصولاتی حمایت میکند. این یک زمینه روششناختی توصیفی است و راهنمایی بالینی نیست؛ هیچ توصیهای در مورد استفاده، دوز یا نشانه را شامل نمیشود.
Evidence & guidelines
روشهای شناسایی و سنجش کروماتوگرافی در مونوگرافهای فارماکوپهای برای داروهای گیاهی گنجانده شدهاند، و ادبیات روششناختی حالتها و پیشرفتهای اخیر مورد استفاده برای جداسازی و کمیسازی محصولات طبیعی را بررسی میکند (Sticher, 2008; Lefebvre et al., 2021; Arceusz et al., 2013). این مدخل این ادبیات را در سطح مرجع خلاصه میکند و یک دستورالعمل نظارتی یا بالینی نیست.
History
کروماتوگرافی با جداسازی رنگدانههای گیاهی توسط میخائیل تسوت در اوایل قرن بیستم بر روی یک ستون پر شده آغاز شد، که نام آن از آنجا گرفته شده است، و به تدریج از طریق کروماتوگرافی کاغذی، لایه نازک، گازی و مایع با کارایی بالا توسعه یافت و برای جداسازی و تجزیه و تحلیل محصولات طبیعی ضروری شد (Sticher, 2008).
Related topics
Seminal works
- sticher-2008
- lefebvre-2021
Frequently asked questions
- چرا کروماتوگرافی برای جداسازی محصولات طبیعی محوری است؟
- عصارههای طبیعی مخلوطهای پیچیدهای هستند و کروماتوگرافی میتواند آنها را با بهرهگیری از تفاوتهای کوچک در نحوه تقسیمبندی اجزا بین یک فاز متحرک و یک فاز ثابت، به ترکیبات منفرد تفکیک کند، که آن را به مسیر اصلی از عصاره خام به ترکیب خالص تبدیل میکند.
- تفاوت بین کروماتوگرافی آمادهسازی و تحلیلی در اینجا چیست؟
- کروماتوگرافی آمادهسازی برای جداسازی و بازیابی ترکیبات خالص در مقادیر قابل استفاده انجام میشود، در حالی که کروماتوگرافی تحلیلی برای شناسایی، انگشتنگاری و کمیسازی اجزا برای اهداف شناسایی و کنترل کیفیت انجام میشود.